VBNC鼠伤寒沙门菌消减cDNA文库的构建及差异基因克隆与分析
发布时间：2021-02-23 03:46
沙门菌是一种肠道致病菌，对多种动物和人均有感染性，大部分有较强致病性。沙门菌进入活的非可培养状态即VBNC（viable but non-culturableiistate）后，细菌形态会发生明显变化，且用普通方法培养细菌不能生长，但经检测其仍具有代谢活性。沙门菌感染因其对人类及动物来说，是一种严重的疾病并且造成危害，一旦其进入VBNC状态后极容易产生“漏检”而对食品安全造成潜在危害，因而得到越来越多的重视。目前对细菌VBNC状态发生机制的研究尚没有定论，当其进入VBNC状态后，面临生存压力时，某一（些）基因转录水平明显强于正常状态，运用相应的技术可将VBNC相关的差异表达基因直接筛选出来，进而，VBNC发生机制的研究成果从客观上得到证实。I本研究采用不同浓度冰醋酸和4℃联合诱导条件建立VBNC状态快速诱导方法获得稳定VBNC沙门菌和VBNC沙门菌突变体的模型菌株，以便短时间内获得足量的实验材料。本研究应用抑制性消减杂交技术（SSH），构建了VBNC沙门菌-沙门菌消减cDNA文库，VBNC沙门菌-VBNC沙门菌突变体消减cDNA文库，并将获得的大量差异基因片段，与Ti载体相连接克隆到大...
【文章来源】：吉林农业大学吉林省
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文献综述
1.1 细菌 VBNC 状态研究进展
1.2 建立细菌突变体模型在细菌 VBNC 状态研究中的应用意义
1.3 构建消减 cDNA 文库在细菌 VBNC 状态研究中的应用
1.4 生物信息学分析
1.5 本研究的目的及意义
第二篇 研究内容
第一章 VBNC 沙门菌突变体和 VBNC 沙门菌诱导条件的建立
1.1 材料
1.2 方法
1.3 结果与分析
1.4 讨论
1.5 小结
第二章 SV-S 菌，SV-STV 菌消减 cDNA 文库的建立及差异基因序列分析
2.1 材料
2.2 方法
2.3 试验结果
2.4 讨论
2.5 小结
结论
参考文献
作者简介
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]细菌的活的非可培养状态研究概述[J]. 翟硕莉. 生物学教学. 2013(02)
[2]分子遗传学研究的新工具——大肠杆菌双杂交系统联合DNA定点诱变技术[J]. 路文盛,程桦. 中国临床新医学. 2013(01)
[3]活的非可培养状态沙门菌RT-PCR检测[J]. 李影,王伟利,孟庆峰,钱爱东. 华南农业大学学报. 2013(01)
[4]活的非可培养状态病原菌感染机制的研究现状及研究策略[J]. 李影,王伟利. 中国兽医科学. 2012(11)
[5]抑制性消减杂交技术在禽类差异表达相关基因筛选中的应用进展[J]. 徐文,栾新红,曹中赞,刘梅,高明. 生物技术进展. 2012(05)
[6]cDNA文库构建方法的研究进展[J]. 刘太峰,孟庆峰,段小波,董浩. 中国畜牧兽医. 2012(07)
[7]抑制性消减杂交技术及其在细菌研究中的应用[J]. 夏永祥,汤巧. 临床检验杂志. 2011(03)
[8]Nonculturability of the pathogenic Vibrio parahaemolyticus in live culture of Grateloupia turuturu is associated with bacterial attachment to the algal thalli[J]. LIU Feng 1,2,PANG Shaojun 1 1 Marine Biological Culture Collection Centre,Institute of Oceanology,Chinese Academy of Sciences,Qingdao 266071,China 2 Graduate University of Chinese Academy of Sciences,Beijing 100049,China. Acta Oceanologica Sinica. 2010(06)
[9]细菌ClpX蛋白酶的结构和功能[J]. 王琳,谢建平. 微生物学报. 2010(10)
[10]非可培养状态哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）复苏后生理特征及毒力相关基因表达[J]. 钟琳红,陈吉祥,姜莹安,王蓉,贾俊涛. 海洋与湖沼. 2010(03)
博士论文
[1]水中肠道致病菌活的非可培养状态及致病性的研究[D]. 孙宗科.中国疾病预防控制中心 2009
硕士论文
[1]氮离子束注入硅酸盐细菌诱变选育研究[D]. 卢文轩.安徽农业大学 2006
本文编号：3046968
【文章来源】：吉林农业大学吉林省
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文献综述
1.1 细菌 VBNC 状态研究进展
1.2 建立细菌突变体模型在细菌 VBNC 状态研究中的应用意义
1.3 构建消减 cDNA 文库在细菌 VBNC 状态研究中的应用
1.4 生物信息学分析
1.5 本研究的目的及意义
第二篇 研究内容
第一章 VBNC 沙门菌突变体和 VBNC 沙门菌诱导条件的建立
1.1 材料
1.2 方法
1.3 结果与分析
1.4 讨论
1.5 小结
第二章 SV-S 菌，SV-STV 菌消减 cDNA 文库的建立及差异基因序列分析
2.1 材料
2.2 方法
2.3 试验结果
2.4 讨论
2.5 小结
结论
参考文献
作者简介
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]细菌的活的非可培养状态研究概述[J]. 翟硕莉. 生物学教学. 2013(02)
[2]分子遗传学研究的新工具——大肠杆菌双杂交系统联合DNA定点诱变技术[J]. 路文盛,程桦. 中国临床新医学. 2013(01)
[3]活的非可培养状态沙门菌RT-PCR检测[J]. 李影,王伟利,孟庆峰,钱爱东. 华南农业大学学报. 2013(01)
[4]活的非可培养状态病原菌感染机制的研究现状及研究策略[J]. 李影,王伟利. 中国兽医科学. 2012(11)
[5]抑制性消减杂交技术在禽类差异表达相关基因筛选中的应用进展[J]. 徐文,栾新红,曹中赞,刘梅,高明. 生物技术进展. 2012(05)
[6]cDNA文库构建方法的研究进展[J]. 刘太峰,孟庆峰,段小波,董浩. 中国畜牧兽医. 2012(07)
[7]抑制性消减杂交技术及其在细菌研究中的应用[J]. 夏永祥,汤巧. 临床检验杂志. 2011(03)
[8]Nonculturability of the pathogenic Vibrio parahaemolyticus in live culture of Grateloupia turuturu is associated with bacterial attachment to the algal thalli[J]. LIU Feng 1,2,PANG Shaojun 1 1 Marine Biological Culture Collection Centre,Institute of Oceanology,Chinese Academy of Sciences,Qingdao 266071,China 2 Graduate University of Chinese Academy of Sciences,Beijing 100049,China. Acta Oceanologica Sinica. 2010(06)
[9]细菌ClpX蛋白酶的结构和功能[J]. 王琳,谢建平. 微生物学报. 2010(10)
[10]非可培养状态哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）复苏后生理特征及毒力相关基因表达[J]. 钟琳红,陈吉祥,姜莹安,王蓉,贾俊涛. 海洋与湖沼. 2010(03)
博士论文
[1]水中肠道致病菌活的非可培养状态及致病性的研究[D]. 孙宗科.中国疾病预防控制中心 2009
硕士论文
[1]氮离子束注入硅酸盐细菌诱变选育研究[D]. 卢文轩.安徽农业大学 2006
本文编号：3046968
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3046968.html
