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重组鹅IL-17对鹅细小病毒VP3黏膜免疫增强作用的研究

发布时间:2021-03-03 21:00
  动物传染病原的传播与侵染大多数都通过消化道和呼吸道为主要的侵入途径,因此动物机体的黏膜免疫系统在抵抗致病微生物的入侵中体现出十分重要的作用。对黏膜免疫系统的有效刺激需要满足两个基本条件,一是疫苗中的抗原能够有效地被传递到黏膜淋巴组织,二是安全有效的黏膜佐剂加强免疫应答。免疫佐剂是本身不具备抗原性,掺入疫苗制剂后能促进疫苗抗原特异性免疫应答的物质。近年来的研究发现,新型Th细胞——Th17所分泌的主要效应因子IL17,具有强大的招募激活中性粒细胞,以及促进T细胞反应的作用,是宿主抵抗特殊病原体的重要而独特的细胞因子。目前相对于哺乳动物黏膜免疫的研究,禽类黏膜免疫的研究相对缓慢,而且大部分研究都集中在鸡的相关研究。本研究首次克隆东北白鹅IL-17、CD4和CD8α基因,以真核表达的东北白鹅IL-17作为黏膜免疫佐剂与鹅细小病毒(GPV)的衣壳蛋白VP3病毒样粒子联合免疫,或东北白鹅IL-17与VP3融合表达后免疫东北白鹅,通过检测体液免疫和细胞免疫的多项指标对免疫效果进行评价,证实东北白鹅IL-17作为黏膜免疫佐剂可以有效诱导机体黏膜免疫和系统免疫,对小鹅瘟的防治及开发有效的黏膜疫苗具有十... 

【文章来源】:东北农业大学黑龙江省 211工程院校

【文章页数】:100 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

重组鹅IL-17对鹅细小病毒VP3黏膜免疫增强作用的研究


黏膜免疫系统的作用方式

免疫细胞,概略图,小肠,细胞


禽类肠道中也发现了若干具有类似哺乳动物 PP 的淋巴结构,在明确着 M 细胞。随着雏鸡日龄的增长,PP 也会增多。盲肠扁桃体位于直部,肉眼可见略有膨大。CT 是大型的淋巴集合,与 PP 有着相似的结 细胞[16]。法氏囊是由淋巴组织派生出来的,位于泄殖腔后上方。它是免疫器官,是 B 淋巴细胞发育的场所。肠道中的免疫细胞有嗜异性粒细胞、巨噬细胞、自然杀伤性细胞、B体部位和年龄的不同,肠道中的细胞类型和数量会有所不同。另外,食和不同病原微生物的侵染都会影响各种细胞的组成和比例。肠上皮肠黏膜上皮的一类独特的细胞群,在健康成年禽类的小肠中主要包括 T 细胞[17,18]。与其他组织不同的是 IELs 中几乎没有 B 细胞的存在,而小部分 TCRαβ+CD4+和 CD4+CD8+细胞[19,20]。值得注意的是 T 细胞不是在系统免疫中常见的 CD8αβ 异源二聚体[21,22]。黏膜固有层之下有细胞、巨噬细胞、树突状细胞以及 B 细胞和 T 细胞。数量上 B 细胞到 90%左右。固有层中 B 细胞大都经历了类型转换成为分泌 sIgA 的中有很高的浓度(3.5-12 mg/mL)[23,24]。PP 和 CT 中免疫细胞的组成相似。

序列,氨基酸,信号肽,氨基酸残基


图 1-3 Th 细胞的分化Fig.1-3 Differentiation of helper T cellsL-17 和 IL-17 受体17 最初是从 T 细胞杂交瘤细胞中分离克隆出来的,称为细胞毒性 T 细胞抗8)[80]。人类的 IL-17 蛋白是由 155 个氨基酸所表达形成的蛋白质,全长蛋白序氨基酸长度的信号肽序列,有 6 个保守的半胱氨酸和 1 个潜在的 N 端糖基化位点[8IL-17 多肽由 150 个氨基酸残基组成,其中 13 个氨基酸残基为信号肽,137 个氨其余成熟多肽片段。目前分离得到的 IL-17 家族中至少有 6 个成员(A-F),它 个氨基酸残基构成,并且都以二聚体的形式存在[83]。禽类来说,IL-17 是在 2002 年首次由 Wongi Min[84]等在鸡的肠上皮内淋巴细胞签(Expressed Sequence Tag,EST)文库中分离得到的。鸡 IL-17 的开放阅读7 bp,编码 169 个氨基酸,分子量约为 18.9 KD,有 27 个氨基酸的信号肽。蛋白个保守的半胱氨酸序列。与哺乳动物的 IL-17 的相似性在 37%-46%之间。200 Yoo[85]等,从用 ConA 刺激的脾淋巴细胞中克隆得到了鸭 IL-17。鸭 IL-17 也是由所编码,分子量约为 18.8 KD,有 27 个氨基酸的信号肽,分子内有 6 个保守的

【参考文献】:
期刊论文
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本文编号:3061929

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