猪GHSR基因的克隆及其突变体的药理学特性初探
发布时间:2021-02-28 00:39
生长激素促分泌素受体(ghrelin receptor, GHSR)是一个由366个氨基酸组成的多肽,属于G-蛋白偶连受体(GPCR)家族,拥有7次跨膜结构。生长激素促分泌素是一种主要在胃部产生的含有28个氨基酸的多肽,该多肽被证实是GHSR的内源性配体。研究表明GHSR在促进生长激素(growth hormone, GH)的分泌、调节摄食、能量代谢及胃肠运动和分泌等方面发挥重要作用。生长激素促分泌素对于调控猪的生长有重要意义,但对其研究仅限于GH分泌、胃肠活动、心血管功能和细胞增殖方面。在人类、鱼和鸟类对生长激素促分泌素的研究中发现了许多其他生物学功能及其作用机制,但这些在猪上仍是未知的。因此,为进一步了解猪GHSR,本研究通过剪接重叠延伸聚合酶链式反应(SOE-PCR)克隆出猪GHSR的编码区序列,插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,成功构建了猪GHSR的真核表达载体。为更深入的了解猪GHSR功能,我们选取了6个突变位点即P108L、I134T、V1601、 C173R、A204D和F279L,通过单点突变得到这6个突变体,将这7个真核表达载体(pGHSR WT、P108L、...
【文章来源】:扬州大学江苏省
【文章页数】:63 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
G蛋白偶联受体示意图
细胞内的cAMP浓度升高。ATP环化酶由Gs激活而被Gi抑制。(2)磷脂酶C(PLC),它是以G蛋白为传导物的一个重要的信号传导途径(见图1-2)。PLC-P是G蛋白的直接效应器。胞外信号分子与细胞表面G蛋白偶联受体结合,激活质膜上的PLC-P,使质膜上4,5-二憐酸磷脂酷肌醇(?1?2)水解产生1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)与二酷酰甘油(DAG)两个第二信使。IP3与内质网上的IP3配体门韩通道结合,开启?丐通道,使内质网C存的Ca2+迅速大量释放到胞质中
刺激GH的释放[45](见图1-3)。GHRH Ghrelin\ \ /GHRH.R^AMP I m # lCa2+]j r? Pituitary 歉 ^??gh|图1-3生长激素促分泌素受体的作用机制l46lFig. 1-3 Mechanism of GHSR2.3.1激动剂传统的配体被分为激动剂和措抗剂两大类。激动剂与受体结合,具有内在活性,从而激活信号传导系统,产生相应的生物学效应。激动剂能提高细胞信号转导的水平。生长n
【参考文献】:
期刊论文
[1]pcDNA3.1(+)/caveolin-1真核表达质粒的构建及其在MCF-7乳腺癌细胞株中的表达[J]. 马小斌,康华峰,包兴,代志军,刁岩,闵卫利,王西京. 西安交通大学学报(医学版). 2013(01)
[2]冷刺激不同时间仔猪3种组织HSP70表达的Western blot检测分析[J]. 计红,吴永魁,李士泽,杨焕民. 黑龙江八一农垦大学学报. 2010(02)
[3]小鼠生长激素促分泌素受体真核表达载体的构建及表达鉴定[J]. 王维刚,王志刚,邱文才,费照亮,费俭,郑起. 中国普通外科杂志. 2009(05)
[4]胎盘生长因子PLGF在胃癌中的表达及其意义的初步研究[J]. 陈健,杨正府,何敖林,刘瑞文,胡雨佳,范然,周沁. 实用临床医药杂志. 2008(11)
[5]黑皮质素受体-4调节通路的研究进展[J]. 聂茹,巴彩凤. 中国实验动物学报. 2008(04)
[6]家鸭GHSR基因部分编码序列的克隆及变异检测[J]. 詹凯,许月英,赵瑞宏. 中国畜牧兽医. 2008(06)
