TGF-β1作用下牛乳腺上皮细胞来源外泌体对牛巨噬细胞增殖、凋亡及迁移的影响及机制研究
发布时间：2021-03-08 15:59
目的:奶牛乳腺炎是奶牛养殖业常见的乳腺疾病,严重影响了奶牛的健康与生产性能,甚至对人类健康也有所影响,我国奶牛业奶牛乳腺炎的发病率一直居高不下,对社会经济造成了巨大的损害。金黄色葡萄球菌是奶牛乳腺炎的主要病原菌之一。TGF-β1是一种多功能的细胞因子,对调节机体免疫及细胞增殖发挥重要的作用。本课题组前期研究发现乳腺炎多发的奶牛群TGF-β1水平较高,并且TGF-β1会增加奶牛乳腺上皮细胞对金黄色葡萄球菌的易感性。然而,在TGF-β1作用下,奶牛乳腺上皮细胞是否会通过细胞间通讯影响免疫细胞的功能却仍然是未知的。因此本研究假设在TGF-β1作用下,奶牛乳腺上皮细胞来源的外泌体会影响牛巨噬细胞的功能,旨在探讨在TGF-β1作用下,奶牛乳腺上皮细胞来源的外泌体影响牛巨噬细胞的功能的机制。方法:在本研究中我们通过超速离心法和试剂盒法提取了正常牛乳腺上皮细胞（MAC-T）来源的外泌体（un-exo）和TGF-β1作用下牛乳腺上皮细胞来源的外泌体（t-exo）,分别作用于牛巨噬细胞,通过MTT实验和细胞流式实验检测了两种外泌体体对牛巨噬细胞增殖和细胞周期的影响,采用q RT-PCR和Western ...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
来源于未处理的MAC-T细胞（un-exo）和TGFβ1处理的MAC-T细胞（t-exo）
第二篇 研究内容 第一章 TGF-β1 作用下牛乳腺上皮细胞来源外泌体对牛巨噬细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响及机制研究 间的 BOSMAC 中 p38 的 mRNA 表达水平。如图 3C 所示，t-exo 处理显著提高了 BOSMAC 中 p38 的 mRNA 表达水平。这些结果表明，在 TGF-β1 作用下来源于牛乳腺上皮细胞的外泌体可诱导牛巨噬细胞中 p38 的表达和磷酸化。
且两种来源外泌体对引起牛巨噬细胞凋亡的能力无显著差异（图5A 和图 5B）。FADD 又名 fas 相关死亡域蛋白，可以与 caspase8 相互作用是后者激活，从而形成死亡诱导信号复合物，再激活一系列的 Caspase-1, 3, 7 等，促进Fas 蛋白所在细胞的凋亡发生。Western blot 结果显示，相比于对照组，un-exo 组和 t-exo 组 FADD 蛋白、caspase8 蛋白的表达量都显著降低。总之，这些数据表明，牛乳腺上皮细胞来源的外泌体可以诱导牛巨噬细胞凋亡，这一过程不依赖FADD 信号通路，且 TGF-β1 作用对于牛乳腺上皮细胞来源的外泌体诱导牛巨噬细胞凋亡无显著影响。
本文编号：3071298
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
来源于未处理的MAC-T细胞（un-exo）和TGFβ1处理的MAC-T细胞（t-exo）
第二篇 研究内容 第一章 TGF-β1 作用下牛乳腺上皮细胞来源外泌体对牛巨噬细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响及机制研究 间的 BOSMAC 中 p38 的 mRNA 表达水平。如图 3C 所示，t-exo 处理显著提高了 BOSMAC 中 p38 的 mRNA 表达水平。这些结果表明，在 TGF-β1 作用下来源于牛乳腺上皮细胞的外泌体可诱导牛巨噬细胞中 p38 的表达和磷酸化。
且两种来源外泌体对引起牛巨噬细胞凋亡的能力无显著差异（图5A 和图 5B）。FADD 又名 fas 相关死亡域蛋白，可以与 caspase8 相互作用是后者激活，从而形成死亡诱导信号复合物，再激活一系列的 Caspase-1, 3, 7 等，促进Fas 蛋白所在细胞的凋亡发生。Western blot 结果显示，相比于对照组，un-exo 组和 t-exo 组 FADD 蛋白、caspase8 蛋白的表达量都显著降低。总之，这些数据表明，牛乳腺上皮细胞来源的外泌体可以诱导牛巨噬细胞凋亡，这一过程不依赖FADD 信号通路，且 TGF-β1 作用对于牛乳腺上皮细胞来源的外泌体诱导牛巨噬细胞凋亡无显著影响。
本文编号：3071298
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