TRIM62抑制禽网状内皮组织增生症病毒感染的作用
发布时间：2021-03-05 18:22
网状内皮组织增生症病毒（Reticuloendotheliosis virus,REV）属于禽反转录病毒,除形成肿瘤外,还可导致免疫抑制,引起继发感染和混合感染频发,造成养禽业重大损失,目前尚未有商品化应用的疫苗或药物。TRIM62是TRIM/RBCC家族的一员,包括TRIM家族高度保守的RING、B-box、Coiled coil结构域,其C-末端为SPRY结构域。TRIM家族的很多蛋白都具有抗反转录病毒的作用,且其作用机制与其结构域密切相关。作为一种天然免疫因子,TRIM62在其他物种上的抗反转录病毒作用已有一定研究,如人TRIM62蛋白抗HIV-1复制,且其RING结构域缺失加强其对HIV-1的抑制等。基于此,本研究设计实验,研究鸡TRIM62对反转录病毒REV复制的抑制作用,明确其结构域的影响,分析TRIM62在抑制REV复制过程中的互作蛋白,为深入研究鸡TRIM62抑制禽反转录病毒复制的机制奠定基础。通过荧光定量PCR和Western Blot检测接毒不同时间点的细胞以及鸡各组织中TR IM62表达,明确REV复制对TRIM62表达的影响以及二者间关联性;分别转染TRIM62...
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同接毒时间TRIM62蛋白表达以及REV转录水平Fig.1ExpressionofTRIM62proteinandthelevelofREVtranscriptionatdifferenttimeofexposureA：REV接毒细胞TRIM62转录B：REV接毒细胞REV转录C：TRIM62的WesternBlot检测结果，1—6分别为正常、接毒12h、接毒24h、接毒48h、接毒72h、接毒96h细
1-6 is normal, 12h of poisoning, 24h of poisoning, 48h of poisoning, 72h of poisoning, 96h of virus3.2 REV 感染后鸡不同组织中 TRIM62 表达变化我们分别检测REV感染不同时间鸡不同组织REV和TRIM62的表达，如图2 所示，第一周时，肝（A）、肾（B）、脾（C）、法氏囊（E）的病毒转录呈现极显著上升，此时接毒组比正常组的蛋白转录有所下降；此时间点的脑（D）中几乎无病毒复制，骨髓（F）的病毒有复制但不如其他组织的显著，而蛋白转录也几乎无大变化。第三周时，肝（A）的病毒复制增加但趋势相对减缓，脾（C）中的病毒复制与第一周几乎无大变化，而接毒组肝（A）、脾（C）的蛋白转录比正常组有所升高不过并不显著；肾（B）
图 3 TRIM62 慢病毒重组载体转染效果Fig.3 Transfection effect of TRIM62 lentivirus recombinant vectorA:Normal 空白对照 B:LV-Negative（108TU/mL）转染 C:LV-TRIM62（108TU/mL）转染A: Normal blank control B: LV-Negative (108TU/mL) transfection C: LV-TRIM62 (108TU/mL) transfection.2 TRIM62 表达增加抑制病毒表达无论是在正常细胞还是接毒细胞，LV-TRIM62 慢病毒重组载体转染细胞的 TRI显著高于未转染细胞（4A），TRIM62 过表达细胞的病毒表达显著（P＜0.01转染细胞（4B）。由此可知，TRIM62 过表达会显著抑制病毒表达。
【参考文献】：
期刊论文
