荷斯坦奶牛性控冻精DNA损伤的检测及其后代早期生长发育

发布时间：2021-02-22 04:04

　　本文分别采用彗星实验法及TUNEL法确定荷斯坦奶牛性控冻精与常规冻精的DNA损伤程度，并对性控后代的健康状况进行综合评价，初步分析，经分选的精子是否能够正常发育并繁殖后代。1.分别将奶牛的性控冻精和常规冻精凝胶混合液在裂解液中作用后，使用普通载玻片双层铺胶，15V，150mA，4℃电泳45min，吖啶橙染色后在荧光显微镜下检测、拍照，CASP软件分析后用SPSS11.5统计分析。结果：建立了奶牛精子DNA损伤的5级彗星图谱；性控冻精的DNA损伤系数为116，显著高于常规冻精的28（P<0.01）；彗星率为63.06%，显著高于常规冻精的31.13%（P<0.01）。2.采用末端转移酶介导的dUTP末端标记法（TUNEL）分别对性控冻精和常规冻精进行检测。结果：TUNEL法检测性控冻精DNA的损伤率为（63.32±0.56）%，显著高于常规冻精的（31.67±1.03）%（P<0.01）。3.对800头健康青年荷斯坦奶牛分两组进行人工授精，400头输性控冻精，剩余400头输常规冻精作为对照。结果显示：性控组受胎率为67.3%，产活率为84.2%，妊娠天数为275.8±4... 

【文章来源】：塔里木大学新疆维吾尔自治区

【文章页数】：39 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
目录
第1章 文献综述
    前言
    1.1 SCGE 法检测 DNA 损伤的研究进展
        1.1.1 SCGE 法检测机理的研究
        1.1.2 SCGE 检测技术的改进
        1.1.3 SCGE 的应用
        1.1.4 存在的问题及展望
    1.2 TUNEL 的研究进展
        1.2.1 TUNEL 法检细胞凋亡的原理
        1.2.2 TUNEL 的应用
        1.2.3 TUNEL 存在的问题及展望
    1.3 性控冻精后代的研究现状
        1.3.1 性控技术
        1.3.2 性控冻精应用效果研究现状
        1.3.3 存在的问题及展望
    1.4 研究目的及意义
        1.4.1 建立 SCGE 检测奶牛精子 DNA 损伤方法
        1.4.2 建立 TUNEL 检测奶牛精子 DNA 损伤方法
        1.4.3 对性控后代的评价
第2章 奶牛性控与常规冻精 DNA 损伤的彗星检测
    2.1 材料与方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 主要试剂与仪器
        2.1.3 方法
    2.2 结果
        2.2.1 奶牛精子 DNA 损伤各级彗星图
        2.2.2 奶牛性控与常规冻精 DNA 完整性
    2.3 讨论
第3章 TUNEL 法检测奶牛性控冻精 DNA 损伤
    3.1 材料与方法
        3.1.1 实验材料
        3.1.2 试剂
        3.1.3 方法
    3.2 结果
    3.3 讨论
第4章 荷斯坦奶牛性控冻精应用效果的研究
    4.1 材料与方法
        4.1.1 实验材料
        4.1.2 实验方法
        4.1.3 数据统计及分析
    4.2 结果
    4.3 讨论及展望
第5章 结论
参考文献
致谢
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
[1]小叶满江红共生蓝细菌的细胞程序性死亡研究[D]. 高媛.福建农林大学 2009



本文编号：3045421