MiR-221通过靶向STAT5a和IRS1基因抑制奶牛乳腺上皮细胞增殖的研究
发布时间：2021-03-30 05:18
Micro RNA（mi RNA）是一种重要的转录后调控的非编码RNA,很多mi RNA在乳腺发育过程中具有重要作用。有研究表明,mi R-221被抑制后,小鼠乳腺上皮细胞数量增加,生长激素受体（GHR）的表达增强。然而,mi R-221对奶牛乳腺发育以及细胞增殖的调控功能与作用机制尚不清楚。因此,本研究通过在奶牛乳腺上皮细胞中过表达和抑制表达mi R-221,利用MTT、流式细胞分析、双荧光报告基因检测以及q RT-PCR等技术,研究mi R-221对奶牛乳腺细胞增殖的影响及其调控机制,获得的结果如下:1.在奶牛乳腺上皮细胞中分别转染mi R-221 mimic、mimic-NC、mi R-inhibitor、inhibitorNC,24 h后进行MTT检测,结果表明,mi R-221 mimic组比对照组能极其显著的抑制细胞活力（P<0.001）,而mi R-221 inhibitor能够显著提高细胞活力（P<0.001）;进一步通过细胞流式分析发现,与对照组相比,mi R-221 mimic组G2期的细胞数目明显减少,G2+S期的细胞数目与对照组相比减少了13.12%...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PI3K-AKT/mTOR和JAK2-STAT5的信号通路图(MaciasandHinck,2012)
图 1-2 miRNA 的形成过程(Winter et al., 2009)Fig.1-2 Process of miRNA formation (Winter et al., 2009)发育和泌乳相关的 miRNA 的研究进展，人们更关注 miRNA 对生命体的调控功能。有关 miRNA 对乳腺发制的研究，大部分是以乳腺癌或小鼠为研究对象。在 2004 年 Liu 等研究乳腺特异性 miRNA 的表达时发现，miRNA 具有物种特异性，在测到 23 种,而小鼠中仅发现了其中的 9 个(Liu et al., 2004)。2007 年
图 1-3 miRNA 的差异表达模式(Wang et al., 2012)g 1-3 The differences expression pattern of miRNA (Wang et al., 20和技术路线揭示 miR-221 在奶牛乳腺上皮细胞的功能及调控机制iR-221 inhibitor 研究 miR-221 对奶牛乳腺细胞增殖与细分析并验证 miR-221 的靶基因以及其在 JAK2-STAT的调控机制，为 miRNA 在奶牛乳腺发育的研究提供理件的摸索。在奶牛乳腺上皮细胞中分别转染miR-221mi察 RNA 与 Lipofectamine 2000 在最佳转染效率时的添21 的过表达和抑制表达效果。TT 试验和细胞流式分别研究 miR-221 对乳腺上皮细胞
【参考文献】：
期刊论文
[1]bta-microRNA-145对胰岛素样生长因子1受体-磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路相关基因表达的影响及其潜在靶标的揭示[J]. 李文清,王加启,南雪梅,卜登攀. 动物营养学报. 2014(09)
[2]JAK-STAT信号通路研究进展[J]. 宋舟,张立艳,董海兵,白换力,陈伟,吴帅成,伊鹏霏,付本懂,申海清,韦旭斌. 中国畜牧兽医. 2012(06)
[3]MTT法测定大肠杆菌活菌数实验研究[J]. 汪志荣,高琼,马传鑫,李燕妮. 环境科学学报. 2011(12)
[4]PI3K/Akt信号转导通路的研究进展[J]. 王维,张琍. 现代医药卫生. 2010(07)
[5]miR-221/miR-222在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义[J]. 许践刚,黄关立,颜育祥,张宪波,胡晓清,赵挺,张筱骅. 温州医学院学报. 2010(01)
[6]mTOR信号通路与调节[J]. 陈洪菊,李晋辉,屈艺,母得志. 医学分子生物学杂志. 2009 (06)
[7]奶牛催乳素（PRL）及其受体（PRLR）基因研究进展[J]. 郭彦斌,杨海玲,王慧. 山东农业大学学报(自然科学版). 2009(03)
[8]miR-221对小鼠乳腺上皮细胞增殖和泌乳功能的影响[J]. 陆黎敏,李庆章,王春梅,李晔,高学军. 中国生物化学与分子生物学报. 2009(05)
