褪黑素合成酶AANAT/HIOMT基因过表达绵羊的生产和性状分析
发布时间：2021-02-23 19:28
褪黑素（Melatonin,MT）是一种神经内分泌激素和高效抗氧化剂,能够通过受体信号途径参与动物的免疫和生殖活动调节。本研究构建了乳腺褪黑素合成酶转基因羊乳腺反应器,并探索了局部褪黑素信号参与炎症反应、排卵和胚胎附植过程的作用机制。本研究成功建立了过表达褪黑素合成酶基因芳香胺N-乙酰基转移酶（Arylalkylamine N-acetyltransferase,AANAT）和羟基吲哚-O-甲基转移酶（Hydroxyindole-o-methyl transferase,HIOMT）的转基因绵羊群体,证明褪黑素合成酶基因AANAT和HIOMT可以在羊乳腺上皮细胞中稳定表达,并研究了过表达褪黑素对绵羊抗炎症能力和繁殖效率的影响。以白萨福克和杜泊绵羊为材料,通过CRISPR/Cas9结合显微注射,将特异表达载体pBC1-AANAT和pBC1-HIOMT线性化片段与Cas9 mRNA、sgRNA 一起注射到原核期胚胎内,实现与胚胎基因组整合,最终构建乳腺特异表达褪黑素合成酶转基因绵羊新品系。分别对166只杜泊绵羊和139只白萨福克绵羊供体进行超排,撤栓后50-55h定时进行内窥镜输精,10-...
【文章来源】：中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：106 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
哺乳动物Mf的合成与释放(Tanetal 2012.)
制腺苷酸环化酶ＡＣ的活性以降低ｃＡＭＰ的水平，起到抑制ｃＡＭＰ／ＰＫＡ／ＣＲＥＢ／ＥＲＫ信号通路的??作用，通过抑制ＰＫＡ激活离子通道增加Ｋ＋外流和Ｃａ２＋的内流。另一方面，此外ＭＴ／ＭＴ１信号还??能通过与Ｇｉ结合激活磷脂酶Ｃ?（ＰＬＣ）通路，通过三磷酸肌醇途径提高细胞内Ｃａ２＋水平（图１－??２）。??以ｉｖ?＾??｛＾ＰＫＡ——?ＫＵｆ＾ｌｏｒＲｊＩ＾Ｂ??／＾＼＼?°?＾＾（＋）??／?（?＼?１?ＭＥＫ１／２?ＥＲＫ?１／２??＊ｃｒｆ＋?ＣＲＥＢ?暑?Ｐ－ＣＲＥＢ??图１－２．褪黑素ＭＴ１受体的信号通路（Ｄｕｂｏｃｏｖｉｃｈ，?２０１２）??Ｆｉｇ．?１?－２?Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ?ｐａｔｈｗａｙｓ?ｏｆ?ｍｅｌａｔｏｎｉｎ?ＭＴ１?ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ??ＭＴ２与ＭＴｌ受体在氨基酸序列上具有６０％的同源性，其与Ｇｉ结合同样可以导致ｃＡＭＰ合??成减少（Ｒｅｐｐｅｒｔ?ｅｔ?ａｌ．，１９９５），从而抑制ＰＫＡ途径以及降低了?ＣＲＥＢ的磷酸化水平。另外，激活??ＭＴ２型受体还可以降低鸟苷酸环化酶ＧＣ的活性和ｃＧＭＰ水平。通过特异性结合Ｇｂｇ和Ｇａｑ，ＭＴ２??能激活ＰＬＣ信号，使得ＩＰ３动员细胞内Ｃａ２＋释放到细胞质中，与ＤＡＧ协同激活蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎ??ｋｉｎａｓｅＣ，?ＰＫＣ）途径弓Ｉ起级联反应，进行下游的细胞应答（Ｄｕｂｏｃｏｖｉｃｈｅｔａｌ＿，２０１０；图１－３）。??ＭＬＴ????？—????（＾？ｐｉｐ
制腺苷酸环化酶ＡＣ的活性以降低ｃＡＭＰ的水平，起到抑制ｃＡＭＰ／ＰＫＡ／ＣＲＥＢ／ＥＲＫ信号通路的??作用，通过抑制ＰＫＡ激活离子通道增加Ｋ＋外流和Ｃａ２＋的内流。另一方面，此外ＭＴ／ＭＴ１信号还??能通过与Ｇｉ结合激活磷脂酶Ｃ?（ＰＬＣ）通路，通过三磷酸肌醇途径提高细胞内Ｃａ２＋水平（图１－??２）。??以ｉｖ?＾??｛＾ＰＫＡ——?ＫＵｆ＾ｌｏｒＲｊＩ＾Ｂ??／＾＼＼?°?＾＾（＋）??／?（?＼?１?ＭＥＫ１／２?ＥＲＫ?１／２??＊ｃｒｆ＋?ＣＲＥＢ?暑?Ｐ－ＣＲＥＢ??图１－２．褪黑素ＭＴ１受体的信号通路（Ｄｕｂｏｃｏｖｉｃｈ，?２０１２）??Ｆｉｇ．?１?－２?Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ?