M.suis ENO1和MSG1蛋白分析及单味中药对其mRNA表达的影响
发布时间：2021-03-23 22:38
猪嗜血支原体（Mycoplasmasuis,Msuis）能够引起猪嗜血支原体病,给养猪业造成严重经济损失。本试验分析了M.suis的MSG1（Msuis GAPDH-like protein 1,磷酸甘油醛脱氢酶样蛋白1）和ENO1（Alpha-烯醇化酶,α-enolase,ENO1）黏附蛋白的特性,研究了单味中药对其mRNA表达影响,以揭示单味中药对M.suis黏附作用的影响。根据M.suis ENO1和MSG1基因的参考序列设计引物,对M.suis MSG1和ENO1 mRNA进行反转录、PCR扩增其完整CDS区基因,并进行测序,在线生物信息学分析。用含不同浓度单味中药的培养基对M.suis进行体外培养,通过qRT-PCR技术测定药物作用后M.suis ENO1和MSG1 mRNA的相对表达量,采用Western Blotting技术检测药物作用后两种黏附蛋白MSG1和ENO1的表达情况。结果:（1）ENO1和MSG1蛋白理化性质稳定,均含有疏水区域,均不存在信号肽,均存在二级结构,不存在跨膜结构,说明这两种蛋白分布于M.suis表面;两种蛋白均存在糖基化位点,预测其具备信号传导功...
【文章来源】：山西农业大学山西省
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２?血液悬滴镜检（４０〇ｘ）??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]中西兽医结合防治猪附红细胞体病[J]. 梁志松. 福建畜牧兽医. 2016(05)
[2]血液直接PCR方法在猪嗜血支原体检测中的应用[J]. 张晋强,薛翼鹏,李晓云,董耀泽,陈建闪,石泽宇,马海利. 中国兽医学报. 2015(08)
[3]中西医结合防治猪附红细胞体病的临床试验[J]. 孔春梅,刘小宝,田亚威. 黑龙江畜牧兽医. 2015(02)
[4]嗜血支原体病研究进展[J]. 张振兴,李玉峰. 畜牧与兽医. 2013(12)
[5]我国部分省份猪嗜血支原体感染血清流行病学调查[J]. 程王琨,侯成才,常晨,李玉峰. 畜牧与兽医. 2013(11)
[6]猪嗜血支原体猪体感染试验[J]. 王帅彪,李玉峰,常晨,程王琨,马培培,邹垚. 畜牧兽医学报. 2013(10)
[7]黄芩的研究进展[J]. 王孟华,曲玮,梁敬钰. 海峡药学. 2013(09)
[8]山羊和绵羊嗜血支原体PCR检测方法的建立与应用[J]. 刘明明,张守发,贾立军,梁晚枫,薛书江,宋建臣. 中国预防兽医学报. 2013(08)
[9]猪嗜血支原体OxaA基因的同义定点突变、克隆及在Vero细胞中的表达[J]. 刘明明,贾立军,薛书江,梁晚枫,张守发. 中国预防兽医学报. 2013(07)
[10]甘草的主要成分及其药理作用的研究进展[J]. 王兵,王亚新,赵红燕,宗岩,徐俊杰. 吉林医药学院学报. 2013(03)
博士论文
[1]牛、猪附红细胞体病诊断方法的建立及粘附机制研究[D]. 宋淇淇.华中农业大学 2014
[2]猪嗜血支原体病原特性、流行特点及与宿主互作机制研究[D]. 袁聪俐.上海交通大学 2009
硕士论文
[1]应用qPCR研究中药对猪嗜血支原体的体外作用[D]. 董耀泽.山西农业大学 2016
[2]复方中药对猪嗜血支原体自然感染猪血液指标的影响[D]. 刘雅琼.山西农业大学 2015
[3]猪嗜血支原体阻断ELISA抗体检测试剂盒组装及汉赛巴尔通体间接ELISA方法的建立[D]. 程王琨.南京农业大学 2013
[4]猪嗜血支原体的猪体感染试验和小鼠感染试验研究[D]. 王帅彪.南京农业大学 2013
[5]猪嗜血支原体MSG1蛋白与猪红细胞膜蛋白相互作用的研究[D]. 马培培.南京农业大学 2013
[6]脉冲场电泳鉴定猪嗜血支原体基因组的研究[D]. 严丽华.上海交通大学 2009
[7]猪附红细胞体病病理组织学研究及PPA—ELISA诊断方法的建立[D]. 孟日增.山西农业大学 2003
本文编号：3096543
【文章来源】：山西农业大学山西省
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２?血液悬滴镜检（４０〇ｘ）??
ＥＮ０１和ＭＳＧ１蛋白的疏水性预测??经ＥｘＰＡＳｙ的ＰｒｏｔＳｃａｌｅ分析，系统自动绘制出了?的ＥＮＯ１和ＭＳＧ１蛋白的??性图（图７），根据Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ原则，氨基酸亲水标准小于０为亲水区，大于０??水区，因此的ｆｉＶＯｌ和ＭＳＧ１?ｃＤＮＡ编码的氨基酸均含有疏水区域。??Ｐｒｏｔ?Ｓｃａｌｅ?ｏｕｔｐｕｔ?ｆｏｒ?ｕｓｅ?ｒｅｓｅｑｕｅｎｃｅ??
