PEDV、TGEV、PoRV和PKV多重RT-PCR检测方法的建立及初步应用

发布时间：2021-04-01 02:54

　　为快速鉴别诊断猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪轮状病毒（PoRV）和猪嵴病毒（PKV）,根据PEDV的M基因、TGEV的N基因、PoRV的VP6基因和PKV的3D基因序列设计4对特异性引物,通过PCR扩增目的片段并构建重组质粒,建立了一种可同时检测4种病毒的RT-PCR诊断方法,该方法可特异性扩增这4种病毒的相应片段,而对猪瘟病毒（CSFV）、猪圆环病毒2型（PCV-2）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）均无扩增,最低检出量分别为1.33×10⁴、1.33×10³、1.33×10⁴、1.33×10⁵copies/μL。应用该方法对临床55份猪腹泻样品进行检测,结果检测出14份PEDV、1份PoRV和27份PKV,未检出TGEV,其中PEDV和PKV混合感染9份。上述结果表明,建立的多重RT-PCR检测方法快速、特异、敏感,可用于以上4种腹泻病毒的临床检测和流行病学调查。 

【文章来源】：动物医学进展. 2020,41(03)北大核心

【文章页数】：5 页

【图文】：

单项PCR扩增电泳分析

所建立的多重RT-PCR方法能够特异性扩增4种病毒混合阳性样品和每种病毒的单一阳性样品,对CSFV、PCV-2、PRRSV和PRV阳性样品均无扩增(图4),表明所建立的方法具有较好的特异性。图3 多重RT-PCR引物浓度的优化

多重RT-PCR引物浓度的优化

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：3112558