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塞内卡病毒A间接ELISA检测方法的建立及应用

发布时间:2021-02-07 11:12
  为了建立塞内卡病毒A(SVA)血清学诊断方法,本研究体外融合表达结构蛋白VP2和VP3全长,并建立了间接ELISA方法,并利用建立的方法,进一步研究了多次感染SVA后VP2/3抗体的消长规律。本研究首先从塞内卡GD01/2017株中扩增出VP2和VP3基因,将其克隆至表达载体pET-30a,IPTG诱导表达目的蛋白,经检测蛋白以包涵体形式存在。大量诱导表达后收集纯化包涵体蛋白,用6 mol/L盐酸胍溶解包涵体并测定其浓度为5.3 mg/mL,利用该蛋白建立了SVA结构蛋白VP2/3的间接ELISA检测方法。本研究进一步利用该ELISA方法检测SVA GD01/2017株多次感染SPF猪后的血清样品,绘制了VP2/3抗体的消长规律图,为后续疫苗免疫程序的制定奠定基础。 

【文章来源】:中国兽医杂志. 2020,56(04)北大核心

【文章页数】:6 页

【部分图文】:

塞内卡病毒A间接ELISA检测方法的建立及应用


纯化的包涵体蛋白的SDS-PAGE检测结果

塞内卡病毒A间接ELISA检测方法的建立及应用


最佳封闭液的确定

塞内卡病毒A间接ELISA检测方法的建立及应用


最佳兔抗猪HRP酶标二抗稀释度的确定

【参考文献】:
期刊论文
[1]塞内卡病毒A的RT-PCR检测方法的建立和应用[J]. 范慧,李亮,姜平,王先炜,李玉峰,白娟.  畜牧兽医学报. 2019(06)
[2]塞内卡病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用[J]. 王淑娟,王东方,赵月龙,谢彩华,赵雪丽,马震原,王华俊,杨朋霞,闫若潜.  中国预防兽医学报. 2019(05)
[3]A型塞内卡病毒VP2蛋白原核表达及其多克隆抗体的制备[J]. 张永宁,张舟,诸明欣,梅琳,王彩霞,吴绍强,林祥梅.  中国畜牧兽医. 2019(01)
[4]塞内卡谷病毒荧光RT-RPA快速检测方法的建立[J]. 林彦星,曹琛福,花群俊,黄超华,杨俊兴,徐铮,史卫军,阮周曦,花群义.  中国兽医科学. 2018(12)
[5]塞内卡病毒病研究进展[J]. 张永宁,吴绍强,林祥梅.  畜牧兽医学报. 2017(08)

硕士论文
[1]猪圆环病毒3型Cap蛋白的原核表达纯化及其多克隆抗体的制备[D]. 高斌.沈阳农业大学 2019



本文编号:3022136

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