[9]TGF-β1对奶牛乳腺上皮细胞增殖、凋亡及HSP70蛋白表达的影响[J]. 狄和双,杜娟,张中霞,黄静燕,崔群维,程凯宁,王根林. 中国农业科学. 2008(10)
[10]miR-138对小鼠乳腺上皮细胞的作用及其调控的靶序列[J]. 王春梅,李庆章,李晔. 生物化学与生物物理进展. 2008(07)
博士论文
[1]奶牛乳腺发育及泌乳重要功能基因的筛选[D]. 侯晓明.东北农业大学 2009
硕士论文
[1]TGFβ1对奶牛乳腺上皮细胞和成纤维细胞增殖的影响及其信号机制的初步研究[D]. 李莹莹.吉林大学 2014
本文编号：3108937
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PI3K-AKT/mTOR和JAK2-STAT5的信号通路图(MaciasandHinck,2012)
图 1-2 miRNA 的形成过程(Winter et al., 2009)Fig.1-2 Process of miRNA formation (Winter et al., 2009)发育和泌乳相关的 miRNA 的研究进展，人们更关注 miRNA 对生命体的调控功能。有关 miRNA 对乳腺发制的研究，大部分是以乳腺癌或小鼠为研究对象。在 2004 年 Liu 等研究乳腺特异性 miRNA 的表达时发现，miRNA 具有物种特异性，在测到 23 种,而小鼠中仅发现了其中的 9 个(Liu et al., 2004)。2007 年
图 1-3 miRNA 的差异表达模式(Wang et al., 2012)g 1-3 The differences expression pattern of miRNA (Wang et al., 20和技术路线揭示 miR-221 在奶牛乳腺上皮细胞的功能及调控机制iR-221 inhibitor 研究 miR-221 对奶牛乳腺细胞增殖与细分析并验证 miR-221 的靶基因以及其在 JAK2-STAT的调控机制，为 miRNA 在奶牛乳腺发育的研究提供理件的摸索。在奶牛乳腺上皮细胞中分别转染miR-221mi察 RNA 与 Lipofectamine 2000 在最佳转染效率时的添21 的过表达和抑制表达效果。TT 试验和细胞流式分别研究 miR-221 对乳腺上皮细胞
【参考文献】：
期刊论文
[1]bta-microRNA-145对胰岛素样生长因子1受体-磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路相关基因表达的影响及其潜在靶标的揭示[J]. 李文清,王加启,南雪梅,卜登攀. 动物营养学报. 2014(09)
[2]JAK-STAT信号通路研究进展[J]. 宋舟,张立艳,董海兵,白换力,陈伟,吴帅成,伊鹏霏,付本懂,申海清,韦旭斌. 中国畜牧兽医. 2012(06)
[3]MTT法测定大肠杆菌活菌数实验研究[J]. 汪志荣,高琼,马传鑫,李燕妮. 环境科学学报. 2011(12)
[4]PI3K/Akt信号转导通路的研究进展[J]. 王维,张琍. 现代医药卫生. 2010(07)
[5]miR-221/miR-222在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义[J]. 许践刚,黄关立,颜育祥,张宪波,胡晓清,赵挺,张筱骅. 温州医学院学报. 2010(01)
[6]mTOR信号通路与调节[J]. 陈洪菊,李晋辉,屈艺,母得志. 医学分子生物学杂志. 2009 (06)
[7]奶牛催乳素（PRL）及其受体（PRLR）基因研究进展[J]. 郭彦斌,杨海玲,王慧. 山东农业大学学报(自然科学版). 2009(03)
[8]miR-221对小鼠乳腺上皮细胞增殖和泌乳功能的影响[J]. 陆黎敏,李庆章,王春梅,李晔,高学军. 中国生物化学与分子生物学报. 2009(05)
[9]TGF-β1对奶牛乳腺上皮细胞增殖、凋亡及HSP70蛋白表达的影响[J]. 狄和双,杜娟,张中霞,黄静燕,崔群维,程凯宁,王根林. 中国农业科学. 2008(10)
[10]miR-138对小鼠乳腺上皮细胞的作用及其调控的靶序列[J]. 王春梅,李庆章,李晔. 生物化学与生物物理进展. 2008(07)
博士论文
[1]奶牛乳腺发育及泌乳重要功能基因的筛选[D]. 侯晓明.东北农业大学 2009
硕士论文
[1]TGFβ1对奶牛乳腺上皮细胞和成纤维细胞增殖的影响及其信号机制的初步研究[D]. 李莹莹.吉林大学 2014
本文编号：3108937
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