止痢草油改善大鼠氧化应激的效果和机理研究
发布时间：2021-04-01 08:48
肠道黏膜不仅是机体自身与外环境接触的最大界面,而且还具有选择性渗透吸收营养物质和防御肠道内微生物及致炎因子入侵等的屏障功能。紧密连接作为肠黏膜屏障的重要组成部分,在维持肠道机械屏障完整性上发挥重要作用。然而,在现代畜牧生产中,诸多因素会诱导动物产生氧化应激。氧自由基是许多致病因素引起肠黏膜损伤的共同环节。止痢草油（Oregano Essential Oils, OEO）因其含有高浓度的多酚组分而具有抑菌和抗氧化的作用,在改善氧化应激对动物造成的危害中发挥作用。本试验首先采用体外方法评价OEO的抗菌和抗氧化特性；随后通过建立IPEC-J2细胞氧化应激模型,研究在OEO预先处理的情况下氧化应激对细胞紧密连接的影响；最后以Diquat为应激原诱导大鼠氧化应激,研究在OEO预先干预的情况下大鼠血清氧化还原状态、肠道机械屏障功能和肠道微生物菌群,以期揭示OEO缓解动物氧化应激的可能机理。主要结果如下：1.OEO体外抗氧化和抗菌特性研究。通过建立大鼠肝匀浆脂质自氧化模型,测定VE、VC和OEO的脂质自氧化率,结果表明VC、VE和OEO的抑制脂质自氧化的IC50值分别为0.756mg/ml,0.21...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略语表
文献综述
1 前言
2 氧化应激
2.1 氧化应激的概念及原因
2.2 机体ROS来源
2.4 机体的抗氧化防御系统
2.4.1 酶系抗氧化系统
2.4.2 非酶系抗氧化防御系统
3 应激对机体的影响
3.1 应激对胃肠道应激激素分泌的影响
3.2 应激对肠道菌群的影响
3.3 应激对肠道紧密连接的影响
4 缓解氧化应激的主要方式
4.1 自身调节
4.2 外源抗氧化物质的使用
5 研究氧化应激的模型
5.1 动物模型
5.1.1 LPS诱导的氧化应激模型
5.1.2 DSS诱导的氧化应激
5.1.3 Diquat诱导的氧化应激模型
5.2 细胞模型
2O2诱导的氧化应激模型"> 5.2.1 H2O2诱导的氧化应激模型
5.2.2 其它诱导氧化应激的细胞模型
6 植物提取物
6.1 植物提取物的研究概况
6.2 止痢草提取物
6.2.1 止痢草提取物的主要功能
6.2.2 止痢草提取物在畜牧生产中的作用
7 研究目的与意义
试验一 止痢草油体外抗菌抗氧化特性研究
1 前言
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.2 仪器设备
2.3 实验方法
2.3.1 VC、VE、OEO对小鼠肝匀浆脂质自氧化抑制效率的效果
2.3.2 止痢草油体外调节食糜氧化还原状态的研究
2.3.3 止痢草油体外抑菌效果的研究
2.4 数据分析
3 结果与分析
3.1 VC、VE、OEO对小鼠肝匀浆脂质自氧化抑制效率
3.2 不同浓度OEO对发酵液中ROS含量的影响
3.3 OEO对三种细菌生长曲线的影响
4 讨论
5 小结
试验二 止痢草油对氧化应激IPEC-J2细胞上皮紧密连接的干预作用
1 前言
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 细胞系
2.1.2 主要试剂
2.2 仪器设备
2.3 实验方法
2.3.1 IPEC-J2细胞复苏
2.3.2 细胞的常规培养
2.3.3 OEO对IPEC-J2增殖的影响
2O2损伤模型的建立"> 2.3.4 H2O2损伤模型的建立
2O2损伤IPEC-J2的干预作用"> 2.3.5 OEO对H2O2损伤IPEC-J2的干预作用
2.3.6 荧光定量和westernblot检测紧密连接蛋白基因和蛋白表达水平
2O2损伤IPEC-J2中紧密连接蛋白分的影响"> 2.3.7 免疫荧光检测OEO对H2O2损伤IPEC-J2中紧密连接蛋白分的影响
3 数据处理
4 结果与分析
4.1 OEO对IPEC-J2增殖的影响
