重组绵羊甘露聚糖结合凝集素（MBL）的制备及其对绵羊抗病效果的分析
发布时间：2021-04-29 22:53
甘露聚糖结合凝集素（mannan-binding lectin, MBL）又称作甘露糖结合凝集素（mannose-bindinglectin, MBL），在有机体天然免疫系统起着至关重要的作用，通过不依赖抗体的补体激活作用，该蛋白将有机体的补体系统启动，继而发挥免疫调理的作用，因此，它在抵抗病原体感染中具有重要作用。研究发现MBL生物学功能的实现有赖于其完整的蛋白质结构，MBL结构基因突变影响了蛋白多聚体的功能性和稳定性，使得MBL血清浓度明显降低，机体的免疫防御和监视能力削弱，导致机体对多种病原的易感。此外，由于绵羊支原体肺炎难于控制和消灭，并且在新疆较为严重。因此本研究以MBL和绵羊肺炎支原体（Mycoplasma Ovipneumoniae，MO）为研究对象进行了如下实验，以探究MBL与绵羊支原体肺炎及其他传染性疾病的相关性，为今后研发治疗绵羊支原体肺炎的药物提供了理论依据，研究结果如下：（1） ELISA检测中国美利奴羊感染绵羊肺炎支原体的免疫应答变化：选择3只羔羊作为对照组，13只为实验组，在相同饲养条件下人工感染绵羊肺炎支原体，采集攻毒前1d、攻毒后1d、7d、14d、21...
【文章来源】：石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
目录
主要符号表
引言
第一章 文献综述
1.1 甘露聚糖结合凝集素的研究
1.1.1 甘露聚糖结合凝集素的结构
1.1.2 甘露聚糖结合凝集素的生物功能
1.2 重组蛋白药物的研究
1.2.1 重组干扰素的研究
1.2.2 重组蓝藻抗病毒蛋白-N 的研究
1.2.3 重组白介素-2 的研究
1.2.4 重组蛋白开发新技术
1.3 甘露糖结合凝集素与病原相关性研究
1.3.1 MBL 与肿瘤关系的研究
1.3.2 MBL 与自身免疫性疾病
1.3.3 MBL 与绵羊支原体肺炎的研究
1.4 研究目的及意义
第二章 不同个体感染绵羊肺炎支原体后免疫因子变化规律
2.1 材料与方法
2.1.1 试验动物
2.1.2 主要试剂和仪器
2.1.3 试验方法
2.2 结果
2.2.1 血清中 TNF-α、IFN-γ、补体 C1、C3 检测结果
2.3 讨论
2.4 结论
第三章 人工感染绵羊肺炎支原体后绵羊甘露糖结合凝集素变化及组织病理学分析
3.1 材料与方法
3.1.1 试验动物
3.1.2 主要试剂和仪器
3.1.3 试验方法
3.2 结果
3.2.1 ELISA 标准曲线
3.2.2 攻毒效果及临床实验观察结果
3.2.3 组织病理学评分结果
3.2.4 MBL 与 MO 关系的验证
3.3 讨论
3.4 结论
第四章 重组、天然绵羊 MBL 的制备
4.1 材料与方法
4.1.1 实验材料
4.1.2 实验方法
4.2 实验结果
4.2.1 绵羊血清 MBL 的提取
4.2.2 重组表达载体 pPIC9K-MBL 的双酶切鉴定
4.2.3 重组菌株 GS115/pPIC9K-MBL 的鉴定
4.2.4 重组菌株 GS115/pPIC9K-MBL 表达产物的 SDS-PAGE 分析
4.3 讨论
4.4 结论
第五章 MBL 在细胞、个体中对免疫因子水平的影响
5.1 材料与方法
5.1.1 试验材料
5.1.2 试验方法
5.2 实验结果