[1]禽网状内皮组织增生症病毒的分离鉴定、全基因序列分析及致病性试验[J]. 王建丽,郭凯,刘正伟,刘郁夫,刘传高,赵大伟,李慧敏,董楠,陈瑞爱. 中国畜牧兽医. 2014(09)
[2]河南南阳地区规模鸡场J亚型白血病及鸡网状内皮组织增生症的血清学调查[J]. 董海岚,张东林,张玉强,李丽,孙艳会,李娜,王向东. 中国兽医杂志. 2013(09)
[3]华东北部地区禽肿瘤性传染病流行病学调查[J]. 张康,龚振华,刘坤,王丽萍,刘国庆,李蕾,张丽娟,侯广宇,张秀娟,单虎. 中国动物检疫. 2013(08)
[4]禽网状内皮组织增殖病病毒GD09株的分离与全基因组测序[J]. 史伟伟,刘红波,徐成刚,廖明,曹伟胜. 中国畜牧兽医. 2011(09)
[5]规模鸡场网状内皮增生症的血清学调查[J]. 张玉强. 中国牧业通讯. 2011(13)
[6]网状内皮组织增生病病毒HLJR0901株全基因组的克隆及序列分析[J]. 邓小芸,祁小乐,高宏雷,高玉龙,秦立廷,高立,王永强,王笑梅. 中国兽医科学. 2010(07)
[7]我国部分地区蛋鸡群ALV-J及与REV、MDV、CAV混合感染检测[J]. 秦立廷,高玉龙,潘伟,邓小芸,孙芬芬,李凯,祁小乐,高宏雷,刘超男,王笑梅. 中国预防兽医学报. 2010(02)
[8]Cdk5/p35激酶与肌动蛋白细胞骨架结合关系的鉴定[J]. 张昭军,齐众,乔明强. 细胞生物学杂志. 2008(04)
[9]我国白羽肉用型鸡群中CAV、REV和REOV感染状况的血清学调查[J]. 崔治中,孟珊珊,姜世金,魏建萍. 畜牧兽医学报. 2006(02)
[10]鸡J亚群白血病病毒与网状内皮增殖病病毒混合感染发病机理的研究[J]. 刘思当,商营利,赵德明. 山东农业大学学报(自然科学版). 2005(02)
博士论文
[1]禽网状内皮组织增生病基因工程亚单位疫苗及DNA疫苗的研制[D]. 李凯.中国农业科学院 2014
硕士论文
[1]REV感染对SPF雏鸡免疫器官细胞凋亡及Bcl-2、C-myc基因表达的影响[D]. 侯宁.东北农业大学 2016
[2]J亚群禽白血病病毒与禽网状内皮组织增生症病毒Exosome途径协同感染机制[D]. 庄萍萍.山东农业大学 2016
[3]山东省家禽肿瘤性疾病流行病学调查及GIS预警系统的建立[D]. 张洪海.山东农业大学 2009
[4]鸭群中REV感染的流行病学调查及囊膜糖蛋白基因的序列分析[D]. 倪楠.山东农业大学 2008
本文编号：3065649
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同接毒时间TRIM62蛋白表达以及REV转录水平Fig.1ExpressionofTRIM62proteinandthelevelofREVtranscriptionatdifferenttimeofexposureA：REV接毒细胞TRIM62转录B：REV接毒细胞REV转录C：TRIM62的WesternBlot检测结果，1—6分别为正常、接毒12h、接毒24h、接毒48h、接毒72h、接毒96h细
1-6 is normal, 12h of poisoning, 24h of poisoning, 48h of poisoning, 72h of poisoning, 96h of virus3.2 REV 感染后鸡不同组织中 TRIM62 表达变化我们分别检测REV感染不同时间鸡不同组织REV和TRIM62的表达，如图2 所示，第一周时，肝（A）、肾（B）、脾（C）、法氏囊（E）的病毒转录呈现极显著上升，此时接毒组比正常组的蛋白转录有所下降；此时间点的脑（D）中几乎无病毒复制，骨髓（F）的病毒有复制但不如其他组织的显著，而蛋白转录也几乎无大变化。第三周时，肝（A）的病毒复制增加但趋势相对减缓，脾（C）中的病毒复制与第一周几乎无大变化，而接毒组肝（A）、脾（C）的蛋白转录比正常组有所升高不过并不显著；肾（B）
