TLR4介导的ATP释放在副猪嗜血杆菌脂多糖上调IL-1β中的作用机制
发布时间：2021-03-18 14:15
副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis,HPS）是一种革兰氏阴性细小杆菌,存在于猪的上呼吸道,可引起猪的多发性浆膜炎、关节炎以及脑膜炎等症状,常与猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）等病原体发生混合感染或继发感染,引起较高的发病率和死亡率。部分强毒力HPS菌株可突破宿主的先天性免疫和获得性免疫防线,逃避细胞免疫和体液免疫体系。HPS的自身分子结构（如脂多糖）以及产生的蛋白等可以作为毒力因子,在粘附和侵袭宿主以及逃避宿主的天然免疫和炎症过程中发挥重要作用,造成猪体患病甚至死亡。因此对HPS致病和炎性相关信号通路的研究至关重要。P2X7受体是一种膜蛋白受体,是ATP-门控阳离子通道,ATP与P2X7受体结合后,阳离子通道打开,引起Ca2+、Na+内流和K+外流,并促使细胞膜孔道的形成,继而导致炎性细胞因子如IL-1β的释放。NLRP3炎性小体主要包括NLRP3蛋白和Caspase-1蛋白以及凋亡相关斑点样蛋...
【文章来源】：山东师范大学山东省
【文章页数】：87 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
HPS不同毒株的16SrRNA序列同源性分析
山东师范大学硕士学位论文23图2-1分离株PCR扩增结果Fig.2-1PCRamplificationresultsofbacterialsolutionM：DL2000Marker；1-8：HPS分离株；+：阳性对照；—：阴性对照M：DL2000Marker；1-8：HPSisolates；+：Positivecontrol；—：Negativecontrol图2-2HPS不同毒株的16SrRNA序列同源性分析Fig.2-216SrRNAsequencehomologyanalysisofdifferentHPSstrains2.3形态学观察结果分离株在TSA固体培养基上，可长出较多的圆形的、光滑湿润并且无色透明的露珠状小菌落（图2-3）。取上述菌落涂片，革兰氏染色后镜检观察，细菌为革兰氏阴性的细小杆菌，呈球杆状、长杆状、短杆状、间或丝状等多种形态。图为LZ株形态观察结果（图2-3）。
山东师范大学硕士学位论文24图2-3LZ株在TSA培养基上的菌落形态（左）及显微镜下细菌形态（右）（400×）Fig.2-3ThemorphologyoftheHPScoloniesontheTSAmedium(left)andthemorphologyoftheHPSunderthemicroscopeofLZstrain(right)(400×)3讨论副猪嗜血杆菌病为危害现代养猪业的重要传染病之一，在世界范围内引起了广泛重视。本研究对2016-2018年山东省12个地区送检的103份疑似病料进行检测，结果显示HPS的检出率约为28.16%。不同地域和养殖环境中，HPS的各种血清型的流行情况也不尽相同，虽然流行情况各有差异，但统计结果表明血清4型和5型HPS最为流行。本研究确定了当前山东地区流行的HPS主要是血清4型和5型，其次是1、12型。本研究采用细菌分离培养结合PCR鉴定的方法对103份疑似病料进行HPS的分离鉴定，并进一步确定其血清型，同时分析该病的发生与季节和猪日龄的关系，以了解副猪嗜血杆菌病的流行情况。HPS是猪上呼吸道的常在菌，正常条件下不致病，但在断奶、通风不良、气温剧变、混群、长途运输等各种应激刺激的条件下，可破坏宿主上呼吸道的防御机制，引起上呼吸道粘膜的损伤，从而导致敏感猪发生全身感染。该病一年四季均可发生，但在早春（3、4月份）和深秋（10、11月份）由于昼夜温差大及通风不良等原因，更易暴发流行。HPS易感2周龄到4月龄的猪，但以5~8周龄的断奶保育仔猪最为多见。本研究结果显示该病的发病时间主要集中于每年的3、4、10、11月份，发病猪日龄主要集中在31~50天，这与仔猪的早期断奶养殖模式及其母源抗体的消长规律有关。
