栀子及其提取物对免疫应激仔猪及IPEC-J2细胞相关炎症通路的影响
发布时间：2021-03-03 21:50
由于许多化学合成药物的较强的毒副作用,人们越来越重视从天然提取物中开发毒副作用较小的抗炎药物,寻求安全有效的抗炎提取物,是防治该类疾病的新思路,也是新型抗炎饲料添加剂开发的新热点。本试验以LPS诱导的炎症反应调节信号通路为主线,研究栀子对炎症应激仔猪炎症通路及细胞因子水平变化的影响,体外建立仔猪肠上皮细胞应激模型,研究栀子提取物京尼平苷对猪肠上皮细胞炎症通路、紧密连接等水平的影响,为预防仔猪免疫应激及各种肠道疾病提供新思路。体内试验部分选取24头体重相近断奶仔猪随机分为四组,每组6头,预饲3天,3个栀子添加组每头每天在基础日粮中分别添加栀子粉1.25、2.5、5 g,自由饮水,采食,第10天称重,前腔静脉采血后注射LPS,并在注射后3h、24 h采血。分离血清和淋巴细胞。测定淋巴细胞中NF-κB通路和IAP蛋白表达量、mRNA相对表达量和血清中8种细胞因子的变化水平。体外试验部分将IPEC-J2细胞以合适浓度细胞液进行铺板,分别为空白组,模型组,0.1、1、10 mmol/L浓度京尼平苷添加组,37℃、5%CO2培养箱24 h,除对照组外每孔加入20μL0.1 m...
【文章来源】：黑龙江八一农垦大学黑龙江省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
注射前仔猪淋巴细胞NF
日粮中添加不同剂量栀子对LPS诱导免疫应激仔猪淋巴细胞相关炎症蛋白及mRNA表达量的影响19ABCDEF图2注射前仔猪淋巴细胞NF-κB通路及IAP相关蛋白表达量Figure2NF-κBpathwayandIAPproteinexpressioninpigletlymphocytesbeforeinjection(A/B)p65蛋白表达量(A/C)磷酸化p65蛋白表达量(A/D)IκB蛋白表达量(A/E)磷酸化IκB蛋白表达量(A/F)IAP蛋白表达量(A/B)p65proteinexpressionlevel(A/C)Phosphorylationlevelofp65(A/D)IκBproteinexpressionlevel(A/E)PhosphorylationlevelofIκB(A/F)IAPproteinexpressionlevel注：*表示与对照组相比，蛋白表达量差异显著（P<0.05）；**表示与对照组相比，蛋白表达量差异极显著（P<0.01）Note:*indicatesasignificantdifferenceinproteinexpressioncomparedwiththecontrolgroup(P<0.05).**indicatesthatcomparedwiththecontrolgroup,theproteinexpressionlevelisextremelysignificantdifferent(P<0.01)结果表明，在注射LPS前，即饲喂栀子10天后，各试验组与对照组相比，断奶仔猪外周血单核淋巴细胞中NF-κBp65、磷酸化p65（P-p65）、IAP、IκB及磷酸化IκB（P-IκB）蛋白表达受到了栀子添加的不同影响。与对照组相比，三个栀子添加组的NF-κBp65蛋白表达量均显著低于对照组（P<0.05），且随栀子添加量减少而表达量降低；低剂量和中剂量栀子添加组P-p65蛋白表达量在显著低于对照组（P<0.05），高剂量栀子添加组P-p65的蛋白表达量略低于对照组，但差异不明显（P>0.05）；低剂量栀子添加组的IκB蛋白显著降低（P<0.05），中、高剂量栀子添加组的IκB蛋白表达量与对照组相比无显著差异（P>0.05）；但低、中、高剂量栀子添加组P-IκB蛋白表达量均显著低于对照组（P<0.05），且高剂量添
栀子及其提取物对免疫应激仔猪及IPEC-J2细胞相关炎症通路的影响20加组P-IκB蛋白表达量最低（P<0.05）；同时，低剂量和中剂量栀子添加组IAP蛋白表达量显著低于对照组（P<0.05），而高剂量栀子对IAP表达没有显著影响（P>0.05）。(2)注射后3hABCDEF图3注射后3h仔猪淋巴细胞NF-κB通路及IAP相关蛋白表达量Figure3NF-κBpathwayandIAPproteinexpressioninpigletlymphocytes3hafterinjection(A/B)p65蛋白表达量(A/C)磷酸化p65蛋白表达量(A/D)IκB蛋白表达量(A/E)磷酸化IκB蛋白表达量(A/F)IAP蛋白表达量(A/B)p65proteinexpressionlevel(A/C)Phosphorylationlevelofp65(A/D)IκBproteinexpressionlevel(A/E)PhosphorylationlevelofIκB(A/F)IAPproteinexpressionlevel注：*表示与对照组相比，蛋白表达量差异显著（P<0.05）；**表示与对照组相比，蛋白表达量差异极显著（P<0.01）Note:*indicatesasignificantdifferenceinproteinexpressioncomparedwiththecontrolgroup(P<0.05).