猪胸膜炎放线杆菌重组外膜蛋白LOLA诱导小鼠产生免疫保护力的研究

发布时间：2021-02-09 02:04

　　为筛选出具有广谱抗猪传染性胸膜肺炎作用的疫苗候选分子,本研究利用PCR技术从血清1型猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（App）基因组克隆外膜蛋白（Omp）lola基因。经生物信息学分析显示,App lola基因由633 bp组成,编码210个氨基酸,不同的血清型之间具有很高的同源性。将App lola克隆至pET-32a（+）,转化大肠杆菌,表达重组蛋白rLOLA。取4周龄小鼠60只,随机分为6组,分别于0、2、4周经皮下免疫:弗氏不完全佐剂（IFA）+10μg rLOLA（低剂量组）、IFA+30μg rLOLA（中剂量组）、IFA+50μg rLOLA（高剂量组）、30μg rLOLA（rLOLA组）、IFA（对照组）和生理盐水（对照组）。ELISA检测结果显示,第3次免疫接种后相较于对照组（IFA组和生理盐水组）,实验组小鼠血清IgG水平均明显升高,尤以高剂量组小鼠（IFA+50μg rLOLA）更显著（p<0.01）。于第3次免疫后2周,利用10×LD50 App对小鼠腹腔注射攻毒,5 d后对照组小鼠全部死亡,30μg rLOLA、IFA+50μg rLOLA、IFA+30μg ... 

【文章来源】：中国预防兽医学报. 2020,42(06)北大核心

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要实验材料及实验动物
    1.2 引物的设计与合成
    1.3 App lola基因的克隆及序列分析
    1.4 重组表达载体的构建
    1.5 重组蛋白的表达、纯化与鉴定
    1.6 小鼠免疫保护试验
    1.7 统计分析
2 结果
    2.1 App lola基因的克隆及序列分析
    2.2 重组质粒的构建与鉴定
    2.3 rLOLA的表达与鉴定
    2.4 小鼠特异性IgG抗体检测及免疫效力试验结果
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]血清1和3型多杀性巴氏杆菌铁调控外膜蛋白共同抗原的初步分析[J]. 余旭平,邬栋栋,刘晓宁,胡东建,杜鑫,陈玉银.  畜牧兽医学报. 2008(02)
[2]猪传染性胸膜肺炎重组亚单位疫苗保护效果的评价及其免疫机制的研究[J]. 王勇,刘思国,王春来,邵美丽,宫强,刘建东,迟磊,赵昆,郭设平,李广兴.  中国兽医科学. 2006(12)



本文编号：3024865