兔肝脏组织差异蛋白与RHDV相互作用的研究
发布时间：2021-02-24 09:55
兔出血症病毒（Rabbit Haemorrhagic Disease Virus,RHDV）是一种可以引起成年兔急性死亡的烈性、传染性病原体,隶属于嵌杯病毒科兔病毒属。病毒感染成年兔30h即出现显著临床症状,48-72h90%的兔死亡,然而小于45日龄的幼年兔对该病毒不敏感,无临床症状。这种病毒敏感性的差异,可能与发育过程中功能蛋白表达的差异相关。肝脏作为病毒增殖的场所,却不表达病毒的吸附因子组织血型抗原（HBGA）,因此筛选成年兔和幼年兔肝脏组织的差异蛋白质,并研究其与RHDV的相关性对于阐明RHDV的致病机制具有重要意义。本实验利用双向荧光差异凝胶电泳（2-D DIGE）技术分离成年兔和幼年兔肝脏组织差异蛋白质,并用MALDI-TOF-TOF质谱（MS）技术鉴定差异蛋白质,获得了46个具有统计学意义的差异表达蛋白点（ratio>1.5,P<0.05）,其中28个在成年兔肝脏组织中表达上调,18个表达下调；并采用生物信息学对差异蛋白质进行Gene Ontology功能富集分析和蛋白质的互作分析。此外,采用荧光定量PCR技术对随机挑选的3个差异蛋白：脂肪酸结合蛋白（FABP...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
酵母双杂交原理图
为了比较成年兔和幼年兔肝脏组织的蛋白质组差异，采用2-D DIGE对成兔组和幼兔组的肝脏组织样品进行差异蛋白质组学分析，获得了 3种焚光染料标记的单独图像（图2.1 A)及重叠图像（图2.1 B),经DeCyder 2D 6.5软件分析，差异表达在1.5倍以上且p<0.05的蛋白点共有58个（图2.1C)。图2.1给出的代表性图像。WKKMUBKMWBttM3 lEF 10 3 lEF 10Bwmmmmm c ,4 -^B,鳴wHHBBW L 广?一.‘r:'yA注：A: Cy2标记的内参，Cy3标记成兔组，Cy5标记幼兔组；B: 3种染料标记的重叠图像；C:红色圈内的为差异蛋白点的位置，黄色框内的为差异蛋白点的编号图2.1成年兔和幼年兔肝脏组织差异表达蛋白的双向焚光差异凝胶电泳图谱Fig 2.1 differentially expressed protein spots as indicated in two-dimensional fluorescenceelectrophoresis image of liver tissues in adult and young rabbits12
红色星标为差异蛋白质参与通路的位置，其中BiP代表HSPA5，BRp57代表PDIA3，(? 2m代表B2M图2.6 B2M、PDIA3和HSPA5参与的抗原加工与递呈通路Fig 2.6 Antigen process and presentation pathway of B2M, PDIA3and HSPA517
【参考文献】：
期刊论文
[1]线粒体抗病毒信号蛋白（MAVS）在宿主天然免疫信号通路中的调节作用[J]. 杨星星,王凯,陈晓娟,邢雅玲,陈忠斌. 生物化学与生物物理进展. 2013(05)
[2]兔出血症病毒衣壳蛋白与次级结构蛋白的相互作用[J]. 杨宗伟,倪征,云涛,陈宗艳,李传峰,刘光清. 科学通报. 2012(24)
[3]酵母双杂交技术研究与应用进展[J]. 李先昆,聂智毅,曾日中. 安徽农业科学. 2009(07)
[4]兔出血症病毒复制子的构建及其在RK-13细胞中的复制[J]. 刘光清,倪征,云涛,余斌,朱金梅,华炯钢,陈剑平. 病毒学报. 2007(06)
本文编号：3049196
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
酵母双杂交原理图
为了比较成年兔和幼年兔肝脏组织的蛋白质组差异，采用2-D DIGE对成兔组和幼兔组的肝脏组织样品进行差异蛋白质组学分析，获得了 3种焚光染料标记的单独图像（图2.1 A)及重叠图像（图2.1 B),经DeCyder 2D 6.5软件分析，差异表达在1.5倍以上且p<0.05的蛋白点共有58个（图2.1C)。图2.1给出的代表性图像。WKKMUBKMWBttM3 lEF 10 3 lEF 10Bwmmmmm c ,4 -^B,鳴wHHBBW L 广?一.‘r:'yA注：A: Cy2标记的内参，Cy3标记成兔组，Cy5标记幼兔组；B: 3种染料标记的重叠图像；C:红色圈内的为差异蛋白点的位置，黄色框内的为差异蛋白点的编号图2.1成年兔和幼年兔肝脏组织差异表达蛋白的双向焚光差异凝胶电泳图谱Fig 2.1 differentially expressed protein spots as indicated in two-dimensional fluorescenceelectrophoresis image of liver tissues in adult and young rabbits12
红色星标为差异蛋白质参与通路的位置，其中BiP代表HSPA5，BRp57代表PDIA3，(? 2m代表B2M图2.6 B2M、PDIA3和HSPA5参与的抗原加工与递呈通路Fig 2.6 Antigen process and presentation pathway of B2M, PDIA3and HSPA517
【参考文献】：
期刊论文
[1]线粒体抗病毒信号蛋白（MAVS）在宿主天然免疫信号通路中的调节作用[J]. 杨星星,王凯,陈晓娟,邢雅玲,陈忠斌. 生物化学与生物物理进展. 2013(05)
[2]兔出血症病毒衣壳蛋白与次级结构蛋白的相互作用[J]. 杨宗伟,倪征,云涛,陈宗艳,李传峰,刘光清. 科学通报. 2012(24)
[3]酵母双杂交技术研究与应用进展[J]. 李先昆,聂智毅,曾日中. 安徽农业科学. 2009(07)
[4]兔出血症病毒复制子的构建及其在RK-13细胞中的复制[J]. 刘光清,倪征,云涛,余斌,朱金梅,华炯钢,陈剑平. 病毒学报. 2007(06)
本文编号：3049196
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