E种肠道病毒HY12株VP1宿主互作蛋白的筛选及鉴定

发布时间：2021-02-08 06:15

　　牛肠道病毒（Bovine enterovirus,BEV）感染是临床上以消化系统和呼吸系统病症为特征的传染病,给养牛业造成了较为严重的经济损失。目前,国内许多地区报道有该病的暴发。由于本病在国内为新发传染病,有关该病的发病机理及病毒与宿主细胞间的互作等方面缺乏研究。本研究应用酵母双杂交技术,以肠道病毒HY12毒株的结构蛋白VP1构建重组质粒,表达诱饵蛋白,通过筛选及鉴定与VP1互作的宿主蛋白,探究病毒与宿主蛋白之间的相互作用,以期确定VP1蛋白在病毒入侵机体过程中的功能,为最终阐明肠道病毒感染机制奠定基础。为筛选E种肠道病毒HY12毒株编码的VP1蛋白的宿主互作蛋白,本实验应用PCR技术扩增出HY12病毒VP1蛋白基因的完整序列,并将其克隆到酵母载体pGBKT7中,构建重组诱饵质粒pGBKT7-VP1。将重组质粒转化到酵母菌株AH109中,通过对比重组质粒组和空白质粒组不同时间点的OD₆₀₀值,检测其对酵母细胞的毒性,并把含有诱饵重组质粒的酵母菌涂布在缺陷型培养基上验证其自激活活性。将转有诱饵载体的AH109菌株与表达酵母双杂交MDBK细胞cDNA文库的Y187菌... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
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英文缩略词表
引言
第一章 文献综述
    1 肠道病毒研究进展
    2 酵母双杂交系统研究进展
第二章 酵母双杂交系统筛选HY12株VP1的宿主互作蛋白
    2.1 材料
    2.2 方法
    2.3 结果
    2.4 讨论
    2.5 小结
第三章 HY12株VP1与PAK1和ACTG1 相互作用的验证
    3.1 材料
    3.2 方法
    3.3 结果
    3.4 讨论
    3.5 小结
结论
参考文献
导师简介
作者简介
致谢



本文编号：3023492