牛多杀性巴氏杆菌诱导家蝇幼虫抑制性消减文库的构建及部分差异表达基因的分析

发布时间：2021-02-22 03:11

　　随着抗生素耐药性问题的日趋严峻,研究和筛选具有新型作用机理的抗菌药物已成为当前医药领域里亟待解决的问题。而抗菌肽具有独特的,不同于抗生素的抗菌机制,仅作用于原核细胞和发生病变的真核细胞,对正常的真核细胞几乎没有影响,且不易产生耐药性。家蝇长期生长于杂菌横生的恶劣环境,却具备极强的生存能力,这说明其体内的自身免疫防御机制发挥着作用,自身产生抗菌活性物质的结果。因此,越来越多的人将目光投向家蝇抗菌肽的研究,并期望成为新一代有效抗癌、抗病毒、抗细菌药物。本研究以3日龄家蝇幼虫为材料,将全部家蝇幼虫随机分为两组,其中一组以致病性较强的牛源多杀性巴氏杆菌为诱导菌对虫体进行针刺诱导,作为实验组（Tester）;另一组以同样的方法对虫体进行无菌针刺,作为对照组（Driver）。相同条件培养24h后,分别提取活体RNA并分离纯化mRNA,逆转录获得cDNA。运用抑制性消减杂交技术成功构建了牛多杀性巴氏杆菌诱导家蝇幼虫的正向、反向cDNA文库,以PCR法和反Northern点杂交法进行两次筛选成功获取差异表达基因,最后利用RACE技术成功获得部分差异表达基因的全长序列,并进行核酸、氨基酸等功能的分析预测... 

【文章来源】：吉林农业大学吉林省

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
目录
绪论
第一篇 文献综述
    第一章 昆虫抗菌肽的研究进展
        1.1 昆虫抗菌肽的分类及结构
        1.2 昆虫抗菌肽的抗菌机制
        1.3 昆虫抗菌肽的应用
        1.4 昆虫抗菌肽研究中存在的问题
        1.5 家蝇抗菌肽的国内外研究现状
第二篇 研究内容
    第一章 牛多杀性巴氏杆菌诱导家蝇幼虫抑制性消减文库的构建及筛选鉴定
        1.1 材料与方法
        1.2 结果
        1.3 讨论
        1.4 小结
    第二章 牛多杀性巴氏杆菌诱导家蝇幼虫部分差异表达基因的克隆及序列分析
        2.1 材料与方法
        2.2 结果
        2.3 讨论
        2.4 小结
结论
参考文献
作者简介
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]昆虫抗菌肽的抗菌效应及在畜牧生产中的应用前景[J]. 骆雪,张春勇,郭荣富.  家畜生态学报. 2012(05)
[2]生物抗菌肽的作用机制与研究进展[J]. 勒步尚,崔永康,施进文.  养殖技术顾问. 2011(11)
[3]家蝇抗菌肽抑菌活性及其稳定性研究[J]. 张悦,蒋林,王德友,周立武,常志英.  日用化学品科学. 2011(09)
[4]抗菌肽的研究进展及其在畜牧业上的运用[J]. 陈星星,陈宏惠,郑新添.  福建畜牧兽医. 2011(01)
[5]昆虫抗菌肽结构、性质和基因调控[J]. 王义鹏,赖仞.  动物学研究. 2010(01)
[6]全长家蝇抗菌肽基因diptericin的克隆及生物信息学分析[J]. 杨小蓉,金小宝,曾爱华,朱家勇.  中国媒介生物学及控制杂志. 2009(05)
[7]抗菌肽在食品防腐剂中的研究应用[J]. 赵红艳,慕玉,赵宝华.  卫生研究. 2009(04)
[8]Molecular characterization and expression analysis of a chicken-type lysozyme gene from housefly （Musca domestica）[J]. Qian Ren, Xiaofan Zhao, Jinxing Wang School of Life Sciences, Shandong University, Jinan 250100, China.  遗传学报. 2009(01)
[9]家蝇幼虫抗菌肽MDL-2的电泳制备及其抗菌作用机理[J]. 宫霞,胡树凯,乐国伟.  昆虫学报. 2007(12)
[10]家蝇抗菌肽的分离纯化及生物学活性[J]. 屈军梅,黄庭汝,屈孝初,李文平,陈平洁.  中国兽医学报. 2007(03)

博士论文
[1]家蝇抗菌肽的分离及对细菌壁膜和DNA的作用[D]. 唐亚丽.江南大学 2009

硕士论文
[1]大孔吸附树脂吸附分离家蝇抗菌肽的研究[D]. 过振宇.江南大学 2008



本文编号：3045356