**indicatesthatcomparedwiththecontrolgroup,theproteinexpressionlevelisextremelysignificantdifferent(P<0.01)结果表明，在注射LPS之后3h，与炎症对照组相比，三个栀子添加组NF-κBp65蛋白表达量没有显著变化（P>0.05）；低中剂量栀子添加组P-p65的蛋白表达量无明显变化（P>0.05），但高剂量栀子添加组P-p65的蛋白表达量显著减低（P<0.05）；低剂量栀子添加组的IκB蛋白显著低于对照组（P<0.05），中高剂量栀子添加组IκB蛋白变化不明显（P>0.05）；低中剂量栀子添加组P-IκB蛋白表达量无明显变化，但是高剂量栀子添加组中
【参考文献】：
期刊论文
[1]葛根枳椇子栀子胶囊解酒护肝功效研究[J]. 陶施民,卢贤欢,郭雅娟,余庆涛,葛亚中,马忠化,麦焕娣,梁金强,黄芝瑛. 中医药导报. 2018(10)
[2]栀子中京尼平苷及藏红花素的神经保护作用研究进展[J]. 王立,潘海鸥,钱海峰,张晖,齐希光. 中草药. 2017(12)
[3]天然药物抗炎成分及作用机制的研究进展[J]. 刘莹,王振洲,李平亚,刘金平,张凯. 特产研究. 2017(01)
[4]清温消热饮对小鼠LPS致炎模型血清中炎性因子的影响[J]. 赵婵娟. 中国兽药杂志. 2017(01)
[5]京尼平苷对硝普钠诱导软骨细胞凋亡与细胞周期的影响[J]. 陈万军,鲍同柱,陈恳,朱长谋,万峰,谭玉林,鄢飞. 中国骨伤. 2013(03)
[6]黄芪多糖对LPS损伤小肠上皮细胞的保护作用[J]. 袁媛,孙梅. 世界华人消化杂志. 2008(01)
[7]京尼平苷及其衍生物的药效学研究进展[J]. 史卉妍,何鑫,欧阳冬生,周宏灏. 中国药学杂志. 2006(01)
[8]京尼平苷和西红花酸保肝利胆作用的比较[J]. 彭婕,钱之玉,刘同征,饶淑云,曲斌. 中国新药杂志. 2003(02)
硕士论文
[1]探究TLR4对小鼠肠黏膜紧密连接蛋白的调控作用[D]. 刘畅.中国医科大学 2018
[2]黄芩苷对免疫应激仔猪外周血单核细胞NF-κB及NLRP3信号通路的影响[D]. 姚文旭.武汉轻工大学 2015
[3]栀子提取物京尼平苷作为一种神经保护剂的作用机制研究[D]. 刘子萱.重庆工商大学 2015
[4]对乙酰氨基酚联合乙酰半胱氨酸对仔猪免疫应激性炎症的影响[D]. 张家威.武汉工业学院 2012
本文编号：3061990
【文章来源】：黑龙江八一农垦大学黑龙江省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
注射前仔猪淋巴细胞NF
日粮中添加不同剂量栀子对LPS诱导免疫应激仔猪淋巴细胞相关炎症蛋白及mRNA表达量的影响19ABCDEF图2注射前仔猪淋巴细胞NF-κB通路及IAP相关蛋白表达量Figure2NF-κBpathwayandIAPproteinexpressioninpigletlymphocytesbeforeinjection(A/B)p65蛋白表达量(A/C)磷酸化p65蛋白表达量(A/D)IκB蛋白表达量(A/E)磷酸化IκB蛋白表达量(A/F)IAP蛋白表达量(A/B)p65proteinexpressionlevel(A/C)Phosphorylationlevelofp65(A/D)IκBproteinexpressionlevel(A/E)PhosphorylationlevelofIκB(A/F)IAPproteinexpressionlevel注：*表示与对照组相比，蛋白表达量差异显著（P<0.05）；**表示与对照组相比，蛋白表达量差异极显著（P<0.01）Note:*indicatesasignificantdifferenceinproteinexpressioncomparedwiththecontrolgroup(P<0.05).**indicatesthatcomparedwiththecontrolgroup,theproteinexpressionlevelisextremelysignificantdifferent(P<0.01)结果表明，在注射LPS前，即饲喂栀子10天后，各试验组与对照组相比，断奶仔猪外周血单核淋巴细胞中NF-κBp65、磷酸化p65（P-p65）、IAP、IκB及磷酸化IκB（P-IκB）蛋白表达受到了栀子添加的不同影响。与对照组相比，三个栀子添加组的NF-κBp65蛋白表达量均显著低于对照组（P<0.05），且随栀子添加量减少而表达量降低；低剂量和中剂量栀子添加组P-p65蛋白表达量在显著低于对照组（P<0.05），高剂量栀子添加组P-p65的蛋白表达量略低于对照组，但差异不明显（P>0.05）；低剂量栀子添加组的IκB蛋白显著降低（P<0.05），中、高剂量栀子添加组的IκB蛋白表达量与对照组相比无显著差异（P>0.05）；但低、中、高剂量栀子添加组P-IκB蛋白表达量均显著低于对照组（P<0.05），且高剂量添
