减毒猪霍乱沙门氏菌C500抗冻保护剂的优化研究

发布时间：2021-05-06 03:00

　　本试验旨在优化减毒猪霍乱沙门氏菌C500抗冻保护剂,提高工程菌C500的存活率。通过单因素试验考察了4种类型的抗冻保护剂（渗透性、半渗透性、非渗透性保护剂及抗氧化剂）对工程菌C500冷冻保存前后存活率的影响,各保护剂设置不同的浓度并与工程菌C500等体积混合,于液氮中保存2周后进行平板计数以计算其成活率,初步筛选出最有利于菌种保存的渗透性保护剂、半渗透性保护剂、非渗透性保护剂和抗氧化剂及其最佳保护浓度,最后将筛选出的4种保护剂进行四因素三水平的正交试验以得出最佳的组合配方。单因素试验的结果表明,渗透性保护剂中乙二醇、半渗透性保护剂中蔗糖、非渗透性保护剂中聚乙烯吡络烷酮（PVP）及抗氧化剂中甘氨酸对工程菌C500的保护作用最佳,最佳保存浓度分别为15%、6%、6%和0.25%;正交试验结果表明,各因素均对工程菌C500的存活率有显著影响,筛选出的最佳组合配方为17%乙二醇、9.0%蔗糖、6.0%PVP、0.35%甘氨酸,最佳组合在-80℃的保存效果最佳,此温度下保存6周存活率可达88.34%,其次为液氮组、-20℃组及4℃组。这表明本试验得到的保护剂配方极大地提高了工程菌C500的抗冻能... 

【文章来源】：中国畜牧兽医. 2020,47(11)北大核心

【文章页数】：9 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 菌种
        1.1.2 主要试剂
    1.2 方法
        1.2.1 工程菌的制备
        1.2.2 单一性保护剂的配制
        1.2.3 菌种的冷冻保存
        1.2.4 平板计数
        1.2.5 正交设计
        1.2.6 验证试验
2 结 果
    2.1 渗透性保护剂对工程菌C500存活率的影响
    2.2 半渗透性保护剂对工程菌C500存活率的影响
    2.3 非渗透性保护剂对工程菌C500存活率的影响
    2.4 抗氧化剂保护剂对工程菌C500存活率的影响
    2.5 正交试验结果
    2.6 验证试验
3 讨 论
4 结 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]肝癌细胞Hep-G2冻结过程中冻干保护剂热物性和效果研究[J]. 李维杰,宋萍,刘宝林.  生物医学工程学杂志. 2019(05)
[2]药用辅料丙三醇气管内雾化给药局部刺激性和细胞毒性研究[J]. 冯红敏,盛云华,胡玥,王宇,孙杰,唐黎明.  中国药学杂志. 2019(01)
[3]草鱼肠道拮抗性芽孢杆菌的冻干保护剂优化研究[J]. 张涛,闫有利.  水产科学. 2018(02)
[4]ChIFN酿酒酵母工程菌冻干保护剂的优化[J]. 张冬生,刘宗,宋莉,赵德刚.  山地农业生物学报. 2018(01)
[5]响应面法对纳豆菌冷冻保护剂的优化研究[J]. 贺莹,冯彩平,杨丹.  食品工业. 2018(01)
[6]不同保护剂对藏羊冷冻精液品质影响的研究[J]. 赵莉渲,马元梅,张晋青,赵静,常永梅,扈添琴,袁海洲.  青海畜牧兽医杂志. 2017(01)
[7]降胆固醇植物乳杆菌I4菌冻干保护剂的响应面优化研究[J]. 朱奇奇,张驰翔,王周,焦士蓉.  食品科技. 2016(11)
[8]-80℃超低温冰箱冷冻保存猪精液的初步研究[J]. 陈明明,王开林,杨林昆,李林辉,王宝英,王福兄,郝志明.  黑龙江动物繁殖. 2016(05)
[9]猪瘟疫苗冻干保护剂的筛选及免疫效果评价[J]. 李星,陶洁,殷秀辰,张清真,熊年年,刘惠莉.  上海农业学报. 2016(02)
[10]不同浓度乙二醇和甘油对犬精液冷冻效果的影响[J]. 高雅,罗桂河,李卫东,李复煌,孟丹娜,康蕊,秦秀蕊,倪和民.  中国农学通报. 2010(08)

博士论文
[1]猪霍乱沙门氏菌C500株crpˉ、asdˉ缺失株平衡致死系统的构建及应用[D]. 徐引弟.华中农业大学 2006

硕士论文
[1]生长抑素DNA疫苗C500（pVGS/2SS-asd）对于育肥猪的生产性试验研究[D]. 周子超.华中农业大学 2019
[2]甘氨酸/褪黑素对水貂GV期卵母细胞冷冻保存的影响[D]. 曹俊国.中国农业科学院 2019
[3]非抗性筛选KISS1基因疫苗构建及其免疫效果的研究[D]. 赵家宇.华中农业大学 2017
[4]猪A病减毒活疫苗冻干工艺过程优化[D]. 李键.上海交通大学 2017



本文编号：3171104