5.2.1 感染 MO 的 16HBE 生长情况
5.2.2 MBL 对 16HBE 细胞分泌 TNF-α、IL-2 的影响
5.2.3 MBL 对个体中 TNF-α、IL-2 水平的影响
5.3 讨论
5.4 结论
全文总结
参考文献
致谢
附录
作者简介
导师评阅表
【参考文献】：
期刊论文
[1]绵羊肺炎支原体的分离鉴定[J]. 张轩,赵萍,贺英,高鹏程,储岳峰,郑莹莹,逯忠新. 动物医学进展. 2013(06)
[2]细胞培养技术的应用研究进展[J]. 占今舜,邢月腾,张彬. 饲料博览. 2013(01)
[3]甘露聚糖结合凝集素与疾病相关性研究进展[J]. 田群. 现代农业科技. 2012(24)
[4]绵羊支原体肺炎中不同甘露(聚)糖结合凝集素基因型对肺组织病变的影响[J]. 张慧,赵宗胜,赵凤,余鹏. 中国预防兽医学报. 2012(04)
[5]甘露聚糖结合凝集素与脓毒症研究进展[J]. 张宇,曾其毅. 实用儿科临床杂志. 2011(12)
[6]山羊支原体山羊肺炎亚种湖北株的鉴定及其外膜蛋白的免疫原性研究[J]. 赵萍,郭晗,贺英,高鹏程,张念章,逯忠新. 畜牧兽医学报. 2011(04)
[7]绵羊痘病的诊治[J]. 韩杰. 中国畜禽种业. 2011(04)
[8]热毒宁对RSV感染人支气管上皮细胞分泌TSLP的影响[J]. 蓝丹,檀卫平,陈环,吴葆菁,麦贤弟,黄花荣. 中山大学学报(医学科学版). 2011(02)
[9]蓝藻抗病毒蛋白-N基因的克隆、表达、纯化及活性鉴定[J]. 陈伟,韩波,钱垂文,刘秋英,熊盛. 生物工程学报. 2010(04)
[10]重组白细胞介素2对固始鸡空肠黏膜免疫增强作用的研究[J]. 赵珊珊,张怀,徐亚平,李超,肖传斌. 中国畜牧兽医. 2010(03)
博士论文
[1]绵羊甘露糖结合凝集素基因（MBL）与支原体肺炎的相关性研究[D]. 赵凤.石河子大学 2011
硕士论文
[1]牛甘露聚糖结合凝集素遗传特征的研究[D]. 李明涛.哈尔滨师范大学 2013
[2]绵羊肺炎支原体的分离鉴定及全基因组序列的测定和分析[D]. 郝瑞霞.内蒙古农业大学 2012
[3]辽西地区绵羊布鲁氏菌病流行病学调查研究[D]. 于国庆.中国农业科学院 2010
本文编号：3168329
【文章来源】：石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
目录
主要符号表
引言
第一章 文献综述
1.1 甘露聚糖结合凝集素的研究
1.1.1 甘露聚糖结合凝集素的结构
1.1.2 甘露聚糖结合凝集素的生物功能
1.2 重组蛋白药物的研究
1.2.1 重组干扰素的研究
1.2.2 重组蓝藻抗病毒蛋白-N 的研究
1.2.3 重组白介素-2 的研究
1.2.4 重组蛋白开发新技术
1.3 甘露糖结合凝集素与病原相关性研究
1.3.1 MBL 与肿瘤关系的研究
1.3.2 MBL 与自身免疫性疾病
1.3.3 MBL 与绵羊支原体肺炎的研究
1.4 研究目的及意义
第二章 不同个体感染绵羊肺炎支原体后免疫因子变化规律
2.1 材料与方法
2.1.1 试验动物
2.1.2 主要试剂和仪器
2.1.3 试验方法
2.2 结果
2.2.1 血清中 TNF-α、IFN-γ、补体 C1、C3 检测结果
2.3 讨论
2.4 结论
第三章 人工感染绵羊肺炎支原体后绵羊甘露糖结合凝集素变化及组织病理学分析
