鸭甲肝病毒抗体的间接ELISA检测方法的建立

发布时间：2021-02-05 23:45

　　为建立一种切实可行的鸭甲肝病毒抗体的检测方法,将1株临床分离的3型鸭甲肝病毒的VP3基因进行原核表达的纯化蛋白作为包被抗原,初步建立了检测鸭肝炎病毒抗体的间接ELISA方法。通过条件优化,得到VP3蛋白最佳包被浓度为0.159 5μg/mL,血清最佳稀释倍数为1∶200。结果显示,建立的ELISA方法具有较好的特异性、敏感性和重复性,与商品化的双抗原夹心ELISA的符合率为92.5%,且该方法可同时检测1型和3型鸭甲肝病毒抗体,因而可用于临床免疫鸭甲肝病毒的种鸭血清抗体水平的检测和卵黄抗体的效价测定。 

【文章来源】：中国兽医杂志. 2020,56(03)北大核心

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料
2 间接ELISA方法的建立
    2. 1 包被抗原和抗体最佳工作浓度确定
    2.2 酶标二抗最佳工作浓度确定
    2.3 临界值确定
    2.4 特异性试验
    2.5 敏感性试验
    2.6 重复性试验
    2.7 间接ELISA与双抗原夹心ELISA符合率试验
3 结果
    3.1 VP3重组蛋白的纯化
    3.2 包被抗原和抗体最佳工作浓度测定结果
    3.3 酶标二抗最佳工作浓度测定
    3.4 临界值测定
    3.5 特异性试验
    3.6 敏感性试验
    3.7 重复性试验
    3.8 间接ELISA与双抗原夹心ELISA符合率试验
4 讨论



本文编号：3019782