黄体期高低饲喂水平影响湖羊卵泡发育的表达谱分析
发布时间：2021-02-07 09:52
研究指出,限饲会引起动物乏情。黄体期给予绵羊短期补饲可促进其卵泡的发育,提高排卵率;而在卵泡期给予补饲则无促排卵效应。本实验室的前期研究也表明,黄体溶解前短期限饲可抑制卵泡发育,黄体期提高营养水平可增强绵羊的卵泡发育能力。营养影响卵泡发育的分子机理目前尚不清楚。因此,探寻黄体期高低饲喂影响湖羊卵泡发育的差异表达基因及其功能和分子调控网络,对于规模化羊场母羊的科学饲养管理、了解湖羊黄体期的激素分泌特点,以及对营养影响湖羊繁殖性能的分子调节机理的深入研究具有重要意义。颗粒细胞在卵母细胞的营养供给和成熟中发挥着至关重要的作用。为了调查基因的表达水平及其与卵泡发育的关系,本研究对黄体期高饲喂组（H组,1.5×M）和低饲喂组（L组,0.5 ×M）各8只共计16只湖羊进行屠宰,取卵巢后分组剥离直径>2.5mm卵泡的颗粒细胞,提取RNA,进行表达谱测序,筛选出170个显著差异表达的基因。为了研究基因的功能和表达模式,本试验又进一步做了 GO和KEGG通路分析,以及表达模式聚类分析。研究结果如下:1.试验中对两组高低饲喂水平湖羊的颗粒细胞提取RNA,进行了 Illumina表达谱测序,最终获得了...
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：106 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１．卵巢结构模式图［１３】??巧ｇ．?１－１．?ＳｔｒｕｃＵｉｒａｌ?ｐａｔｔｅｒｎ?ｏｆ?化ｅ?ｏｖａｒｙ??
图１－２．哺乳动物的卵泡波１１３１??Ｆｉｇ．?１－２．?Ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ?ｗａｖｅ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｍａｍｍａｌｓ??卵泡波是由卵泡内激素和卵巢内营养共同调控的。营养可影响卵泡波的持续时??间。补饲可抑制雌二醇在优势卵泡的分泌，使优势卵泡的优势性得到更长的维持??ｗ’４９ｌ。限饲则可缩短卵泡波的维持时间ｔｗｊ。绵羊卵泡波的持续时间约为５到１０天。??补饲对黄体期非排卵卵泡波的影响很小，而对排卵卵泡波的影响较明显。因为??排卵卵泡不受黄体分泌的孕丽对ＬＨ脉冲和卵泡雌二醇分泌造成的影响。而营养抑制??了卵泡阶段雌二醇浓度的升高，使其负反馈作用降低，导致ＦＳＨ分泌减少的延迟，??引起额外卵泡发育，使排卵率增加。??５表达谱测序及分析技术??５．１表达谱测序??
图２－１．试验设计展示图??Ｆｉｇ．?２－Ｌ?Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ?ｄｅｓｉｇｎ??１．４试验材料??１．４．１样本米集??屠宰Ｌ组和Ｈ组高低饲喂处理多产母羊１６只，取３２个卵巢，剥离直径＞２．５??ｔｎｍ卵泡内的颗粒细胞层，使用Ｑｉａｇｅｎ公司ＲＮｅａｓｙ?Ｍｉｃｒｏ?Ｋｉｔ试剂盒提取ＲＮＡ。紫??外分光光度计测定ＯＤ２６０／ＯＤ２８０的比值，检测提取ＲＮＡ的浓度和纯度。提纯的??ＲＮＡ放在－８０’Ｃ保存。??１．４．２主要试剂??孕丽海绵检（３０?ｍｇ）：购自澳大利亚Ｐｈａｒｍｐ?ＰＴＹ??Ｄ－ＰＢＳ（Ｇ化ＣＯ）；购自?Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ??
【参考文献】：
期刊论文
[1]趋化因子受体在人卵巢黄素化颗粒细胞中的表达[J]. 王莹,李大金,金莉萍. 现代免疫学. 2012(03)
[2]奶牛催乳素（PRL）及其受体（PRLR）基因研究进展[J]. 郭彦斌,杨海玲,王慧. 山东农业大学学报(自然科学版). 2009(03)
[3]ART中IGF-I、IGFBP-1与卵子质量及妊娠结局的相关研究[J]. 宫立国,程东凯,翁宁,邱广斌. 中国优生与遗传杂志. 2009(07)
[4]MPF和MAPK在卵母细胞成熟过程中的作用[J]. 韩树标,王爱萍,张力,肖雄,李跃民. 吉林畜牧兽医. 2007(05)
[5]猪前列腺素内过氧化物酶2（PTGS2）基因的遗传变异及其与繁殖性状相关性研究（英文）[J]. 丁能水,任冬仁,郭源梅,任军,颜瑛,麻俊武,陈克飞,黄路生. 遗传学报. 2006(03)
[6]小鼠卵丘-卵母细胞复合体CD44和间α胰蛋白酶抑制剂的表达[J]. 吴吉文,卓丽圣,王玮. 福建医科大学学报. 2005(04)
[7]解耦联蛋白2在人卵巢的表达及与年龄的关系[J]. 付志红,陈士岭,孔令红,李红,邢福祺. 基础医学与临床. 2005(11)
[8]Apoptosis in Granulosa cells during follicular atresia: relationship with steroids and insulin-like growth factors[J]. Yuan Song YU, Hong Shu SUI, Zheng Bin HAN, Wei LI, Ming Jiu LUO, Jing He TAN Laboratory of Animal Reproduction and Embryology College of Animal Sciences and Veterinary Medicine, Shandong Agricultural University, Taian, Shandong 271018, China Present address: College of life science. University of Beijing, Beijing, China.. Cell Research. 2004(04)
[9]卵泡生长发育及其调控的研究进展[J]. 舒建洪,哈利,石玉强,郑月茂,张涌. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2004(06)
[10]中国绵羊多胎性研究与利用现状[J]. 唐雪峰,罗玉柱. 畜牧与兽医. 2004(03)
博士论文
[1]巴美肉羊发情期血清生殖激素和卵巢microRNAs的鉴定及功能分析[D]. 祁云霞.内蒙古农业大学 2013
本文编号：3022050
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：106 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１．卵巢结构模式图［１３】??巧ｇ．?１－１．?ＳｔｒｕｃＵｉｒａｌ?ｐａｔｔｅｒｎ?ｏｆ?化ｅ?ｏｖａｒｙ??