3.1 材料与方法
3.1.1 试验动物
3.1.2 主要试剂和仪器
3.1.3 试验方法
3.2 结果
3.2.1 ELISA 标准曲线
3.2.2 攻毒效果及临床实验观察结果
3.2.3 组织病理学评分结果
3.2.4 MBL 与 MO 关系的验证
3.3 讨论
3.4 结论
第四章 重组、天然绵羊 MBL 的制备
4.1 材料与方法
4.1.1 实验材料
4.1.2 实验方法
4.2 实验结果
4.2.1 绵羊血清 MBL 的提取
4.2.2 重组表达载体 pPIC9K-MBL 的双酶切鉴定
4.2.3 重组菌株 GS115/pPIC9K-MBL 的鉴定
4.2.4 重组菌株 GS115/pPIC9K-MBL 表达产物的 SDS-PAGE 分析
4.3 讨论
4.4 结论
第五章 MBL 在细胞、个体中对免疫因子水平的影响
5.1 材料与方法
5.1.1 试验材料
5.1.2 试验方法
5.2 实验结果
5.2.1 感染 MO 的 16HBE 生长情况
5.2.2 MBL 对 16HBE 细胞分泌 TNF-α、IL-2 的影响
5.2.3 MBL 对个体中 TNF-α、IL-2 水平的影响
5.3 讨论
5.4 结论
全文总结
参考文献
致谢
附录
作者简介
导师评阅表
【参考文献】：
期刊论文
[1]绵羊肺炎支原体的分离鉴定[J]. 张轩,赵萍,贺英,高鹏程,储岳峰,郑莹莹,逯忠新. 动物医学进展. 2013(06)
[2]细胞培养技术的应用研究进展[J]. 占今舜,邢月腾,张彬. 饲料博览. 2013(01)
[3]甘露聚糖结合凝集素与疾病相关性研究进展[J]. 田群. 现代农业科技. 2012(24)
[4]绵羊支原体肺炎中不同甘露(聚)糖结合凝集素基因型对肺组织病变的影响[J]. 张慧,赵宗胜,赵凤,余鹏. 中国预防兽医学报. 2012(04)
[5]甘露聚糖结合凝集素与脓毒症研究进展[J]. 张宇,曾其毅. 实用儿科临床杂志. 2011(12)
[6]山羊支原体山羊肺炎亚种湖北株的鉴定及其外膜蛋白的免疫原性研究[J]. 赵萍,郭晗,贺英,高鹏程,张念章,逯忠新. 畜牧兽医学报. 2011(04)
[7]绵羊痘病的诊治[J]. 韩杰. 中国畜禽种业. 2011(04)
[8]热毒宁对RSV感染人支气管上皮细胞分泌TSLP的影响[J]. 蓝丹,檀卫平,陈环,吴葆菁,麦贤弟,黄花荣. 中山大学学报(医学科学版). 2011(02)
[9]蓝藻抗病毒蛋白-N基因的克隆、表达、纯化及活性鉴定[J]. 陈伟,韩波,钱垂文,刘秋英,熊盛. 生物工程学报. 2010(04)
[10]重组白细胞介素2对固始鸡空肠黏膜免疫增强作用的研究[J]. 赵珊珊,张怀,徐亚平,李超,肖传斌. 中国畜牧兽医. 2010(03)
博士论文
[1]绵羊甘露糖结合凝集素基因（MBL）与支原体肺炎的相关性研究[D]. 赵凤.石河子大学 2011
硕士论文
[1]牛甘露聚糖结合凝集素遗传特征的研究[D]. 李明涛.哈尔滨师范大学 2013
[2]绵羊肺炎支原体的分离鉴定及全基因组序列的测定和分析[D]. 郝瑞霞.内蒙古农业大学 2012
[3]辽西地区绵羊布鲁氏菌病流行病学调查研究[D]. 于国庆.中国农业科学院 2010
本文编号：3168329
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