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猪肺炎支原体的分离鉴定及其主要抗原蛋白基因的克隆与序列分析

发布时间:2021-04-14 03:47
  猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)是猪支原体肺炎(Mycoplasmalpneumonia of swine, MPS)的主要病原体,也是猪呼吸道病综合征(Porcine RespiratoryDisease Complex,PRDC)的主要原发性病原之一。MPS广泛存在于世界各地,主要危害是引起猪咳嗽、喘气、生长受阻和饲料转化率大幅下降,严重影响养猪业的经济效益。为了进一步了解Mhp在广东的流行及主要抗原蛋白的变异情况,本研究从屠宰猪肺组织分离鉴定了一株Mhp,并观察其培养特性、致病性、抗菌药物敏感性。同时克隆分离株主要抗原蛋白基因P46、P65蛋白C末端和P97蛋白R1R2区编码序列,与国际标准株核苷酸序列和推导的氨基酸序列进行同源性比较,分析P46、P65和P97的抗原指数。研究结果报告如下。(1)本研究从100多份屠宰肺组织样品中分离到一株疑似Mhp,通过菌株的培养特性、形态观察、生化试验、血清学鉴定和P46基因序列分析证实该分离株为Mhp,命名为GDZJ01。(2)将分离菌株GDZJ01分别接种到牛心汤培养基、改良KM2培养基和改良Hay... 

【文章来源】:广东海洋大学广东省

【文章页数】:62 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

猪肺炎支原体的分离鉴定及其主要抗原蛋白基因的克隆与序列分析


图2-1分离菌的菌落形态(A)(×400)

菌体形态,瑞氏染色,菌体形态,猪肺炎支原体


图 2-2 瑞氏染色的菌体形态(B)(×1000)Fig.2-2 Morphology of the isolate stained by Wight’s dye(×1000)验与血清学鉴定对毛地黄皂苷敏感,可以发酵葡萄糖,水解尿素、七叶苷和甘,TTC 还原试验、膜和斑形成试验均为阴性,与猪肺炎支原体性一致;血清生长抑制试验阳性,提示猪肺炎支原体抗血清能24 mm。上述结果证实,所分离菌株为猪肺炎支原体,命名定 PCR 反应的产物通过 1%琼脂糖凝胶电泳后,在凝胶成像系80bp、1200bp 和 290bp 大小的明亮特异条带,均与预期片段示。

菌体形态,生长抑制试验,猪肺炎支原体,瑞氏染色


图 2-2 瑞氏染色的菌体形态(B)(×1000)2 Morphology of the isolate stained by Wight’s d学鉴定皂苷敏感,可以发酵葡萄糖,水解尿素、七原试验、膜和斑形成试验均为阴性,与猪肺清生长抑制试验阳性,提示猪肺炎支原体上述结果证实,所分离菌株为猪肺炎支原应的产物通过 1%琼脂糖凝胶电泳后,在凝200bp 和 290bp 大小的明亮特异条带,均与

【参考文献】:
期刊论文
[1]猪肺炎支原体HNMhy1株免疫原性基因的鉴定与分析[J]. 徐引弟,张青娴,王治方,焦文强,李海利,朱文豪,王克领.  河南农业科学. 2020(09)



本文编号:3136595

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