塞内卡病毒A间接ELISA检测方法的建立及应用

发布时间：2021-02-07 11:12

　　为了建立塞内卡病毒A（SVA）血清学诊断方法,本研究体外融合表达结构蛋白VP2和VP3全长,并建立了间接ELISA方法,并利用建立的方法,进一步研究了多次感染SVA后VP2/3抗体的消长规律。本研究首先从塞内卡GD01/2017株中扩增出VP2和VP3基因,将其克隆至表达载体pET-30a,IPTG诱导表达目的蛋白,经检测蛋白以包涵体形式存在。大量诱导表达后收集纯化包涵体蛋白,用6 mol/L盐酸胍溶解包涵体并测定其浓度为5.3 mg/mL,利用该蛋白建立了SVA结构蛋白VP2/3的间接ELISA检测方法。本研究进一步利用该ELISA方法检测SVA GD01/2017株多次感染SPF猪后的血清样品,绘制了VP2/3抗体的消长规律图,为后续疫苗免疫程序的制定奠定基础。 

【文章来源】：中国兽医杂志. 2020,56(04)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

纯化的包涵体蛋白的SDS-PAGE检测结果

最佳封闭液的确定

最佳兔抗猪HRP酶标二抗稀释度的确定

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
[1]猪圆环病毒3型Cap蛋白的原核表达纯化及其多克隆抗体的制备[D]. 高斌.沈阳农业大学 2019



本文编号：3022136