鸽蛋LDL对冷休克和冻融猪精子的HSP70蛋白及凋亡相关基因表达的影响

发布时间：2021-04-24 02:49

　　猪精子非常容易受到冷休克的伤害,并且对过氧化物损伤非常敏感,其原因是由于猪精子细胞膜上的磷脂质含有大量不饱和脂肪酸,并且精液自身存在相对较低的抗氧化能力的结果,本研究主要目的是评价猪精液在低温储存期间,在猪精液中添加不同浓度的鸽蛋LDL,冷冻解冻后采用SDS-PAGE、Western Blot、PCR扩增和DNA电泳等试验方法研究其对不同处理组猪精子活力的特性：平均曲线运动速度（VCL）、平均直线运动速度（VSL）、平均路径运动速度（VAP）、精子顶体完整性、热应激蛋白（HSP70）表达、抗凋亡基因（Bcl-21和Bcl-xl）以及促凋亡基因Bak表达的影响,得到以下结果：1、无论是冷休克还是快速冷冻解冻后,添加LDL组的精子活力特性：平均曲线运动速度（VCL）、平均直线运动速度（VSL）、平均路径运动速度（VAP）均高于未添加组,9%LDL冷休克组、9%LDL（-196℃）冻融精子组效果最好。2、用考马斯亮蓝染色法评价冷休克和冻融猪精子顶体完整性,结果显示：9%LDL冷休克组、9%LDL（-196℃）冻融精子组顶体完整性分别好于其他组。3、对不同处理组样本进行10%SDS-PAGE和... 

【文章来源】：延边大学吉林省 211工程院校

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 猪精液冷冻保存研究进展、技术意义及研究原理
    1.2 影响因素-猪精子细胞的特殊性
    1.3 HSP70研究进展及意义
    1.4 HSP70的家族特征及功能
        1.4.1 HSP70的特征
        1.4.2 HSP70家族的功能
    1.5 相关凋亡基因表达的研究
        1.5.1 细胞凋亡定义及生物学意义
        1.5.2 促凋亡基因Bax参与凋亡的机制与Bcl-2之间关系
        1.5.3 影响Bax参与细胞凋亡的因素
        1.5.4 Bak基因功能与机制以及影响参与细胞凋亡因素
        1.5.5 Bcl-21和Bcl-xl基因相关研究
    1.6 LDL冷冻保护作用
    1.7 精子状态的评定
    1.8 总灰度测量
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 实验药品、试剂
        2.1.3 主要仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 主要药品配置
        2.2.2 实验内容
    2.3 数据分析
第三章 结果与分析
    3.1 不同处理对猪精子生物学性状的影响
    3.2 顶体完整性评估
        3.2.1 冻融猪精子顶体完整性评估
        3.2.2 冷休克猪精子顶体完整性评估
    3.3 不同处理对冻融后猪精子HSP70蛋白SDS-PAGE凝胶电泳分析
    3.4 不同处理对HSP70蛋白表达量影响的Western blot分析
    3.5 抗凋亡基因Bcl-xl在不同处理组中PCR扩增结果
    3.6 抗凋亡基因Bcl-21在不同处理组中PCR扩增结果
    3.7 促凋亡基因Bak在不同处理组中PCR扩增结果
第四章 讨论
    4.1 温度和鸽蛋LDL对猪精子生物学性状的影响
    4.2 温度和鸽蛋LDL对猪精子顶体完整性的影响
    4.3 温度和鸽蛋LDL对HSP70表达的影响
    4.4 温度和鸽蛋LDL对猪精子抗凋亡基因Bcl-21、Bcl-x1凋亡基因Bak基因表达的影响
第五章 结论
作者简介
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]5种禽类卵黄低密度脂蛋白对猪精子冷冻效果的影响[J]. 吕瑞凯,胡建宏,王红,程亮,江中良,李青旺,姚俊,张鹏飞.  西北农业学报. 2011(09)
[2]热应激对反刍动物HSP70表达影响的研究进展[J]. 许啸,李燕,齐智利.  中国奶牛. 2011(16)
[3]抗凋亡因子Bcl-2/Bcl-XL蛋白小分子抑制剂研究进展[J]. 王汝冰,周珊珊,周文,李绍顺.  中国药物化学杂志. 2011(02)
[4]不同精液解冻液和解冻速率对猪颗粒冻精品质的影响[J]. 潘红梅,麻常胜,刘文,王可甜,陈主平,王金勇.  畜牧与兽医. 2010(09)
[5]羟基喜树碱对人白血病K562细胞增殖和凋亡的影响[J]. 邵淑丽,吴敏,武广慧.  安徽农业科学. 2010(09)
[6]Bcl-2家族和Bcl-xl对细胞凋亡调控的研究进展[J]. 孙怀宇,王军,王鹏.  中国煤炭工业医学杂志. 2009(04)
[7]海带多糖在诱导肿瘤细胞凋亡机制方面的研究[J]. 王琪琳,桑青,曲爱琴.  安徽农业科学. 2009(09)
[8]热休克蛋白70（HSP70）研究进展[J]. 程维杰,李秋玲,孙延鸣,王洪梅,李建斌,仲跻峰.  畜牧兽医杂志. 2008(06)
[9]哺乳动物HSP70及其与精子发生相关关系研究进展[J]. 李俊杰,桑润滋,张国磊,赵驻军,田树军.  中国畜牧杂志. 2008(19)
[10]凋亡抑制基因Bcl-xL的研究进展[J]. 郭文娟,王爱英.  世界华人消化杂志. 2008(25)

博士论文
[1]LDL和多糖在猪精液冷冻保存中的作用研究[D]. 江中良.西北农林科技大学 2010
[2]猪精液冷冻保存研究[D]. 胡建宏.西北农林科技大学 2006

硕士论文
[1]猪精液冷冻保存的研究[D]. 周鑫.内蒙古大学 2012
[2]松滋市养猪业现状调查与发展战略研究[D]. 陈双胜.长江大学 2012
[3]热应激对鼠精液品质的影响及其与HSP70相关性分析[D]. 杨柳.吉林大学 2009
[4]猪精液冷冻保存技术研究[D]. 张树山.西北农林科技大学 2006



本文编号：3156528