抗猪嗜血支原体单味中药的体外筛选
发布时间:2021-02-11 07:02
近年来,随着养猪业的快速发展,猪嗜血支原体引起的疾病—猪嗜血支原体病在全国各地大范围发生、流行,不仅引起猪生长发育缓慢、出栏推迟、种猪生产性能下降,而且还引起猪只大批死亡。由于猪嗜血支原体感染后,常呈隐性经过,且极易引起其他病原体的继发感染或混合感染,给确诊和防治造成困难,给养猪业的持续发展造成很大阻碍,应引起高度重视。本研究采用猪嗜血支原体体外培养方法,选择中药中兼有抗菌抗病毒效果的8种中药,即板蓝根、青蒿、黄连、柴胡、金银花、连翘、鱼腥草、黄芩,在1640培养基中添加不同浓度药物于37℃、5%CO2条件下培养猪嗜血支原体,同时设立不添加药物的对照组进行对比,观察不同时间红细胞上猪嗜血支原体附着情况并计算其感染率,同时提取嗜血支原体的DNA进行荧光定量PCR分析研究单味中药体外抗猪嗜血支原体的效果。结果表明:4000μg/mL和2000μg/mL的青蒿、黄芩对猪嗜血支原体附着红细胞有比较明显抑制的作用,其次是4000μg/mL和2000μg/mL的黄连,而板蓝根、柴胡、金银花、连翘和鱼腥草与不添加任何药物的对照组相比差异不明显。实验结果证明:青蒿、黄芩对嗜血支原体附着红细胞有明显抑制...
【文章来源】:山西农业大学山西省
【文章页数】:50 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
前言
1 概述
2 病原学与生物学特性
2.1 分类
2.2 生活史
2.3 形态结构
2.4 染色特性与运动特性
2.5 培养特性
2.6 抵抗力
3 发病机制
3.1 红细胞膜改变
3.2 免疫抑制
4 流行病学特点
4.1 流行状况与危害
4.2 传染源与易感动物
4.3 发病年龄、季节与流行特点
4.4 传播方式
5 临床症状
6 病理变化
7 实验室诊断
7.1 鲜血悬滴镜检
7.2 血涂片染色镜检
7.3 补体结合试验
7.4 间接血凝试验
7.5 酶联免疫吸附试验
7.6 分子生物学诊断
7.7 生物学和动物学诊断
8 预防与治疗
8.1 预防
8.2 治疗
9 研究目的与意义
材料与方法
1 材料
1.1 病料的采集
1.2 主要试剂
1.3 主要溶液的配制
1.4 主要仪器及设备
2 方法
2.1 猪嗜血支原体的检测
2.2 抗猪嗜血支原体的体外药物筛选
2.3 Real-time RT-PCR检测
结果
1 猪嗜血支原体的检测
1.1 直接镜检
1.2 血液中猪嗜血支原体DNA检测结果
1.3 经培养后嗜血支原体的DNA检测结果
2 中药浓度的确定
3 不同浓度的中药对猪嗜血支原体感染率的影响
3.1 板蓝根对猪嗜血支原体感染率的影响
3.2 青蒿对猪嗜血支原体感染率的影响
3.3 黄连对猪嗜血支原体感染率的影响
3.4 柴胡对猪嗜血支原体感染率的影响
3.5 金银花对猪嗜血支原体感染率的影响
3.6 连翘对猪嗜血支原体感染率的影响
3.7 鱼腥草对猪嗜血支原体感染率的影响
3.8 黄芩对猪嗜血支原体感染率的影响
4 实时荧光定量PCR结果
5 不同中药对M.suis mRNA相对表达量的影响
讨论
1 中药的选择
2 中药浓度的筛选
3 抗猪嗜血支原体最佳药物的确定
结论
参考文献
Abstract
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]猪嗜血支原体诊断方法的比较[J]. 陈福斌,赵爱云,刘婷,何强,井波. 安徽农业科学. 2011(20)
[2]猪嗜血支原体PCR及荧光定量PCR检测方法的建立和比较[J]. 张长莹,张莉莉,李玉峰,李文良,刘捷,陈闻,姜平. 中国预防兽医学报. 2011(06)
[3]新疆阿拉尔垦区猪嗜血支原体PCR检测方法的建立[J]. 赵爱云,何强,井波. 安徽农业科学. 2011(14)
[4]嗜血支原体(附红细胞体)病原学研究进展[J]. 严丽华,袁聪俐,朱凝瑜,华修国. 上海交通大学学报(农业科学版). 2009(02)
[5]猪附红细胞体Dot-ELISA检测方法的建立[J]. 张守发,张国宏. 中国预防兽医学报. 2006(01)
[6]猪繁殖与呼吸综合征并发附红细胞体病的诊疗报告[J]. 王辉,于申业,刘霞,李景德,刘方娜,孟凡磊,王妮. 动物医学进展. 2005(07)