【参考文献】：
期刊论文
[1]四川省副猪嗜血杆菌分离株β-内酰胺类药物药敏特性及质粒介导耐药基因检测研究[J]. 魏海林,付丹,王正皓,文心田,曹三杰,黄小波,伍锐,赵勤,文翼平. 中国预防兽医学报. 2018(03)
[2]牛津杯药敏试验筛选副猪嗜血杆菌敏感药物的研究[J]. 刘德成. 黑龙江畜牧兽医. 2016(14)
[3]副猪嗜血杆菌分离株耐药性、血清型及RAPD基因型分析[J]. 吴村,崔国林,金文杰,张鑫宇,路明华,陈小玲,王宏俊,朱瑞良,徐福洲. 中国兽医学报. 2015(02)
[4]副猪嗜血杆菌国内流行血清型菌株的致病性比较研究[J]. 王乐,赵战勤,薛云,刘会胜,邓雯. 中国兽医学报. 2014(11)
[5]副猪嗜血杆菌血清5型分离株生长曲线与致病力研究[J]. 王大鹏,吴家强,于江,丛晓燕,杜以军,孙文博,张玉玉,时建立,李俊,周顺,王金宝. 西南农业学报. 2011(05)
[6]副猪嗜血杆菌主要毒力因子和致病机理的研究进展[J]. 李静怡,张建民,徐成刚,郭莉莉,陈济铛,廖明. 中国畜牧兽医. 2010(12)
[7]副猪嗜血杆菌ompP2基因的结构特征及其与毒力的联系[J]. 赵倩,汤承,杨发龙,邵国青,岳华. 中国科学:生命科学. 2010(06)
[8]副猪嗜血杆菌病流行病学及致病因子的研究进展[J]. 薛国聪,任涛. 中国畜牧兽医. 2009(05)
[9]副猪嗜血杆菌病及其防制[J]. 李纪春,徐高原. 养殖与饲料. 2008(10)
[10]副猪嗜血杆菌病研究进展[J]. 华升,梅书棋,曾德芳,徐涤平,李勇. 动物医学进展. 2006(11)
博士论文
[1]副猪嗜血杆菌耐药性调查和耐药机制研究[D]. 刘英玉.华中农业大学 2013
[2]LPS受体介导的细胞激活的信号机制研究[D]. 孙学刚.中国人民解放军第一军医大学 2003
硕士论文
[1]TLR介导的ATP释放对抗菌免疫的调控功能和机制研究[D]. 滕云飞.华东师范大学 2014
[2]副猪嗜血杆菌流行病学与人工感染猪病理学研究[D]. 尹秀凤.南京农业大学 2005
本文编号：3088466
【文章来源】：山东师范大学山东省
【文章页数】：87 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
HPS不同毒株的16SrRNA序列同源性分析
山东师范大学硕士学位论文23图2-1分离株PCR扩增结果Fig.2-1PCRamplificationresultsofbacterialsolutionM：DL2000Marker；1-8：HPS分离株；+：阳性对照；—：阴性对照M：DL2000Marker；1-8：HPSisolates；+：Positivecontrol；—：Negativecontrol图2-2HPS不同毒株的16SrRNA序列同源性分析Fig.2-216SrRNAsequencehomologyanalysisofdifferentHPSstrains2.3形态学观察结果分离株在TSA固体培养基上，可长出较多的圆形的、光滑湿润并且无色透明的露珠状小菌落（图2-3）。取上述菌落涂片，革兰氏染色后镜检观察，细菌为革兰氏阴性的细小杆菌，呈球杆状、长杆状、短杆状、间或丝状等多种形态。图为LZ株形态观察结果（图2-3）。