2O2损伤模型的建立"> 4.2 H2O2损伤模型的建立
2O2损伤IPEC-J2的干预作用"> 4.3 OEO对H2O2损伤IPEC-J2的干预作用
2O2诱导下OEO对紧密连接蛋白基因和蛋白表达水平的影响"> 4.4 H2O2诱导下OEO对紧密连接蛋白基因和蛋白表达水平的影响
2O2诱导下OEO对紧密连接蛋白在IPEC-J2上分布的影响"> 4.5 H2O2诱导下OEO对紧密连接蛋白在IPEC-J2上分布的影响
5 讨论
6 小结
试验三 止痢草油对氧化应激大鼠的干预作用及机理研究
1 前言
2 材料与方法
2.1 试验动物
2.2 主要试剂
2.3 仪器设备
2.4 试验方法
2.4.1 动物分组与饲养
2.4.2 试验样品采集
2.4.3 血清指标的测定
2.4.4 空肠组织形态学分析
2.4.5 空肠HSP70及紧密连接相关蛋白mRNA表达水平检测
2.4.6 盲肠微生物区系分析
3 数据处理
4 结果与分析
4.1 OEO对大鼠生长性能的影响
4.2 大鼠应激状态评价及OEO的干预作用
4.3 Diquat诱导氧化应激大鼠血清氧化还原状态的影响及OEO的干预作用
4.4 OEO对氧化应激大鼠肠道机械屏障功能的影响
4.4.1 OEO对氧化应激大鼠肠道通透性影响
4.4.2 OEO对氧化应激大鼠肠道形态学影响
4.4.3 OEO对氧化应激大鼠肠道紧密连接蛋白mRNA表达量的影响
4.5 OEO对氧化应激大鼠肠道菌群结构的影响
4.5.1 大鼠盲肠细菌PCR扩增产物
4.5.2 DGGE图谱及相似性分析
4.5.3 DGGE图谱多样性及条带数分析
5 讨论
5.1 OEO对大鼠生长性能的影响
5.2 大鼠应激状态评价及OEO的干预作用
5.3 Diquat诱导氧化应激大鼠血清氧化还原状态的影响及OEO的干预作用
5.4 OEO对氧化应激大鼠肠道机械屏障功能的影响
5.5 OEO对氧化应激大鼠肠道菌群结构的影响
6 小结
结语
参考文献
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]银杏叶提取物对6-OHDA诱导PC12细胞氧化应激的影响[J]. 王杰,程言博,印晓星. 徐州医学院学报. 2010(04)
[2]肠神经系统概述[J]. 陆之辉,张小平,程爱国. 中国煤炭工业医学杂志. 2008(08)
博士论文
[1]仔猪氧化应激及硒的抗应激效应和机理的研究[D]. 袁施彬.四川农业大学 2007
硕士论文
[1]猪氧化应激模型构建以及茶多酚的抗应激效应的研究[D]. 徐静.四川农业大学 2009
本文编号：3113047
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略语表
文献综述
1 前言
2 氧化应激
2.1 氧化应激的概念及原因
2.2 机体ROS来源
2.4 机体的抗氧化防御系统
2.4.1 酶系抗氧化系统
2.4.2 非酶系抗氧化防御系统
3 应激对机体的影响
3.1 应激对胃肠道应激激素分泌的影响
3.2 应激对肠道菌群的影响
3.3 应激对肠道紧密连接的影响
4 缓解氧化应激的主要方式
4.1 自身调节
4.2 外源抗氧化物质的使用
5 研究氧化应激的模型
5.1 动物模型
5.1.1 LPS诱导的氧化应激模型
5.1.2 DSS诱导的氧化应激
5.1.3 Diquat诱导的氧化应激模型
5.2 细胞模型
2O2诱导的氧化应激模型"> 5.2.1 H2O2诱导的氧化应激模型
5.2.2 其它诱导氧化应激的细胞模型
6 植物提取物
6.1 植物提取物的研究概况
6.2 止痢草提取物
6.2.1 止痢草提取物的主要功能
6.2.2 止痢草提取物在畜牧生产中的作用
7 研究目的与意义
试验一 止痢草油体外抗菌抗氧化特性研究
1 前言
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.2 仪器设备
2.3 实验方法
2.3.1 VC、VE、OEO对小鼠肝匀浆脂质自氧化抑制效率的效果