[7]猪附红细胞体病[J]. 古少鹏. 当代畜禽养殖业. 2003(07)
[8]猪 犬 人附红细胞体对小白鼠的感染试验[J]. 张伟清,徐丽华. 中国兽医科技. 2003(06)
[9]猪附红细胞体病并发链球菌病的诊治[J]. 张瑞光. 中国动物检疫. 2002(09)
[10]牛附红细胞体体外培养试验[J]. 张守发,张国宏,宋建臣,许应天. 中国兽医科技. 2002(08)
硕士论文
[1]猪附红细胞体病病原学特性的研究[D]. 张雪峰.四川农业大学 2005
本文编号:3028728
【文章来源】:山西农业大学山西省
【文章页数】:50 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
前言
1 概述
2 病原学与生物学特性
2.1 分类
2.2 生活史
2.3 形态结构
2.4 染色特性与运动特性
2.5 培养特性
2.6 抵抗力
3 发病机制
3.1 红细胞膜改变
3.2 免疫抑制
4 流行病学特点
4.1 流行状况与危害
4.2 传染源与易感动物
4.3 发病年龄、季节与流行特点
4.4 传播方式
5 临床症状
6 病理变化
7 实验室诊断
7.1 鲜血悬滴镜检
7.2 血涂片染色镜检
7.3 补体结合试验
7.4 间接血凝试验
7.5 酶联免疫吸附试验
7.6 分子生物学诊断
7.7 生物学和动物学诊断
8 预防与治疗
8.1 预防
8.2 治疗
9 研究目的与意义
材料与方法
1 材料
1.1 病料的采集
1.2 主要试剂
1.3 主要溶液的配制
1.4 主要仪器及设备
2 方法
2.1 猪嗜血支原体的检测
2.2 抗猪嗜血支原体的体外药物筛选
2.3 Real-time RT-PCR检测
结果
1 猪嗜血支原体的检测
1.1 直接镜检
1.2 血液中猪嗜血支原体DNA检测结果
1.3 经培养后嗜血支原体的DNA检测结果
2 中药浓度的确定
3 不同浓度的中药对猪嗜血支原体感染率的影响
3.1 板蓝根对猪嗜血支原体感染率的影响
3.2 青蒿对猪嗜血支原体感染率的影响
3.3 黄连对猪嗜血支原体感染率的影响
3.4 柴胡对猪嗜血支原体感染率的影响
3.5 金银花对猪嗜血支原体感染率的影响
3.6 连翘对猪嗜血支原体感染率的影响
3.7 鱼腥草对猪嗜血支原体感染率的影响
3.8 黄芩对猪嗜血支原体感染率的影响
4 实时荧光定量PCR结果
5 不同中药对M.suis mRNA相对表达量的影响
讨论
1 中药的选择
2 中药浓度的筛选
3 抗猪嗜血支原体最佳药物的确定
结论
参考文献
Abstract
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]猪嗜血支原体诊断方法的比较[J]. 陈福斌,赵爱云,刘婷,何强,井波. 安徽农业科学. 2011(20)
[2]猪嗜血支原体PCR及荧光定量PCR检测方法的建立和比较[J]. 张长莹,张莉莉,李玉峰,李文良,刘捷,陈闻,姜平. 中国预防兽医学报. 2011(06)
[3]新疆阿拉尔垦区猪嗜血支原体PCR检测方法的建立[J]. 赵爱云,何强,井波. 安徽农业科学. 2011(14)
[4]嗜血支原体(附红细胞体)病原学研究进展[J]. 严丽华,袁聪俐,朱凝瑜,华修国. 上海交通大学学报(农业科学版). 2009(02)
[5]猪附红细胞体Dot-ELISA检测方法的建立[J]. 张守发,张国宏. 中国预防兽医学报. 2006(01)
[6]猪繁殖与呼吸综合征并发附红细胞体病的诊疗报告[J]. 王辉,于申业,刘霞,李景德,刘方娜,孟凡磊,王妮. 动物医学进展. 2005(07)
[7]猪附红细胞体病[J]. 古少鹏. 当代畜禽养殖业. 2003(07)
[8]猪 犬 人附红细胞体对小白鼠的感染试验[J]. 张伟清,徐丽华. 中国兽医科技. 2003(06)
[9]猪附红细胞体病并发链球菌病的诊治[J]. 张瑞光. 中国动物检疫. 2002(09)
[10]牛附红细胞体体外培养试验[J]. 张守发,张国宏,宋建臣,许应天. 中国兽医科技. 2002(08)
硕士论文
[1]猪附红细胞体病病原学特性的研究[D]. 张雪峰.四川农业大学 2005
本文编号:3028728
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3028728.html