ｐａｔｈｗａｙｓ?ｏｆ?ｍｅｌａｔｏｎｉｎ?ＭＴ１?ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ??ＭＴ２与ＭＴｌ受体在氨基酸序列上具有６０％的同源性，其与Ｇｉ结合同样可以导致ｃＡＭＰ合??成减少（Ｒｅｐｐｅｒｔ?ｅｔ?ａｌ．，１９９５），从而抑制ＰＫＡ途径以及降低了?ＣＲＥＢ的磷酸化水平。另外，激活??ＭＴ２型受体还可以降低鸟苷酸环化酶ＧＣ的活性和ｃＧＭＰ水平。通过特异性结合Ｇｂｇ和Ｇａｑ，ＭＴ２??能激活ＰＬＣ信号，使得ＩＰ３动员细胞内Ｃａ２＋释放到细胞质中，与ＤＡＧ协同激活蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎ??ｋｉｎａｓｅＣ，?ＰＫＣ）途径弓Ｉ起级联反应，进行下游的细胞应答（Ｄｕｂｏｃｏｖｉｃｈｅｔａｌ＿，２０１０；图１－３）。??ＭＬＴ????？—????（＾？ｐｉｐ
【参考文献】：
期刊论文
[1]褪黑素对雌性动物繁殖影响的研究进展[J]. 张珍珍,何长久,刘国世. 中国畜牧杂志. 2017(06)
[2]利用腹腔内窥镜方法比较不同输精时间对羊体内胚胎生产效率的影响[J]. 艾合麦提·吐尔逊,杨明辉,宋玉坤,徐志远,姬鹏云,贾功雪,张金龙,张效生,朱士恩,刘国世. 黑龙江动物繁殖. 2016(02)
[3]黑萨福克和杜泊绵羊超数排卵效率比较及分析[J]. 易金云,李继成,任超,董德权,刘国世,吕文发. 草食家畜. 2015(03)
[4]Effects of Cigarette Smoking and Smoking Cessation on Plasma Constituents and Enzyme Activities Related to Oxidative Stress[J]. ZHOUJUNFU,YANXIAOFENG,GUOFANGZHEN,SUNNINGYA,QIANZHIJUN,DINGDEYUN. Biomedical and Environmental Sciences. 2000(01)
博士论文
[1]褪黑素和CNP对绵羊卵母细胞体外成熟的影响及过表达AANAT的研究[D]. 田秀芝.中国农业大学 2017
[2]褪黑素降低牛奶体细胞数和提高奶牛繁殖性能的研究与应用[D]. 史建民.中国农业大学 2015
[3]白藜芦醇和褪黑素对卵母细胞成熟及胚胎发育的作用机制[D]. 汪锋.中国农业大学 2014
硕士论文
[1]崂山奶山羊乳腺上皮细胞转染褪黑素合成酶基因的研究[D]. 宋怡乐.四川农业大学 2015
本文编号：3048107
【文章来源】：中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：106 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
哺乳动物Mf的合成与释放(Tanetal 2012.)
制腺苷酸环化酶ＡＣ的活性以降低ｃＡＭＰ的水平，起到抑制ｃＡＭＰ／ＰＫＡ／ＣＲＥＢ／ＥＲＫ信号通路的??作用，通过抑制ＰＫＡ激活离子通道增加Ｋ＋外流和Ｃａ２＋的内流。另一方面，此外ＭＴ／ＭＴ１信号还??能通过与Ｇｉ结合激活磷脂酶Ｃ?（ＰＬＣ）通路，通过三磷酸肌醇途径提高细胞内Ｃａ２＋水平（图１－??２）。??以ｉｖ?＾??｛＾ＰＫＡ——?ＫＵｆ＾ｌｏｒＲｊＩ＾Ｂ??／＾＼＼?°?＾＾（＋）??／?（?＼?１?ＭＥＫ１／２?ＥＲＫ?１／２??＊ｃｒｆ＋?ＣＲＥＢ?暑?Ｐ－ＣＲＥＢ??图１－２．褪黑素ＭＴ１受体的信号通路（Ｄｕｂｏｃｏｖｉｃｈ，?２０１２）??Ｆｉｇ．?１?－２?Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ?ｐａｔｈｗａｙｓ?ｏｆ?ｍｅｌａｔｏｎｉｎ?ＭＴ１?ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ??ＭＴ２与ＭＴｌ受体在氨基酸序列上具有６０％的同源性，其与Ｇｉ结合同样可以导致ｃＡＭＰ合??成减少（Ｒｅｐｐｅｒｔ?ｅｔ?ａｌ．，１９９５），从而抑制ＰＫＡ途径以及降低了?ＣＲＥＢ的磷酸化水平。另外，激活??ＭＴ２型受体还可以降低鸟苷酸环化酶ＧＣ的活性和ｃＧＭＰ水平。通过特异性结合Ｇｂｇ和Ｇａｑ，ＭＴ２??能激活ＰＬＣ信号，使得ＩＰ３动员细胞内Ｃａ２＋释放到细胞质中，与ＤＡＧ协同激活蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎ??ｋｉｎａｓｅＣ，?ＰＫＣ）途径弓Ｉ起级联反应，进行下游的细胞应答（Ｄｕｂｏｃｏｖｉｃｈｅｔａｌ＿，２０１０；图１－３）。??ＭＬＴ????？—????（＾？ｐｉｐ