３．３?ＥＮ０１和ＭＳＧ１蛋白的信号肽预测??米用?Ｓｉｇｎａｌ?Ｐ?３＿０?程序（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｂｓ．ｄｔｕ．ｄｋ／ｓｅｒｖｉｃｅｓ／ＳｉｇｎａｌＰ／）对?ＥＮ０１?和?ＭＳＧ１??氨基酸序列进行信号肽分析（图８）。ＳｉｇｎａｌＰ?３．０根据信号肽序列特征预测信号肽位置。??Ｃ－ｓｃｏｒｅ?ｍａｘｉｍｕｍ：可能的信号肽切割位点得分；Ｓ－ｓｃｏｒｅ?ｍａｘｉｍｕｍ：信号肽组成部分??的可能性；Ｙ－ｓｃｏｒｅ?ｍａｘｉｍｕｍ：真实的信号肽切割位点；Ｓ－ｓｃｏｒｅ?ｍｅａｎ：?Ｓ－ｓｃｏｒｅ的平均??分，如果Ｓ－ｓｃｏｒｅｍｅａｎ＞０．５，则预测该蛋白为分泌蛋白且存在信号肽，ＥＮ０１和ＭＳＧ１??氨基酸序列预测结果显示：最大Ｃ值分别为１７、５４，最大Ｙ值分别为１７、２８，最大Ｓ??值为１４、３，从图上看出Ｓ－ｓｃｏｒｅ?ｍｅａｎ＜０．５，表明二者不存在信号肽。??ＳｉｇｎａｌＰ－４?１?ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ?（ｅｕｋ?ｎｅｔｗｏｒｋｓ）：?Ｓｅｑｕｅｎｃｅ??＇?＇?１?＇－＇——??
【参考文献】：
期刊论文
[1]中西兽医结合防治猪附红细胞体病[J]. 梁志松. 福建畜牧兽医. 2016(05)
[2]血液直接PCR方法在猪嗜血支原体检测中的应用[J]. 张晋强,薛翼鹏,李晓云,董耀泽,陈建闪,石泽宇,马海利. 中国兽医学报. 2015(08)
[3]中西医结合防治猪附红细胞体病的临床试验[J]. 孔春梅,刘小宝,田亚威. 黑龙江畜牧兽医. 2015(02)
[4]嗜血支原体病研究进展[J]. 张振兴,李玉峰. 畜牧与兽医. 2013(12)
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[6]猪嗜血支原体猪体感染试验[J]. 王帅彪,李玉峰,常晨,程王琨,马培培,邹垚. 畜牧兽医学报. 2013(10)
[7]黄芩的研究进展[J]. 王孟华,曲玮,梁敬钰. 海峡药学. 2013(09)
[8]山羊和绵羊嗜血支原体PCR检测方法的建立与应用[J]. 刘明明,张守发,贾立军,梁晚枫,薛书江,宋建臣. 中国预防兽医学报. 2013(08)
[9]猪嗜血支原体OxaA基因的同义定点突变、克隆及在Vero细胞中的表达[J]. 刘明明,贾立军,薛书江,梁晚枫,张守发. 中国预防兽医学报. 2013(07)
[10]甘草的主要成分及其药理作用的研究进展[J]. 王兵,王亚新,赵红燕,宗岩,徐俊杰. 吉林医药学院学报. 2013(03)
博士论文
[1]牛、猪附红细胞体病诊断方法的建立及粘附机制研究[D]. 宋淇淇.华中农业大学 2014
[2]猪嗜血支原体病原特性、流行特点及与宿主互作机制研究[D]. 袁聪俐.上海交通大学 2009
硕士论文
[1]应用qPCR研究中药对猪嗜血支原体的体外作用[D]. 董耀泽.山西农业大学 2016
[2]复方中药对猪嗜血支原体自然感染猪血液指标的影响[D]. 刘雅琼.山西农业大学 2015
[3]猪嗜血支原体阻断ELISA抗体检测试剂盒组装及汉赛巴尔通体间接ELISA方法的建立[D]. 程王琨.南京农业大学 2013
[4]猪嗜血支原体的猪体感染试验和小鼠感染试验研究[D]. 王帅彪.南京农业大学 2013
[5]猪嗜血支原体MSG1蛋白与猪红细胞膜蛋白相互作用的研究[D]. 马培培.南京农业大学 2013
[6]脉冲场电泳鉴定猪嗜血支原体基因组的研究[D]. 严丽华.上海交通大学 2009
[7]猪附红细胞体病病理组织学研究及PPA—ELISA诊断方法的建立[D]. 孟日增.山西农业大学 2003
本文编号：3096543
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