图１－２．哺乳动物的卵泡波１１３１??Ｆｉｇ．?１－２．?Ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ?ｗａｖｅ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｍａｍｍａｌｓ??卵泡波是由卵泡内激素和卵巢内营养共同调控的。营养可影响卵泡波的持续时??间。补饲可抑制雌二醇在优势卵泡的分泌，使优势卵泡的优势性得到更长的维持??ｗ’４９ｌ。限饲则可缩短卵泡波的维持时间ｔｗｊ。绵羊卵泡波的持续时间约为５到１０天。??补饲对黄体期非排卵卵泡波的影响很小，而对排卵卵泡波的影响较明显。因为??排卵卵泡不受黄体分泌的孕丽对ＬＨ脉冲和卵泡雌二醇分泌造成的影响。而营养抑制??了卵泡阶段雌二醇浓度的升高，使其负反馈作用降低，导致ＦＳＨ分泌减少的延迟，??引起额外卵泡发育，使排卵率增加。??５表达谱测序及分析技术??５．１表达谱测序??
图２－１．试验设计展示图??Ｆｉｇ．?２－Ｌ?Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ?ｄｅｓｉｇｎ??１．４试验材料??１．４．１样本米集??屠宰Ｌ组和Ｈ组高低饲喂处理多产母羊１６只，取３２个卵巢，剥离直径＞２．５??ｔｎｍ卵泡内的颗粒细胞层，使用Ｑｉａｇｅｎ公司ＲＮｅａｓｙ?Ｍｉｃｒｏ?Ｋｉｔ试剂盒提取ＲＮＡ。紫??外分光光度计测定ＯＤ２６０／ＯＤ２８０的比值，检测提取ＲＮＡ的浓度和纯度。提纯的??ＲＮＡ放在－８０’Ｃ保存。??１．４．２主要试剂??孕丽海绵检（３０?ｍｇ）：购自澳大利亚Ｐｈａｒｍｐ?ＰＴＹ??Ｄ－ＰＢＳ（Ｇ化ＣＯ）；购自?Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ??
【参考文献】：
期刊论文
[1]趋化因子受体在人卵巢黄素化颗粒细胞中的表达[J]. 王莹,李大金,金莉萍. 现代免疫学. 2012(03)
[2]奶牛催乳素（PRL）及其受体（PRLR）基因研究进展[J]. 郭彦斌,杨海玲,王慧. 山东农业大学学报(自然科学版). 2009(03)
[3]ART中IGF-I、IGFBP-1与卵子质量及妊娠结局的相关研究[J]. 宫立国,程东凯,翁宁,邱广斌. 中国优生与遗传杂志. 2009(07)
[4]MPF和MAPK在卵母细胞成熟过程中的作用[J]. 韩树标,王爱萍,张力,肖雄,李跃民. 吉林畜牧兽医. 2007(05)
[5]猪前列腺素内过氧化物酶2（PTGS2）基因的遗传变异及其与繁殖性状相关性研究（英文）[J]. 丁能水,任冬仁,郭源梅,任军,颜瑛,麻俊武,陈克飞,黄路生. 遗传学报. 2006(03)
[6]小鼠卵丘-卵母细胞复合体CD44和间α胰蛋白酶抑制剂的表达[J]. 吴吉文,卓丽圣,王玮. 福建医科大学学报. 2005(04)
[7]解耦联蛋白2在人卵巢的表达及与年龄的关系[J]. 付志红,陈士岭,孔令红,李红,邢福祺. 基础医学与临床. 2005(11)
[8]Apoptosis in Granulosa cells during follicular atresia: relationship with steroids and insulin-like growth factors[J]. Yuan Song YU, Hong Shu SUI, Zheng Bin HAN, Wei LI, Ming Jiu LUO, Jing He TAN Laboratory of Animal Reproduction and Embryology College of Animal Sciences and Veterinary Medicine, Shandong Agricultural University, Taian, Shandong 271018, China Present address: College of life science. University of Beijing, Beijing, China.. Cell Research. 2004(04)
[9]卵泡生长发育及其调控的研究进展[J]. 舒建洪,哈利,石玉强,郑月茂,张涌. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2004(06)
[10]中国绵羊多胎性研究与利用现状[J]. 唐雪峰,罗玉柱. 畜牧与兽医. 2004(03)
博士论文
[1]巴美肉羊发情期血清生殖激素和卵巢microRNAs的鉴定及功能分析[D]. 祁云霞.内蒙古农业大学 2013
本文编号：3022050
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