T-2毒素的代谢和毒作用信号转导研究

发布时间：2021-02-23 01:56

　　T-2毒素由镰刀菌（Fusarium）产生,是单端孢霉烯族毒素类中毒性最强的毒素。粮食作物,尤其小麦、大麦、燕麦和玉米是T-2毒素主要的污染对象。通过污染饲料,T-2毒素对动物和动物性食品消费者健康造成危害。T-2毒素与核糖体结合或破坏线粒体功能来抑制细胞的蛋白质和核酸的合成,通过激活MAPK、JAK/STAT等信号转导通路,导致炎性细胞因子的表达,诱导细胞凋亡和坏死。T-2毒素的代谢途径与毒性产生密切相关。T-2毒素进入动物体内被代谢成各种产物,其毒性差异变化巨大。HT-2毒素、3’-OH-T-2毒素和Neosolaniol（NEO）等是T-2毒素在动物体内的主要代谢产物。与T-2毒素相比,一些代谢产物毒性降低,但有些代谢物的毒性升高。研究清楚T-2毒素的代谢途径和主要代谢产物是揭示其在动物体内如何发挥毒性的重要前提。所以,揭示T-2毒素在动物中,尤其是食品动物中的代谢途径,对毒性机理研究的开展和食品安全以及人类健康等方面至关重要。然而,迄今为止,人们尚未清楚T-2毒素在食品动物中的整体代谢特点,尤其是不同种属动物对T-2毒素代谢转化存在着何种异同,尚无系统研究。T-2毒素引起核糖体... 