图 3 TRIM62 慢病毒重组载体转染效果Fig.3 Transfection effect of TRIM62 lentivirus recombinant vectorA:Normal 空白对照 B:LV-Negative（108TU/mL）转染 C:LV-TRIM62（108TU/mL）转染A: Normal blank control B: LV-Negative (108TU/mL) transfection C: LV-TRIM62 (108TU/mL) transfection.2 TRIM62 表达增加抑制病毒表达无论是在正常细胞还是接毒细胞，LV-TRIM62 慢病毒重组载体转染细胞的 TRI显著高于未转染细胞（4A），TRIM62 过表达细胞的病毒表达显著（P＜0.01转染细胞（4B）。由此可知，TRIM62 过表达会显著抑制病毒表达。
【参考文献】：
期刊论文
[1]禽网状内皮组织增生症病毒的分离鉴定、全基因序列分析及致病性试验[J]. 王建丽,郭凯,刘正伟,刘郁夫,刘传高,赵大伟,李慧敏,董楠,陈瑞爱. 中国畜牧兽医. 2014(09)
[2]河南南阳地区规模鸡场J亚型白血病及鸡网状内皮组织增生症的血清学调查[J]. 董海岚,张东林,张玉强,李丽,孙艳会,李娜,王向东. 中国兽医杂志. 2013(09)
[3]华东北部地区禽肿瘤性传染病流行病学调查[J]. 张康,龚振华,刘坤,王丽萍,刘国庆,李蕾,张丽娟,侯广宇,张秀娟,单虎. 中国动物检疫. 2013(08)
[4]禽网状内皮组织增殖病病毒GD09株的分离与全基因组测序[J]. 史伟伟,刘红波,徐成刚,廖明,曹伟胜. 中国畜牧兽医. 2011(09)
[5]规模鸡场网状内皮增生症的血清学调查[J]. 张玉强. 中国牧业通讯. 2011(13)
[6]网状内皮组织增生病病毒HLJR0901株全基因组的克隆及序列分析[J]. 邓小芸,祁小乐,高宏雷,高玉龙,秦立廷,高立,王永强,王笑梅. 中国兽医科学. 2010(07)
[7]我国部分地区蛋鸡群ALV-J及与REV、MDV、CAV混合感染检测[J]. 秦立廷,高玉龙,潘伟,邓小芸,孙芬芬,李凯,祁小乐,高宏雷,刘超男,王笑梅. 中国预防兽医学报. 2010(02)
[8]Cdk5/p35激酶与肌动蛋白细胞骨架结合关系的鉴定[J]. 张昭军,齐众,乔明强. 细胞生物学杂志. 2008(04)
[9]我国白羽肉用型鸡群中CAV、REV和REOV感染状况的血清学调查[J]. 崔治中,孟珊珊,姜世金,魏建萍. 畜牧兽医学报. 2006(02)
[10]鸡J亚群白血病病毒与网状内皮增殖病病毒混合感染发病机理的研究[J]. 刘思当,商营利,赵德明. 山东农业大学学报(自然科学版). 2005(02)
博士论文
[1]禽网状内皮组织增生病基因工程亚单位疫苗及DNA疫苗的研制[D]. 李凯.中国农业科学院 2014
硕士论文
[1]REV感染对SPF雏鸡免疫器官细胞凋亡及Bcl-2、C-myc基因表达的影响[D]. 侯宁.东北农业大学 2016
[2]J亚群禽白血病病毒与禽网状内皮组织增生症病毒Exosome途径协同感染机制[D]. 庄萍萍.山东农业大学 2016
[3]山东省家禽肿瘤性疾病流行病学调查及GIS预警系统的建立[D]. 张洪海.山东农业大学 2009
[4]鸭群中REV感染的流行病学调查及囊膜糖蛋白基因的序列分析[D]. 倪楠.山东农业大学 2008
本文编号：3065649
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