2.3.2 止痢草油体外调节食糜氧化还原状态的研究
2.3.3 止痢草油体外抑菌效果的研究
2.4 数据分析
3 结果与分析
3.1 VC、VE、OEO对小鼠肝匀浆脂质自氧化抑制效率
3.2 不同浓度OEO对发酵液中ROS含量的影响
3.3 OEO对三种细菌生长曲线的影响
4 讨论
5 小结
试验二 止痢草油对氧化应激IPEC-J2细胞上皮紧密连接的干预作用
1 前言
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 细胞系
2.1.2 主要试剂
2.2 仪器设备
2.3 实验方法
2.3.1 IPEC-J2细胞复苏
2.3.2 细胞的常规培养
2.3.3 OEO对IPEC-J2增殖的影响
2O2损伤模型的建立"> 2.3.4 H2O2损伤模型的建立
2O2损伤IPEC-J2的干预作用"> 2.3.5 OEO对H2O2损伤IPEC-J2的干预作用
2.3.6 荧光定量和westernblot检测紧密连接蛋白基因和蛋白表达水平
2O2损伤IPEC-J2中紧密连接蛋白分的影响"> 2.3.7 免疫荧光检测OEO对H2O2损伤IPEC-J2中紧密连接蛋白分的影响
3 数据处理
4 结果与分析
4.1 OEO对IPEC-J2增殖的影响
2O2损伤模型的建立"> 4.2 H2O2损伤模型的建立
2O2损伤IPEC-J2的干预作用"> 4.3 OEO对H2O2损伤IPEC-J2的干预作用
2O2诱导下OEO对紧密连接蛋白基因和蛋白表达水平的影响"> 4.4 H2O2诱导下OEO对紧密连接蛋白基因和蛋白表达水平的影响
2O2诱导下OEO对紧密连接蛋白在IPEC-J2上分布的影响"> 4.5 H2O2诱导下OEO对紧密连接蛋白在IPEC-J2上分布的影响
5 讨论
6 小结
试验三 止痢草油对氧化应激大鼠的干预作用及机理研究
1 前言
2 材料与方法
2.1 试验动物
2.2 主要试剂
2.3 仪器设备
2.4 试验方法
2.4.1 动物分组与饲养
2.4.2 试验样品采集
2.4.3 血清指标的测定
2.4.4 空肠组织形态学分析
2.4.5 空肠HSP70及紧密连接相关蛋白mRNA表达水平检测
2.4.6 盲肠微生物区系分析
3 数据处理
4 结果与分析
4.1 OEO对大鼠生长性能的影响
4.2 大鼠应激状态评价及OEO的干预作用
4.3 Diquat诱导氧化应激大鼠血清氧化还原状态的影响及OEO的干预作用
4.4 OEO对氧化应激大鼠肠道机械屏障功能的影响
4.4.1 OEO对氧化应激大鼠肠道通透性影响
4.4.2 OEO对氧化应激大鼠肠道形态学影响
4.4.3 OEO对氧化应激大鼠肠道紧密连接蛋白mRNA表达量的影响
4.5 OEO对氧化应激大鼠肠道菌群结构的影响
4.5.1 大鼠盲肠细菌PCR扩增产物
4.5.2 DGGE图谱及相似性分析
4.5.3 DGGE图谱多样性及条带数分析
5 讨论
5.1 OEO对大鼠生长性能的影响
5.2 大鼠应激状态评价及OEO的干预作用
5.3 Diquat诱导氧化应激大鼠血清氧化还原状态的影响及OEO的干预作用
5.4 OEO对氧化应激大鼠肠道机械屏障功能的影响
5.5 OEO对氧化应激大鼠肠道菌群结构的影响
6 小结
结语
参考文献
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]银杏叶提取物对6-OHDA诱导PC12细胞氧化应激的影响[J]. 王杰,程言博,印晓星. 徐州医学院学报. 2010(04)
[2]肠神经系统概述[J]. 陆之辉,张小平,程爱国. 中国煤炭工业医学杂志. 2008(08)
博士论文
[1]仔猪氧化应激及硒的抗应激效应和机理的研究[D]. 袁施彬.四川农业大学 2007
硕士论文
[1]猪氧化应激模型构建以及茶多酚的抗应激效应的研究[D]. 徐静.四川农业大学 2009
本文编号：3113047
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