栀子及其提取物对免疫应激仔猪及IPEC-J2细胞相关炎症通路的影响20加组P-IκB蛋白表达量最低（P<0.05）；同时，低剂量和中剂量栀子添加组IAP蛋白表达量显著低于对照组（P<0.05），而高剂量栀子对IAP表达没有显著影响（P>0.05）。(2)注射后3hABCDEF图3注射后3h仔猪淋巴细胞NF-κB通路及IAP相关蛋白表达量Figure3NF-κBpathwayandIAPproteinexpressioninpigletlymphocytes3hafterinjection(A/B)p65蛋白表达量(A/C)磷酸化p65蛋白表达量(A/D)IκB蛋白表达量(A/E)磷酸化IκB蛋白表达量(A/F)IAP蛋白表达量(A/B)p65proteinexpressionlevel(A/C)Phosphorylationlevelofp65(A/D)IκBproteinexpressionlevel(A/E)PhosphorylationlevelofIκB(A/F)IAPproteinexpressionlevel注：*表示与对照组相比，蛋白表达量差异显著（P<0.05）；**表示与对照组相比，蛋白表达量差异极显著（P<0.01）Note:*indicatesasignificantdifferenceinproteinexpressioncomparedwiththecontrolgroup(P<0.05).**indicatesthatcomparedwiththecontrolgroup,theproteinexpressionlevelisextremelysignificantdifferent(P<0.01)结果表明，在注射LPS之后3h，与炎症对照组相比，三个栀子添加组NF-κBp65蛋白表达量没有显著变化（P>0.05）；低中剂量栀子添加组P-p65的蛋白表达量无明显变化（P>0.05），但高剂量栀子添加组P-p65的蛋白表达量显著减低（P<0.05）；低剂量栀子添加组的IκB蛋白显著低于对照组（P<0.05），中高剂量栀子添加组IκB蛋白变化不明显（P>0.05）；低中剂量栀子添加组P-IκB蛋白表达量无明显变化，但是高剂量栀子添加组中
【参考文献】：
期刊论文
[1]葛根枳椇子栀子胶囊解酒护肝功效研究[J]. 陶施民,卢贤欢,郭雅娟,余庆涛,葛亚中,马忠化,麦焕娣,梁金强,黄芝瑛. 中医药导报. 2018(10)
[2]栀子中京尼平苷及藏红花素的神经保护作用研究进展[J]. 王立,潘海鸥,钱海峰,张晖,齐希光. 中草药. 2017(12)
[3]天然药物抗炎成分及作用机制的研究进展[J]. 刘莹,王振洲,李平亚,刘金平,张凯. 特产研究. 2017(01)
[4]清温消热饮对小鼠LPS致炎模型血清中炎性因子的影响[J]. 赵婵娟. 中国兽药杂志. 2017(01)
[5]京尼平苷对硝普钠诱导软骨细胞凋亡与细胞周期的影响[J]. 陈万军,鲍同柱,陈恳,朱长谋,万峰,谭玉林,鄢飞. 中国骨伤. 2013(03)
[6]黄芪多糖对LPS损伤小肠上皮细胞的保护作用[J]. 袁媛,孙梅. 世界华人消化杂志. 2008(01)
[7]京尼平苷及其衍生物的药效学研究进展[J]. 史卉妍,何鑫,欧阳冬生,周宏灏. 中国药学杂志. 2006(01)
[8]京尼平苷和西红花酸保肝利胆作用的比较[J]. 彭婕,钱之玉,刘同征,饶淑云,曲斌. 中国新药杂志. 2003(02)
硕士论文
[1]探究TLR4对小鼠肠黏膜紧密连接蛋白的调控作用[D]. 刘畅.中国医科大学 2018
[2]黄芩苷对免疫应激仔猪外周血单核细胞NF-κB及NLRP3信号通路的影响[D]. 姚文旭.武汉轻工大学 2015
[3]栀子提取物京尼平苷作为一种神经保护剂的作用机制研究[D]. 刘子萱.重庆工商大学 2015
[4]对乙酰氨基酚联合乙酰半胱氨酸对仔猪免疫应激性炎症的影响[D]. 张家威.武汉工业学院 2012
本文编号：3061990
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