牛源多杀性巴氏杆菌血清分型及毒力相关基因的检测研究
发布时间：2021-03-03 05:21
为确定新疆北疆部分地区疑似病例中分离的牛源多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida,Pm）流行的血清型、ST型及毒力相关基因的分布情况,本研究以分离的17株牛源Pm为研究对象,采用荚膜多重PCR分型法、脂多糖多重PCR分型法（LPS-mPCR）、多位点序列分型法（MLST）及PCR方法检测17株Pm分离株的荚膜型、脂多糖型、MLST型及7类共25个毒力相关基因的分布情况。结果显示,13株Pm的荚膜脂多糖型为A∶L3型,ST型均为ST1型,4株Pm荚膜脂多糖型为B∶L2型,ST型均为ST44;17株Pm毒力相关基因（exbB、exbD、fimA、fur、hgbA、hsf2、nanB、oma87、ompA、ompH、plpB、psl、ptfA、sodA、sodC、tonB和tbpA）的检出率高达100%,toxA基因的检出率为0。结果表明,从新疆北疆部分地区规模化牛场疑似病例中分离的Pm主要血清型为A∶L3∶ST1型。
【文章来源】：中国畜牧兽医. 2020,47(06)北大核心
【文章页数】：11 页
【部分图文】：
17株Pm脂多糖基因型鉴定结果
17株多杀性巴氏杆菌均扩增出相应大小的7个管家基因adk(531 bp)、aroA(558 bp)、deoD(576 bp)、gdhA(651 bp)、g6pd(513 bp)、mdh(552 bp)、pgi(609 bp)(图4)。将测序结果上传至MLST数据库进行分析,结果表明,13株A∶L3型菌株ST序列型均为ST1,4株B∶L2型菌株序列型为ST44(表4)。表4 Pm菌株信息及荚膜型、LPS型及ST分型结果Table 4 Information on Pm strains and results of capsular type,LPS type and ST typing 菌株Strains 宿主Hosts 来源Origins 荚膜型Capsular genotypes 脂多糖型LPS genotypes MLST基因型MLST genotypes Pm8 牛 石河子 A L3 ST1 Pm9 牛 石河子 A L3 ST1 Pm12 牛 石河子 A L3 ST1 Pm13 牛 石河子 A L3 ST1 Pm14 牛 石河子 A L3 ST1 Pm17 牛 克拉玛依 A L3 ST1 Pm18 牛 克拉玛依 A L3 ST1 Pm122 牛 石河子 A L3 ST1 Pm21 牛 石河子 A L3 ST1 Pm22 牛 石河子 A L3 ST1 Pm23 牛 塔城 A L3 ST1 Pm24 牛 塔城 A L3 ST1 Pm25 牛 乌鲁木齐 A L3 ST1 Pm26 牦牛 乌鲁木齐 B L2 ST44 Pm27 牦牛 乌鲁木齐 B L2 ST44 Pm28 牦牛 乌鲁木齐 B L2 ST44 Pm29 牦牛 乌鲁木齐 B L2 ST44
本研究共检测了7类25种毒力相关基因,检测结果显示,Pm携带有大部分毒力相关基因,且不同菌株携带毒力相关基因存在差异。由图5可知,17株Pm具有共同的18种毒力相关基因的特征(17株菌均携带exbB、exbD、hgbA、tonB、fur、fimA、hsf2、ptfA、oma87、ompA、ompH、plpB、psl、sodA、sodC、tbpA和nanB 17个基因,且均未检出toxA基因);13株A型Pm中均检出hsf1、tadD、pmHAS和plpE 4个毒力相关基因;4株B型Pm中检出nanH和hgbB基因;pfhA基因在17株Pm的检出率为82.3%,即仅3株A型Pm未检出。3 讨 论
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸭源多杀性巴氏杆菌对磺胺类药物的耐药性检测及耐药基因分析[J]. 陈红梅,程龙飞,邓辉,刘荣昌,傅光华,施少华,傅秋玲,万春和,郑庆礼,黄瑜,黄小红. 中国畜牧兽医. 2019(01)
[2]羊源D型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及毒力基因检测[J]. 王蕾,邬琴,柴迎锦,梅朱园,郭强强,黄新,韩猛立,张星星,周霞,钟发刚. 动物医学进展. 2019(01)
[3]犊牛肺炎多杀性巴氏杆菌荚膜血清型和基因型的研究[J]. 梅朱园,邬琴,柴迎锦,顾晓晓,陶乔孝慈,钟发刚,韩猛立,黄新,周霞,张星星. 中国动物传染病学报. 2019(05)
[4]奶牛荚膜血清A型巴氏杆菌的分离鉴定及致病性[J]. 刘朋,陈萌,程子龙,闫振贵,刘思当. 中国兽医学报. 2018(08)