山东师范大学硕士学位论文24图2-3LZ株在TSA培养基上的菌落形态（左）及显微镜下细菌形态（右）（400×）Fig.2-3ThemorphologyoftheHPScoloniesontheTSAmedium(left)andthemorphologyoftheHPSunderthemicroscopeofLZstrain(right)(400×)3讨论副猪嗜血杆菌病为危害现代养猪业的重要传染病之一，在世界范围内引起了广泛重视。本研究对2016-2018年山东省12个地区送检的103份疑似病料进行检测，结果显示HPS的检出率约为28.16%。不同地域和养殖环境中，HPS的各种血清型的流行情况也不尽相同，虽然流行情况各有差异，但统计结果表明血清4型和5型HPS最为流行。本研究确定了当前山东地区流行的HPS主要是血清4型和5型，其次是1、12型。本研究采用细菌分离培养结合PCR鉴定的方法对103份疑似病料进行HPS的分离鉴定，并进一步确定其血清型，同时分析该病的发生与季节和猪日龄的关系，以了解副猪嗜血杆菌病的流行情况。HPS是猪上呼吸道的常在菌，正常条件下不致病，但在断奶、通风不良、气温剧变、混群、长途运输等各种应激刺激的条件下，可破坏宿主上呼吸道的防御机制，引起上呼吸道粘膜的损伤，从而导致敏感猪发生全身感染。该病一年四季均可发生，但在早春（3、4月份）和深秋（10、11月份）由于昼夜温差大及通风不良等原因，更易暴发流行。HPS易感2周龄到4月龄的猪，但以5~8周龄的断奶保育仔猪最为多见。本研究结果显示该病的发病时间主要集中于每年的3、4、10、11月份，发病猪日龄主要集中在31~50天，这与仔猪的早期断奶养殖模式及其母源抗体的消长规律有关。
【参考文献】：
期刊论文
[1]四川省副猪嗜血杆菌分离株β-内酰胺类药物药敏特性及质粒介导耐药基因检测研究[J]. 魏海林,付丹,王正皓,文心田,曹三杰,黄小波,伍锐,赵勤,文翼平. 中国预防兽医学报. 2018(03)
[2]牛津杯药敏试验筛选副猪嗜血杆菌敏感药物的研究[J]. 刘德成. 黑龙江畜牧兽医. 2016(14)
[3]副猪嗜血杆菌分离株耐药性、血清型及RAPD基因型分析[J]. 吴村,崔国林,金文杰,张鑫宇,路明华,陈小玲,王宏俊,朱瑞良,徐福洲. 中国兽医学报. 2015(02)
[4]副猪嗜血杆菌国内流行血清型菌株的致病性比较研究[J]. 王乐,赵战勤,薛云,刘会胜,邓雯. 中国兽医学报. 2014(11)
[5]副猪嗜血杆菌血清5型分离株生长曲线与致病力研究[J]. 王大鹏,吴家强,于江,丛晓燕,杜以军,孙文博,张玉玉,时建立,李俊,周顺,王金宝. 西南农业学报. 2011(05)
[6]副猪嗜血杆菌主要毒力因子和致病机理的研究进展[J]. 李静怡,张建民,徐成刚,郭莉莉,陈济铛,廖明. 中国畜牧兽医. 2010(12)
[7]副猪嗜血杆菌ompP2基因的结构特征及其与毒力的联系[J]. 赵倩,汤承,杨发龙,邵国青,岳华. 中国科学:生命科学. 2010(06)
[8]副猪嗜血杆菌病流行病学及致病因子的研究进展[J]. 薛国聪,任涛. 中国畜牧兽医. 2009(05)
[9]副猪嗜血杆菌病及其防制[J]. 李纪春,徐高原. 养殖与饲料. 2008(10)
[10]副猪嗜血杆菌病研究进展[J]. 华升,梅书棋,曾德芳,徐涤平,李勇. 动物医学进展. 2006(11)
博士论文
[1]副猪嗜血杆菌耐药性调查和耐药机制研究[D]. 刘英玉.华中农业大学 2013
[2]LPS受体介导的细胞激活的信号机制研究[D]. 孙学刚.中国人民解放军第一军医大学 2003
硕士论文
[1]TLR介导的ATP释放对抗菌免疫的调控功能和机制研究[D]. 滕云飞.华东师范大学 2014
[2]副猪嗜血杆菌流行病学与人工感染猪病理学研究[D]. 尹秀凤.南京农业大学 2005
本文编号：3088466
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