禽流感病毒H5N1神经氨酸酶诱导致小鼠CD4 + T细胞向Th17分化的研究

发布时间：2021-03-05 17:09

　　禽流感病毒（Avian influenza virus, AIV）引起的禽流感疫病一直以来都困扰着世界养禽业,并因此导致巨大的经济损失。同时,禽流感病毒出现的从禽传染到人的现象也威胁着人类健康,引起社会的恐慌。禽流感病毒的神经氨酸酶（Neuraminidase, NA）是一种位于病毒体包膜上呈蘑菇状的四聚体糖蛋白,具有水解唾液酸的活性,是病毒分型的依据之一,它与流感病毒的致病力和感染特异性直接相关。禽流感病毒感染导致较高的死亡率被证明和过度炎症反应密切相关。而CD4+T细胞的Th17分化参与介导炎症细胞浸润,从而导致宿主严重病理组织损伤和机体的功能紊乱。在本研究中,我们发现禽流感H5N1的NA能导致CD4+T细胞的Th17分化,推测可能和AIV导致的过度炎症反应和细胞因子风暴相关,取得的主要结果如下：1.禽流感病毒H5N1的NA接种小鼠引起小鼠肺脏Th17细胞数量增加。通过对5周龄的小鼠鼻腔接种H5N1的神经氨酸酶,取小鼠肺脏组织的T细胞进行流式细胞术检测Th17和Treg细胞分化。结果发现,经过H5N1的神经氨酸酶感染后的小鼠肺脏Th17的细胞比例显著上升,并且呈现剂量依赖性。2.禽... 

【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略语表
1 文献综述
    1.1 禽流感
        1.1.1 禽流感病毒
        1.1.2 流感病毒的复制
        1.1.3 神经氨酸酶（Neuraminidase,NA）
        1.1.4 神经氨酸酶与TGF-β的互作
        1.1.5 神经氨酸酶抑制剂（Neuraminidase Inhibitors,NAIs）
    1.2 细胞因子风暴
        1.2.1 细胞因子风暴介绍
        1.2.2 禽流感病毒感染与细胞因子风暴
    1.3 树突状细胞
        1.3.1 树突状细胞来源与功能
        1.3.2 树突状细胞与神经氨酸酶
    1.4 淋巴细胞
        1.4.1 T淋巴细胞
+T细胞">        1.4.2 CD4⁺T细胞
+T细胞Th17分化的研究进展">    1.5 CD4⁺T细胞Th17分化的研究进展
2 目的意义
3 材料方法
    3.1 实验材料
        3.1.1 主要实验仪器
        3.1.2 小鼠
        3.1.3 细胞培养试剂与耗材
        3.1.4 主要药品与试剂
        3.1.5 其他试剂的配制
    3.2 实验方法
        3.2.1 禽流感病毒H5N1的NA接种小鼠
        3.2.2 细胞内细胞因子分流分析
        3.2.3 Treg细胞流式检测方法
        3.2.4 小鼠骨髓来源的树突状细胞分离培养
        3.2.5 BMDC诱导成熟和产物检测
        3.2.6 ELISA检测细胞因子
        3.2.7 细胞流式检测细胞表面分子
+T细胞分离培养">        3.2.8 小鼠脾脏CD4⁺T细胞分离培养
        3.2.9 细胞RNA提取及反转录
        3.2.10 荧光定量PCR检测
        3.2.11 数据分析方法
4 实验结果
    4.1 禽流感病毒H5N1 NA接种小鼠
    4.2 BMDC细胞体外培养
    4.3 禽流感病毒NA促进BMDC成熟
+T细胞细胞分化">    4.4 H5N1的NA刺激CD4⁺T细胞细胞分化
    4.5 产物检测
5 讨论
    5.1 禽流感病毒NA诱导树突状细胞成熟
+T细胞">    5.2 NA诱导共培养的BMDC和CD4⁺T细胞
    5.3 H5N1 NA细胞产生细胞因子
+T细胞分化">    5.4 H5N1 NA诱导CD4⁺T细胞分化
    5.5 本课题的展望
    5.6 试验结论总结模式图
6 结论
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]滤泡辅助性T细胞[J]. 冀丽军,孙剑.  生命的化学. 2013(03)
[2]CD4+ T淋巴细胞功能研究新进展[J]. 孙君重,肖文华,于力.  中国实验血液学杂志. 2010(02)
[3]树突状细胞表面标志及功能研究进展[J]. 刘秀红,付萍.  皮肤病与性病. 2009(03)
[4]禽流感病毒神经氨酸酶的结构及其生物学功能[J]. 王全英,乔传玲,申之义.  动物医学进展. 2005(12)
[5]Development of Dendritic Cell System[J]. Aleksandar Dakic.  Cellular & Molecular Immunology. 2004(02)



本文编号：3065549