绵羊精液稀释液、冷冻程序和离心除精浆的优化研究

发布时间：2021-02-21 21:48

　　精液超低温冷冻保存技术是利用液氮作为冷冻源,经特殊处理后保存在超低温环境下,从而达到长期保存的目的。绵羊精子和其他物种相比,存在着生理生化方面的特性,对低温的抵抗力较其他动物低,因此绵羊精液冷冻后精子活率、顶体完整率等精子质量评价指标较低,冷冻效果一直不理想,难以在绵羊的人工授精中得以推广应用。为了提高绵羊冷冻精液品质,本实验以精液解冻后精子活率、顶体完整率、质膜完整率和谷草转氨酶及乳酸脱氢酶活性等为检测指标,对绵羊精液稀释液配方、细管冻精制作程序和离心除精浆技术进行了优化研究,实验结果如下：（1）在6种精液冷冻稀释液配方中,以含有D-果糖、柠檬酸和Tris的F配方冷冻效果最好,解冻后精子活率达到了0.41。（2）细管冻精制作过程中的精液最佳平衡时间为：2.5h,随着平衡时间的延长而解冻后精子品质开始降低；冷冻效果最好的是在温度为40℃,解冻时间为10s的条件下的解冻程序,解冻后精子活率极显著（P<0.01）高于解冻条件为70℃,6s下的解冻程序。（3）在精液冷冻的关键环节-精液冷冻降温速率中,以冷冻降温程序b（4℃～-15℃区间内降温速率；5℃/min,-15℃～-90℃区间内... 

【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
目录
插图和附表清单
缩略语表
1 引言
    1.1 精液冷冻保存技术的研究进展
        1.1.1 精液冷冻保存研究历史
        1.1.2 精液冷冻保存的意义
        1.1.3 家畜精液冷冻技术研究现状
    1.2 绵羊精液冷冻保存技术的研究进展
        1.2.1 绵羊精子形态与结构
        1.2.2 绵羊精液冷冻保存技术的研究现状
        1.2.3 绵羊精液冷冻保存研究的主要问题
        1.2.4 绵羊精液冷冻保存研究的展望
    1.3 精液冷冻保存的机理
        1.3.1 玻璃态学说
        1.3.2 微晶学说
    1.4 精子冷冻过程受损机制
        1.4.1 溶液性损伤
        1.4.2 冰晶的机械性损伤
        1.4.3 氧化性性损伤
    1.5 精液冷冻保存的影响因素
        1.5.1 稀释液
        1.5.2 冷冻保护剂
        1.5.3 温度变化
        1.5.4 冷冻方法
        1.5.5 解冻程序
        1.5.6 离心除精浆
    1.6 绵羊精液品质评定方法
        1.6.1 绵羊精液品质评定的常规指标
        1.6.2 精液品质评定的新方法
    1.7 技术路线
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验地点
        2.1.2 实验动物
        2.1.3 实验药品
        2.1.4 实验器材
    2.2 实验方法
        2.2.1 精液稀释液的配制
        2.2.2 精液的采集及品质检测
        2.2.3 精液的稀释及分装
        2.2.4 精液的平衡
        2.2.5 精液的冷冻
        2.2.6 精液解冻后的品质检测
3 结果与分析
    3.1 不同稀释液对解冻后精子品质的影响
    3.2 不同稀释方法对解冻后精子品质的影响
    3.3 不同平衡时间对解冻后精子品质的影响
    3.4 不同冷冻降温程序对解冻后精子品质的影响
    3.5 不同冷冻方法对解冻后精子品质的影响
    3.6 不同解冻程序对解冻后精子品质的影响
    3.7 离心除精浆对解冻后精子品质的影响
4 讨论
    4.1 不同稀释液对解冻后精子品质的影响
    4.2 不同稀释方法对解冻后精子品质的影响
    4.3 不同平衡时间对解冻后精子品质的影响
    4.4 不同解冻降温程序对解冻后精子品质的影响
    4.5 不同冷冻方法对解冻后精子品质的影响
    4.6 不同解冻程序对解冻后精子品质的影响
    4.7 离心除精浆对解冻后精子品质的影响
5 结论
致谢
参考文献
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3044969