禽流感病毒M2蛋白相互作用宿主蛋白的筛选及初步的功能学研究

发布时间：2021-04-16 11:54

　　禽流感病毒（Avian Influenza Virus,AIV）基因组至少编码15种病毒蛋白,其中离子通道AM2/M2蛋白是一种多功能病毒蛋白,可以促进病毒样颗粒的形成、调节高尔基体pH值、诱导机体产生抗体,还可影响细胞的自噬功能和激活NLRP3炎性小体等。宿主细胞系统是高度复杂和精密的网络系统,由大量的细胞成分之间的相互作用而形成,病毒劫持这些宿主细胞系统成分,可以导致新的细胞网络系统重新构建来满足它们的复制需求。分析AM2蛋白与宿主蛋白之间的相互作用有助于阐明AIV感染过程中AM2蛋白的作用机制。本文以AM2蛋白为研究对象,通过酵母双杂交筛选获得与之相互作用的宿主蛋白,并利用多种蛋白质相互作用研究技术验证二者的相互作用以及对病毒复制的影响。将不具有毒性与自激活作用的pGBKT7-AM2诱饵质粒与人淋巴细胞cDNA文库进行融合杂交,经过多次筛选与酵母回转实验进一步验证后,确定了两种宿主蛋白与AM2蛋白在酵母细胞中存在相互作用。对初步筛选获得的宿主蛋白基因测序分析后发现,两个蛋白基因分别编码细胞色素C氧化酶亚单位II（COXII）和G蛋白β亚单位2（Gβ2）。异三聚体G蛋白是一类具有G... 

【文章来源】：吉林农业大学吉林省

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

2离子通道蛋白在流感病毒生命周期中的功能（LawrenceH.Pinto.etal.2009）

图 1.1 假定阳性克隆检测Fig.1.1 The detection of assume positive clone1-3，6-8 为假定阳性克隆；4，5，9，10 为阴性克隆d: The assume positive clone is 1-3 and 6-8; The negative c

图 1.2 猎物质粒的酶切鉴定2 Identification of prey clones by enzyme 2000 DNA Marker；1～6 假定阳性克隆DL2000 DNA Marker; 1～6 The positive clone n

【参考文献】：
期刊论文
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[3]G蛋白偶联受体与G蛋白相互作用的最新研究进展[J]. 姜云璐,龚磊,白波,陈京.  生命科学. 2014(02)
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本文编号：3141378