芒硝对驴皮成纤维细胞增殖、凋亡的影响

发布时间：2021-04-26 08:48

　　为研究不同浓度的芒硝对体外培养的驴皮成纤维细胞增殖、凋亡的影响,本试验采用组织块法体外培养驴皮成纤维细胞,并用HE、Masson染色鉴定;再添加高（2 000、1 500μg/mL）、中（1 000、500、250μg/mL）和低浓度（100、50、10μg/mL）芒硝体外培养驴皮成纤维细胞,用MTT和Caspase-3法分别检测成纤维细胞增殖率和凋亡率;最后用实时荧光定量PCR、ELISA法检测不同浓度（1 500、250、10μg/mL）芒硝培养液中影响驴皮成纤维细胞胶原蛋白合成的相关基因表达量及蛋白浓度。结果显示,培养5 d时,驴皮成纤维细胞开始从组织块边缘爬出,25 d后长满培养皿;HE染色呈典型的梭形,驴皮成纤维细胞中胶原纤维经Masson染色呈蓝色。中浓度芒硝培养液组成纤维细胞的增殖率显著高于高、低浓度组（P<0.05）,相应地,中浓度组的凋亡因子Caspase-3活性显著低于其他两组（P<0.05）。相比于24 h,芒硝作用于成纤维细胞48 h能显著提高胶原蛋白合成相关基因的表达量（P<0.05）,250μg/mL浓度的效果最佳。综合上述结果,组织块培养... 

【文章来源】：中国畜牧兽医. 2020,47(07)北大核心

【文章页数】：12 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 试验动物
    1.2 主要试剂及仪器
    1.3 细胞培养
    1.4 细胞鉴定
        1.4.1 细胞HE染色
        1.4.2 细胞Masson染色
    1.5 MTT法检测不同浓度芒硝对成纤维细胞的影响
    1.6 Caspase-3法检测不同浓度芒硝对成纤维细胞的影响
    1.7 实时荧光定量PCR法检测各基因mRNA的表达量
    1.8 ELISA法检测各蛋白浓度
    1.9 数据分析
2 结 果
    2.1 细胞培养与鉴定
        2.1.1 组织块法培养成纤维细胞
        2.1.2 成纤维细胞HE染色鉴定
        2.1.3 成纤维细胞Masson染色鉴定
    2.2 芒硝对成纤维细胞增殖、凋亡的影响
        2.2.1 成纤维细胞增殖率
        2.2.2 Caspase-3蛋白活性
    2.3 芒硝对成纤维细胞合成胶原蛋白相关基因表达的影响
        2.3.1 TGF-β1、Smad3及Smad7基因
        2.3.2 COL1A1、COL1A2及COL3A1基因
    2.4 芒硝对成纤维细胞TGF-β1、COL1A1、COL1A2蛋白浓度的影响
3 讨 论
4 结 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]驴皮成纤维细胞的体外培养研究[J]. 王艳萍,高帅,刘迥,曾维斌.  中国畜牧兽医. 2017(08)
[2]芒硝外敷治疗腹膜透析患者皮下隧道感染的护理[J]. 王芸,王赟.  中华护理杂志. 2013(11)
[3]SiRNA-Smad3沉默人瘢痕疙瘩成纤维细胞中Smad3对纤维连接蛋白及Ⅰ型胶原表达的影响[J]. 刘波,果磊.  重庆医科大学学报. 2010(04)
[4]人心房成纤维细胞体外组织块贴壁培养与鉴定[J]. 张建成,黄宇坚.  莆田学院学报. 2010(02)
[5]中药芒硝外敷对腹部手术后患者胃肠功能恢复的影响[J]. 覃梅梅,盘雪莹.  护理学报. 2009(15)
[6]机械破碎法分离奶牛乳腺上皮细胞的体外培养研究[J]. 林桂娟,王恬,陈才勇.  畜牧与兽医. 2004(07)
[7]牛乳腺上皮细胞的分离培养[J]. 李震,王英,刘惠莉,张德福.  上海农业学报. 2000(03)

硕士论文
[1]芒硝外用在创面愈合中的作用及机制的研究[D]. 刘飞.西南医科大学 2018
[2]芒硝溶液对于大鼠机械性皮损作用的实验研究[D]. 刘莎.长春中医药大学 2015



本文编号：3161121