基于c-Myc/CLIC4通路探究脂多糖致大鼠海马损伤的致病机制
发布时间：2021-02-07 09:59
在兽医学领域内毒素血症主要继发于动物子宫蓄脓、脓皮症及严重外科感染等过程中。内毒素血症常导致海马损伤,其临床发病率约为70%,能够引起脑萎缩,认知障碍甚至导致死亡。海马组织损伤后,病患常预后不良且病死率极高。但到目前为止内毒素血症致海马损伤的发生、发展的分子机制尚不清楚,导致临床上缺乏相应诊治方案及有效治疗药物,因此探究内毒素血症致海马损伤的发病机制已经成为兽医临床的热点及难点。本试验通过建立内毒素血症模型,从组织水平、细胞水平及分子水平三个层次探究LPS致海马损伤的发生发展机制。应用CRISPR/Cas9基因编辑技术对PC12细胞进行基因编辑,从而验证c-Myc/CLIC4通路在LPS诱导PC12细胞凋亡中的作用机制。为LPS致海马损伤的发病机制提供新思路,并为今后临床开展内毒素血症致海马损伤的治疗及进行相关的机制研究提供理论依据及试验基础。在体试验选取36只健康雄性SD大鼠,随机均分为CON组和LPS组。LPS组腹腔注射1 mL/kg LPS（10 mg/mL）,CON组腹腔注射1 mL/kg生理盐水。造模4 h后经心脏采血并处死大鼠,开颅,分离大脑皮层后取海马备用。通过检测大鼠血...
【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
大鼠血清炎症因子检测结果
东北农业大学农学硕士学位论文3.4 海马组织线粒体凋亡途径相关蛋白检测结果为探究 LPS 致海马神经元损伤的机制，本试验检测线粒体凋亡途径相关蛋白表达量Western blot 检测结果表明，与 CON 组相比，LPS 组中 Cyt C、cleaved caspase-3 和 Bax/B2 表达量显著升高，且差异极显著（p ＜ 0.01），cleaved caspase-9 的表达量显著升高，差显著（p ＜ 0.05）。具体结果见图 3-4。
图 3-7 LPS 对 PC12 细胞的毒性作用Fig. 3-7 Toxic effects of LPS on PC12 cells 及 c-Myc 基因敲除蛋白验证结果yc/CLIC4 通路在 LPS 致海马损伤中的作用，本试验分别敲除 P4 基因，建立单克隆细胞系，在蛋白水平上检验敲除是否成功，以便后续试验研究。敲除结果见图 3-8。图 3-8 CLIC4 及 c-Myc 基因敲除蛋白验证结果ig. 3-8 Protein validation results of CLIC4 and c-Myc gene knockou胞术检测 PC12 细胞凋亡结果
【参考文献】：
期刊论文
[1]原花青素对脂多糖所致内毒素血症小鼠的保护作用研究[J]. 付坤,魏梦圆,李雪萌,丁文文,夏鸿. 现代医药卫生. 2019(06)
[2]基于脂多糖-Toll样受体4信号通路抗内毒素血症机制研究进展[J]. 杜成成,尹婷,任如静,李晓强,沈建英,谭余庆. 国际药学研究杂志. 2017(12)
[3]CLIC4在饥饿诱导神经胶质瘤细胞自噬中的作用[J]. 袁兆新,高寒,池明,张宏宇,计国义. 中国实验诊断学. 2015(05)
[4]尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白和IL-18对脓毒血症患者伴急性肾损伤的早期诊断意义[J]. 严洁,许红阳,臧芝栋,梁锋鸣,杨挺. 苏州大学学报(医学版). 2011(05)
本文编号：3022056
【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
大鼠血清炎症因子检测结果
东北农业大学农学硕士学位论文3.4 海马组织线粒体凋亡途径相关蛋白检测结果为探究 LPS 致海马神经元损伤的机制，本试验检测线粒体凋亡途径相关蛋白表达量Western blot 检测结果表明，与 CON 组相比，LPS 组中 Cyt C、cleaved caspase-3 和 Bax/B2 表达量显著升高，且差异极显著（p ＜ 0.01），cleaved caspase-9 的表达量显著升高，差显著（p ＜ 0.05）。具体结果见图 3-4。
图 3-7 LPS 对 PC12 细胞的毒性作用Fig. 3-7 Toxic effects of LPS on PC12 cells 及 c-Myc 基因敲除蛋白验证结果yc/CLIC4 通路在 LPS 致海马损伤中的作用，本试验分别敲除 P4 基因，建立单克隆细胞系，在蛋白水平上检验敲除是否成功，以便后续试验研究。敲除结果见图 3-8。图 3-8 CLIC4 及 c-Myc 基因敲除蛋白验证结果ig. 3-8 Protein validation results of CLIC4 and c-Myc gene knockou胞术检测 PC12 细胞凋亡结果
【参考文献】：
期刊论文
[1]原花青素对脂多糖所致内毒素血症小鼠的保护作用研究[J]. 付坤,魏梦圆,李雪萌,丁文文,夏鸿. 现代医药卫生. 2019(06)
[2]基于脂多糖-Toll样受体4信号通路抗内毒素血症机制研究进展[J]. 杜成成,尹婷,任如静,李晓强,沈建英,谭余庆. 国际药学研究杂志. 2017(12)
[3]CLIC4在饥饿诱导神经胶质瘤细胞自噬中的作用[J]. 袁兆新,高寒,池明,张宏宇,计国义. 中国实验诊断学. 2015(05)
[4]尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白和IL-18对脓毒血症患者伴急性肾损伤的早期诊断意义[J]. 严洁,许红阳,臧芝栋,梁锋鸣,杨挺. 苏州大学学报(医学版). 2011(05)
本文编号：3022056
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