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鸭疫里默氏菌制苗菌株筛选及大罐发酵培养工艺条件优化

发布时间:2021-04-07 01:52
  本研究以从某鸭场分离的11株鸭疫里默氏菌为基础,通过一系列试验在优势血清型菌株中选择致病力强且免疫原性好的作为研究对象,通过对比试验确定一种增菌效果较好的培养基,再利用单因素试验和正交试验进行鸭疫里默氏菌液体培养基配方的研究,探讨何种培养基成份最适宜鸭疫里默氏菌的生长,并把优化结果应用到高密度发酵培养中,进行发酵工艺的优化,为下一步研制优质、高效的疫苗打好基础。其主要研究内容如下。1.鸭疫里默氏菌分离鉴定及制苗菌株的筛选北京某鸭场送检的鸭传染性浆膜炎疑似病例开展了鸭疫里默氏菌的分离鉴定工作,并进一步进行了其致病性试验和免疫原性分析。结果显示,成功分离到11株细菌,并可以分为三个血清型,以Ⅰ型和Ⅱ型感染为主;攻毒试验表明11株分离株对14日龄樱桃谷雏鸭致病性差异较大,从4/10到10/10不等;免疫原性试验结果表明分离株JX-2、JX-6和JX-10制成的疫苗攻毒保护率均可以达到80%以上。故应考虑使用含此3种血清型的菌株制成多价苗对该养殖场进行预防接种。2.鸭疫里默氏菌液体增菌培养基的筛选及优化本研究对改良马丁肉汤、改良酵母肉汤、 P-L肉汤和胰胨大豆胨肉汤四种培养基的增菌效果进行了对... 

【文章来源】:吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:80 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

鸭疫里默氏菌制苗菌株筛选及大罐发酵培养工艺条件优化


血清琼脂上的菌落形态

菌落形态,小杆菌,革兰氏染色,阴性


图 1.1 血清琼脂上的菌落形态 图 1.2 革兰氏染色为阴性小杆菌ig.1.1 The colony morphology on serum agar Fig.1.2 Gram negative bacillus smal3 生理生化特性结果表明11株菌对糖的分解活性都不强,几乎对 10 种糖都不发酵,个别的发种或两种糖,这种对糖发酵的惰性可以初步诊断该 11 株分离菌为鸭疫里默氏菌株分离菌生理生化鉴定结果见表1.1。表 1.1 生理生化鉴定结果Table1. 1 The results of physiological and biochemical identification萄糖葡糖蔗 糖果 乳糖乳糖半 芽糖麦拉伯糖阿露醇 甘梨山醇水杨苷靛基质VP试验素尿酶硝酸盐化氢 硫甲基红粉淀 胶明----+-+-+------------------+------------------------------------------------------------+------------------------------+-+++-+++++-++

序列,鸭疫,序列,序列测定


图 1.3 PCR 扩增结果e M: DL 2000 Marker;Lane 1-3: 鸭疫 J泳结果;Lane 4-6: 鸭疫 JX-9 株电泳结果菌 16S rRNA 序列测序结果NA 序列测定,得到序列结果如下: 序列:acctctagcttctaaagcagctactacagatgcagctctttctctatatgaccaactactaagaaagtacctccgttagaagacttaatcaatagatgctttattaaagttaaagaatataccctttaatgctcctgtttttgtattctggaagacctggaacattaggacacttatcatctttatcgttattttcagctggtcctgctacatcaacacaagcatcgtctttatcattgttttctactggtcctgctacttctggacagttatcatctttatcattcaggtaaacctggtgtttctgaacataaatcgtctttatctaacaatgaagctgacgcttgccaaaagttagccaatctagacttatct


本文编号:3122570

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