【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：229 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
略缩语表
1 前言
    1.1 立题依据
    1.2 T-2毒素代谢研究进展
    1.3 MAPK-JAK/STAT交联关系研究进展
    1.4 研究内容和目标
2 T-2毒素在猪、鸡、鱼和大鼠肝脏中比较代谢研究
    2.1 材料方法
        2.1.1 药物和试剂
        2.1.2 溶液的配置
        2.1.3 主要仪器
        2.1.4 实验动物
        2.1.5 肝微粒体和肝胞液的制备
        2.1.6 原代肝细胞的制备
        2.1.7 肝微粒体/胞液蛋白浓度测定
        2.1.8 肝微粒体体系活性测定
        2.1.9 T-2毒素标准品的质谱分析
        2.1.10 肝微粒体代谢体系
        2.1.11 肝胞液代谢体系
        2.1.12 肝细胞代谢体系
        2.1.13 样品检测条件
        2.1.14 数据统计
    2.2 结果
        2.2.1 肝微粒体系活性
        2.2.2 T-2毒素标准品分析
        2.2.3 T-2毒素在动物肝微粒体中的比较代谢
        2.2.4 T-2毒素在动物肝脏中代谢物的解析
        2.2.5 T-2毒素在动物肝胞液中的比较代谢
        2.2.6 T-2毒素在动物肝细胞中的比较代谢
    2.3 讨论
        2.3.1 T-2毒素代谢的种属特点
        2.3.2 T-2毒素代谢种属差异可能的机理
        2.3.3 T-2毒素代谢与毒性的关系
    2.4 结论
3 T-2毒素在猪盲肠模型中的代谢与降解研究
    3.1 材料方法
        3.1.1 药物和试剂
        3.1.2 溶液配置
        3.1.3 主要仪器
        3.1.4 实验动物
        3.1.5 盲肠内容物的采集和制备
        3.1.6 盲肠模型活性验证
        3.1.7 T-2毒素浓度的确定
        3.1.8 T-2毒素孵育试验
        3.1.9 样品前处理
        3.1.10 样品分析
        3.1.11 LOD、LOQ和回收率
        3.1.12 统计学分析
    3.2 结果
        3.2.1 盲肠模型的活性
        3.2.2 T-2毒素的浓度
        3.2.3 T-2毒素在盲肠中的降解与代谢
    3.3 讨论
    3.4 结论
4 T-2毒素诱导下MAPK-JAK/STAT信号通路交联转导研究
    4.1 材料方法
        4.1.1 细胞株
        4.1.2 药品和试剂
        4.1.3 主要仪器和设备
        4.1.4 溶液配制
        4.1.5 细胞的复苏、传代和冻存
        4.1.6 MTT法检测T-2毒素对RAW264.7细胞的活力影响
        4.1.7 实时荧光定量PCR检测相关基因mRNA的表达
        4.1.8 Western blot方法测定相关蛋白磷酸化水平
        4.1.9 免疫荧光/激光共聚焦观测蛋白穿梭入核过程
        4.1.10 透射电镜观测T-2毒素对细胞的毒性
        4.1.11 Annexin-V FITC/PI双染法检测细胞凋亡
        4.1.12 T-2毒素在RAW264.7细胞内的代谢
        4.1.13 统计学分析
    4.2 结果
        4.2.1 RAW264.7细胞培养
        4.2.2 T-2毒素的浓度和孵育时间
        4.2.3 RNA质量鉴定
        4.2.4 T-2毒素诱导基因的时效关系研究
        4.2.5 T-2毒素诱导下MAPK和JAK/STAT通路mRNA水平交联关系
        4.2.6 T-2毒素诱导MAPK和JAK/STAT信号通路磷酸化水平表达
        4.2.7 磷酸化蛋白穿梭入核研究
        4.2.8 T-2毒素细胞毒性超显微结构观察
        4.2.9 JNK1对细胞凋亡影响
        4.2.10 T-2毒素在RAW264.7细胞内的代谢
    4.3 讨论
        4.3.1 K-Ras和IL-6是MAPK和JAK/STAT交联转导的关键结点
        4.3.2 JNK1-STAT3是一条细胞保护通路
        4.3.3 T-2毒素诱导下p-JNKl和p-STAT1/3穿梭入核的意义
        4.3.4 线粒体和核糖体是T-2毒素的两个毒性靶标
    4.4 结论
5 全文创新性总结
6 镰刀菌毒素的代谢和毒性研究进展（综述）
    6.1 引言
    6.2 镰刀菌毒素结构、理化性质与毒性
        6.2.1 单端孢霉烯族毒素
        6.2.2 伏马菌素
        6.2.3 玉米赤霉烯酮（ZON）
    6.3 镰刀菌毒素代谢及动力学研究
        6.3.1 单端孢霉烯族毒素
        6.3.2 伏马菌素
        6.3.3 玉米赤霉烯酮（ZON）
    6.4 镰刀菌毒素组织残留
        6.4.1 单端孢霉烯族毒素
        6.4.2 伏马菌素
        6.4.3 玉米赤霉烯酮（ZON）
    6.5 发展趋势
参考文献
致谢
附录


【参考文献】：
期刊论文
[1]T-2毒素的危害及脱毒研究进展[J]. 宋佳,范寰,闫雪,王文杰,赵晨.  粮油食品科技. 2020(05)
[2]对虾加工副产品自然发酵虾酱对T-2毒素的消减作用及其降解菌的筛选与鉴定[J]. 孙东方,王雅玲,谢主兰,宋颖慧,叶林,黄正花,罗丹虹,刘颖,房志家,邓旗,孙力军.  微生物学杂志. 2020(01)
[3]T-2毒素免疫毒性研究现状[J]. 吴庆华,王旭,袁宗辉.  动物医学进展. 2019(04)
[4]单端孢霉烯族毒素抑制动物生长作用的研究进展[J]. 郭璞,黄德玉,刘相莲,程古月,戴梦红,袁宗辉,王旭.  动物医学进展. 2016(10)
[5]隐蔽型真菌毒素的研究现状[J]. 王玉娇,张瑞英,兰静,张守文.  粮食与饲料工业. 2016(06)
[6]饲料中霉菌毒素的危害及其降解方法研究进展[J]. 李孟孟,翟双双,王文策,杨琳.  中国家禽. 2016(05)



本文编号：3046846