[7]生长激素促分泌素受体及其内源性配体ghrelin与胃肠运动[J]. 邱文才,王维刚,王志刚,郑起. 中国普通外科杂志. 2007(10)
[8]应用western blotting检测结直肠癌中FHIT蛋白的表达[J]. 胡义奎,段晓明,贺修胜,曹建国. 实用癌症杂志. 2006(01)
[9]NisinZ的定点突变及突变体性质的研究[J]. 袁静,张振中,杨巍,陈秀珠,还连栋. 生物工程学报. 2003(02)
[10]定点突变对BPI23-Fcγ1重组抗菌蛋白表达和复性率的影响[J]. 安云庆,柯岩,靖学芳,杨贵贞. 首都医科大学学报. 2002(03)
本文编号:3055041
【文章来源】:扬州大学江苏省
【文章页数】:63 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
G蛋白偶联受体示意图
细胞内的cAMP浓度升高。ATP环化酶由Gs激活而被Gi抑制。(2)磷脂酶C(PLC),它是以G蛋白为传导物的一个重要的信号传导途径(见图1-2)。PLC-P是G蛋白的直接效应器。胞外信号分子与细胞表面G蛋白偶联受体结合,激活质膜上的PLC-P,使质膜上4,5-二憐酸磷脂酷肌醇(?1?2)水解产生1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)与二酷酰甘油(DAG)两个第二信使。IP3与内质网上的IP3配体门韩通道结合,开启?丐通道,使内质网C存的Ca2+迅速大量释放到胞质中
刺激GH的释放[45](见图1-3)。GHRH Ghrelin\ \ /GHRH.R^AMP I m # lCa2+]j r? Pituitary 歉 ^??gh|图1-3生长激素促分泌素受体的作用机制l46lFig. 1-3 Mechanism of GHSR2.3.1激动剂传统的配体被分为激动剂和措抗剂两大类。激动剂与受体结合,具有内在活性,从而激活信号传导系统,产生相应的生物学效应。激动剂能提高细胞信号转导的水平。生长n
【参考文献】:
期刊论文
[1]pcDNA3.1(+)/caveolin-1真核表达质粒的构建及其在MCF-7乳腺癌细胞株中的表达[J]. 马小斌,康华峰,包兴,代志军,刁岩,闵卫利,王西京. 西安交通大学学报(医学版). 2013(01)
[2]冷刺激不同时间仔猪3种组织HSP70表达的Western blot检测分析[J]. 计红,吴永魁,李士泽,杨焕民. 黑龙江八一农垦大学学报. 2010(02)
[3]小鼠生长激素促分泌素受体真核表达载体的构建及表达鉴定[J]. 王维刚,王志刚,邱文才,费照亮,费俭,郑起. 中国普通外科杂志. 2009(05)
[4]胎盘生长因子PLGF在胃癌中的表达及其意义的初步研究[J]. 陈健,杨正府,何敖林,刘瑞文,胡雨佳,范然,周沁. 实用临床医药杂志. 2008(11)
[5]黑皮质素受体-4调节通路的研究进展[J]. 聂茹,巴彩凤. 中国实验动物学报. 2008(04)
[6]家鸭GHSR基因部分编码序列的克隆及变异检测[J]. 詹凯,许月英,赵瑞宏. 中国畜牧兽医. 2008(06)
[7]生长激素促分泌素受体及其内源性配体ghrelin与胃肠运动[J]. 邱文才,王维刚,王志刚,郑起. 中国普通外科杂志. 2007(10)
[8]应用western blotting检测结直肠癌中FHIT蛋白的表达[J]. 胡义奎,段晓明,贺修胜,曹建国. 实用癌症杂志. 2006(01)
[9]NisinZ的定点突变及突变体性质的研究[J]. 袁静,张振中,杨巍,陈秀珠,还连栋. 生物工程学报. 2003(02)
[10]定点突变对BPI23-Fcγ1重组抗菌蛋白表达和复性率的影响[J]. 安云庆,柯岩,靖学芳,杨贵贞. 首都医科大学学报. 2002(03)
本文编号:3055041
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