miR27b通过靶向PPARγ调控脂肪在皮下脂肪细胞与肌内脂肪细胞中的差异沉积

发布时间：2021-05-06 02:30

　　肌内脂肪含量是影响猪肉品质的重要因素。而育种过程中对高瘦肉率的长期选择,导致了肌内脂肪含量以及猪肉品质的下降。因此,提高肌内脂肪含量,同时不影响其它部位脂肪的沉积,特别是皮下脂肪,成为猪育种的一个重要目标。由于不同部位的脂肪在脂肪代谢与脂肪细胞分化能力上存在着差异,这为寻找调控脂肪在不同组织差异沉积的分子机理提供了可能性。为了解肌内脂肪与皮下脂肪差异沉积的机制,我们比较了源于皮下脂肪与肌内脂肪的前体脂肪细胞的分化能力,并对脂肪分化与沉积起关键调控作用的PPARy基因在两种细胞中的表达量进行了检测。随后预测了靶向PPARy的miRNA,并对其在两种细胞中的表达量进行了比较,最后通过双荧光报告系统对差异表达的miRNA进行靶向性验证。主要实验结果如下：1、在体外环境下,源于肌内脂肪组织的前体脂肪细胞在分化能力上强于皮下脂肪组织来源的前体脂肪细胞。DMI诱导分化9天后,肌内前体脂肪细胞脂质积聚水平显著高于皮下脂肪细胞（P<0.05）。对两种脂肪细胞中脂质代谢相关基因进行比较,结果表明,脂肪合成关键基因乙酰-CoA羧化酶（Acetyl-CoA Carboxylase, ACC）、脂肪酸合... 

【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略词
第一篇 文献综述
    第一章 肌内脂肪的研究进展
        1 肌内脂肪
            1.1 肌内脂肪的成分
            1.2 肌内脂肪的分布与发生发展
            1.3 肌内脂肪的沉积
        2 影响肌内脂肪的基因调控
            2.1 影响脂肪沉寂的候选基因
            2.2 对肌内脂肪沉积相关的信号转导通路的研究
        3 肌内脂肪与其他部位脂肪的差异
    第二章 miRNA与脂肪沉积的研究进展
        1 miRNA概述
        2 miRNA与siRNA的区别
        3 miRNA与脂肪沉积的调控
            3.1 miRNA与脂肪分化
            3.2 miRNA与脂肪能量代谢
            3.3 miRNA与肝脏脂类代谢
            3.4 miRNA与胰岛素分泌
        4 miRNA与脂肪分布
第二篇 实验部分
    第三章 皮下与肌内脂肪细胞分化能力及PPARγ表达水平的差异研究
        1 实验仪器与试剂
            1.1 主要仪器
            1.2 主要试剂
        2 实验方法
            2.1 实验动物及样品采集
            2.2 前体脂肪细胞复苏
            2.3 细胞的传代培养与冻存
            2.4 前体脂肪细胞诱导分化
            2.5 油红O染色
            2.6 RNA提取
        3 实验结果
            3.1 皮下脂肪前体细胞与肌内脂肪前体细胞分化能力的比较
            3.2 PPAR7在成熟皮下脂肪细胞与肌内脂肪细胞中表达的差异
        4 讨论
    第四章 靶向PPAR7的miRNA鉴定及其在皮下与肌内脂肪细胞中的差异表达
        1 实验仪器与试剂
            1.1 主要仪器
            1.2 主要试剂
        2 实验方法
            2.1 miRNA预测
            2.2 miRNA的RT-qPCR
            2.3 质粒构建
            2.4 miRNA靶向性验证
            2.5 miRNA与PPARγ3'-UTR的二级结构预测
            2.6 数据统计
        3 实验结果
            3.1 预测的靶向PPARγ的miRNA
            3.2 候选miRNA的筛选
            3.3 候选miRNA的靶向性验证
            3.4 RNA二级结构分析
        4 讨论
参考文献
全文结论
创新点
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：3171061