制腺苷酸环化酶ＡＣ的活性以降低ｃＡＭＰ的水平，起到抑制ｃＡＭＰ／ＰＫＡ／ＣＲＥＢ／ＥＲＫ信号通路的??作用，通过抑制ＰＫＡ激活离子通道增加Ｋ＋外流和Ｃａ２＋的内流。另一方面，此外ＭＴ／ＭＴ１信号还??能通过与Ｇｉ结合激活磷脂酶Ｃ?（ＰＬＣ）通路，通过三磷酸肌醇途径提高细胞内Ｃａ２＋水平（图１－??２）。??以ｉｖ?＾??｛＾ＰＫＡ——?ＫＵｆ＾ｌｏｒＲｊＩ＾Ｂ??／＾＼＼?°?＾＾（＋）??／?（?＼?１?ＭＥＫ１／２?ＥＲＫ?１／２??＊ｃｒｆ＋?ＣＲＥＢ?暑?Ｐ－ＣＲＥＢ??图１－２．褪黑素ＭＴ１受体的信号通路（Ｄｕｂｏｃｏｖｉｃｈ，?２０１２）??Ｆｉｇ．?１?－２?Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ?ｐａｔｈｗａｙｓ?ｏｆ?ｍｅｌａｔｏｎｉｎ?ＭＴ１?ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ??ＭＴ２与ＭＴｌ受体在氨基酸序列上具有６０％的同源性，其与Ｇｉ结合同样可以导致ｃＡＭＰ合??成减少（Ｒｅｐｐｅｒｔ?ｅｔ?ａｌ．，１９９５），从而抑制ＰＫＡ途径以及降低了?ＣＲＥＢ的磷酸化水平。另外，激活??ＭＴ２型受体还可以降低鸟苷酸环化酶ＧＣ的活性和ｃＧＭＰ水平。通过特异性结合Ｇｂｇ和Ｇａｑ，ＭＴ２??能激活ＰＬＣ信号，使得ＩＰ３动员细胞内Ｃａ２＋释放到细胞质中，与ＤＡＧ协同激活蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎ??ｋｉｎａｓｅＣ，?ＰＫＣ）途径弓Ｉ起级联反应，进行下游的细胞应答（Ｄｕｂｏｃｏｖｉｃｈｅｔａｌ＿，２０１０；图１－３）。??ＭＬＴ????？—????（＾？ｐｉｐ
【参考文献】：
期刊论文
[1]褪黑素对雌性动物繁殖影响的研究进展[J]. 张珍珍,何长久,刘国世. 中国畜牧杂志. 2017(06)
[2]利用腹腔内窥镜方法比较不同输精时间对羊体内胚胎生产效率的影响[J]. 艾合麦提·吐尔逊,杨明辉,宋玉坤,徐志远,姬鹏云,贾功雪,张金龙,张效生,朱士恩,刘国世. 黑龙江动物繁殖. 2016(02)
[3]黑萨福克和杜泊绵羊超数排卵效率比较及分析[J]. 易金云,李继成,任超,董德权,刘国世,吕文发. 草食家畜. 2015(03)
[4]Effects of Cigarette Smoking and Smoking Cessation on Plasma Constituents and Enzyme Activities Related to Oxidative Stress[J]. ZHOUJUNFU,YANXIAOFENG,GUOFANGZHEN,SUNNINGYA,QIANZHIJUN,DINGDEYUN. Biomedical and Environmental Sciences. 2000(01)
博士论文
[1]褪黑素和CNP对绵羊卵母细胞体外成熟的影响及过表达AANAT的研究[D]. 田秀芝.中国农业大学 2017
[2]褪黑素降低牛奶体细胞数和提高奶牛繁殖性能的研究与应用[D]. 史建民.中国农业大学 2015
[3]白藜芦醇和褪黑素对卵母细胞成熟及胚胎发育的作用机制[D]. 汪锋.中国农业大学 2014
硕士论文
[1]崂山奶山羊乳腺上皮细胞转染褪黑素合成酶基因的研究[D]. 宋怡乐.四川农业大学 2015
本文编号：3048107
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