[5]牛源荚膜A型多杀性巴氏杆菌疫苗候选株的筛选及鉴定[J]. 朱玲,柳旭伟,剡文亮,张锐,韩小丽,剡根强. 中国畜牧兽医. 2018(02)
[6]国内部分地区多杀性巴氏杆菌荚膜血清型和基因型的研究[J]. 王林柏,孙久鹤,郭东春,曹培丽,刘家森,刘春国,刘大飞,曲连东. 中国预防兽医学报. 2016(02)
[7]16S rRNA基因序列分析法鉴定病原细菌[J]. 朱飞舟,陈利玉,陈汉春. 中南大学学报(医学版). 2013(10)
本文编号：3060692
【文章来源】：中国畜牧兽医. 2020,47(06)北大核心
【文章页数】：11 页
【部分图文】：
17株Pm脂多糖基因型鉴定结果
17株多杀性巴氏杆菌均扩增出相应大小的7个管家基因adk(531 bp)、aroA(558 bp)、deoD(576 bp)、gdhA(651 bp)、g6pd(513 bp)、mdh(552 bp)、pgi(609 bp)(图4)。将测序结果上传至MLST数据库进行分析,结果表明,13株A∶L3型菌株ST序列型均为ST1,4株B∶L2型菌株序列型为ST44(表4)。表4 Pm菌株信息及荚膜型、LPS型及ST分型结果Table 4 Information on Pm strains and results of capsular type,LPS type and ST typing 菌株Strains 宿主Hosts 来源Origins 荚膜型Capsular genotypes 脂多糖型LPS genotypes MLST基因型MLST genotypes Pm8 牛 石河子 A L3 ST1 Pm9 牛 石河子 A L3 ST1 Pm12 牛 石河子 A L3 ST1 Pm13 牛 石河子 A L3 ST1 Pm14 牛 石河子 A L3 ST1 Pm17 牛 克拉玛依 A L3 ST1 Pm18 牛 克拉玛依 A L3 ST1 Pm122 牛 石河子 A L3 ST1 Pm21 牛 石河子 A L3 ST1 Pm22 牛 石河子 A L3 ST1 Pm23 牛 塔城 A L3 ST1 Pm24 牛 塔城 A L3 ST1 Pm25 牛 乌鲁木齐 A L3 ST1 Pm26 牦牛 乌鲁木齐 B L2 ST44 Pm27 牦牛 乌鲁木齐 B L2 ST44 Pm28 牦牛 乌鲁木齐 B L2 ST44 Pm29 牦牛 乌鲁木齐 B L2 ST44
本研究共检测了7类25种毒力相关基因,检测结果显示,Pm携带有大部分毒力相关基因,且不同菌株携带毒力相关基因存在差异。由图5可知,17株Pm具有共同的18种毒力相关基因的特征(17株菌均携带exbB、exbD、hgbA、tonB、fur、fimA、hsf2、ptfA、oma87、ompA、ompH、plpB、psl、sodA、sodC、tbpA和nanB 17个基因,且均未检出toxA基因);13株A型Pm中均检出hsf1、tadD、pmHAS和plpE 4个毒力相关基因;4株B型Pm中检出nanH和hgbB基因;pfhA基因在17株Pm的检出率为82.3%,即仅3株A型Pm未检出。3 讨 论
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸭源多杀性巴氏杆菌对磺胺类药物的耐药性检测及耐药基因分析[J]. 陈红梅,程龙飞,邓辉,刘荣昌,傅光华,施少华,傅秋玲,万春和,郑庆礼,黄瑜,黄小红. 中国畜牧兽医. 2019(01)
[2]羊源D型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及毒力基因检测[J]. 王蕾,邬琴,柴迎锦,梅朱园,郭强强,黄新,韩猛立,张星星,周霞,钟发刚. 动物医学进展. 2019(01)
[3]犊牛肺炎多杀性巴氏杆菌荚膜血清型和基因型的研究[J]. 梅朱园,邬琴,柴迎锦,顾晓晓,陶乔孝慈,钟发刚,韩猛立,黄新,周霞,张星星. 中国动物传染病学报. 2019(05)
[4]奶牛荚膜血清A型巴氏杆菌的分离鉴定及致病性[J]. 刘朋,陈萌,程子龙,闫振贵,刘思当. 中国兽医学报. 2018(08)
[5]牛源荚膜A型多杀性巴氏杆菌疫苗候选株的筛选及鉴定[J]. 朱玲,柳旭伟,剡文亮,张锐,韩小丽,剡根强. 中国畜牧兽医. 2018(02)
[6]国内部分地区多杀性巴氏杆菌荚膜血清型和基因型的研究[J]. 王林柏,孙久鹤,郭东春,曹培丽,刘家森,刘春国,刘大飞,曲连东. 中国预防兽医学报. 2016(02)
[7]16S rRNA基因序列分析法鉴定病原细菌[J]. 朱飞舟,陈利玉,陈汉春. 中南大学学报(医学版). 2013(10)
本文编号：3060692
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