粘菌素耐药基因（mcr-1-mcr-8）的流行病学调查及mcr-1传播机制的研究

发布时间：2021-05-08 19:02

　　粘菌素是一种环状多肽类抗菌素,主要用于治疗畜禽胃肠道感染,在我国、欧洲等世界多个国家也长期作为促生长剂添加于饲料中。2016年,我国学者首次报道在大肠杆菌中发现质粒携带的粘菌素耐药基因（mcr-1）,这种可水平传播的粘菌素耐药基因的报道突破了长期以来认为粘菌素不存在可转移耐药机制的观点。截至目前,世界范围内共发现八种粘菌素耐药基因（mcr-1,mcr-2,mcr-3,mcr-4,wcr-5,mcr-6,mcr-7,wcr-8）。作为治疗多重耐药革兰氏阴性菌感染的最后一道防线,这些粘菌素耐药基因和粘菌素耐药菌株的出现,极大地降低了粘菌素的使用有效性,同时也给人和动物的健康带来巨大的威胁。本研究首先建立了检测八个质粒介导的粘菌素耐药基因的荧光定量PCR（qPCR）方法,并使用该方法对来自我国9省市的1,552份猪拭子,24省市的3,343份家禽拭子以及134份人拭子样本进行了八种mcr基因的流行现状调查,同时还在我国禁止粘菌素用于促生长剂两年后,对mcr-1的持续性影响进行了评估,最后对来自食源性动物和非食源性动物来源的mcr-1阳性大肠杆菌进行了耐药特征分析,分子遗传比较以及大肠杆茵mc... 

【文章来源】：扬州大学江苏省

【文章页数】：170 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
符号说明
第一部分 文献综述 多粘菌素的研究进展
    1 多粘菌素概述
        1.1 多粘菌素的化学结构
        1.2 多粘菌素的化学稳定性
        1.3 多粘菌素的作用机理
        1.4 多粘菌素的抗菌谱
        1.5 多粘菌素的敏感性分析方法
        1.6 多粘菌素的耐药监测情况
    2 多粘菌素的使用
        2.1 多粘菌素在人类医学上的使用
        2.2 多粘菌素在动物中的使用
    3 多粘菌素的耐药机制
        3.1 细菌的固有耐药
        3.2 脂多糖修饰
        3.3 异质性耐药
        3.4 质粒介导的多粘菌素耐药基因
    4 多粘菌素耐药菌的相关研究
        4.1 多粘菌素耐药的鲍曼不动杆菌的流行现状
        4.2 多粘菌素耐药的铜绿假单胞菌的流行现状
        4.3 多粘菌素耐药的肠杆菌科细菌的流行现状
    5 质粒介导的粘菌素耐药基因
        5.1 质粒介导的粘菌素耐药基因的发现
        5.2 质粒介导的粘菌素耐药基因的种类
        5.3 质粒介导的粘菌素耐药基因的流行现状
    参考文献
第二部分 研究内容
    第一章 检测八个粘菌素耐药基因(mcr-1-mcr-8)的荧光定量PCR方法的建立
        1 材料与方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 结果
            2.1 特异性的mcr基因(mcr-1-mcr-8)的qPCR方法建立
        3 讨论
        参考文献
    第二章 粘菌素耐药基因(mcr-1-mcr-8)在我国猪体内的分子流行病学调查
        1 材料与方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 结果
            2.1 八种不同粘菌素耐药基因(mcr-1-mcr-8)在我国猪体内的流行现状
            2.2 八种粘菌素耐药基因在猪的鼻腔和肛门中的流行现状
            2.3 不同的粘菌素耐药基因在猪体内共感染的流行现状
            2.4 系统进化树分析
        3 讨论
        参考文献
    第三章 粘菌素耐药基因(mcr-1-mcr-8)在我国家禽体内的分子流行病学调查
        1 材料与方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 结果
            2.1 八种不同粘菌素耐药基因(mcr-1-mcr-8)在我国家禽中的流行现状
            2.2 八种粘菌素耐药基因在家禽的咽喉和泄殖腔的流行现状
            2.3 不同粘菌素耐药基因在家禽体内共感染的流行现状
            2.4 系统进化树分析
        3 讨论
        参考文献
    第四章 粘菌素耐药基因(mcr-1-mcr-8)在不孕症患者阴道拭子中的分子流行病学调查
        1 材料与方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 结果
            2.1 粘菌素耐药基因(mcr-1-mcr-8)在不孕症女性阴道拭子中的流行现状
            2.2 系统进树分析
        3 讨论
        参考文献
    第五章 质粒介导的粘菌素耐药基因(mcr-1)的持续性影响
        1 材料与方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 结果
            2.1 mcr-1的阳性率比较
            2.2 mcr-1阳性样本拷贝数的比较
            2.3 系统进化树分析
            2.4 mcr-1的体外转移模拟
        3 讨论
        参考文献
    第六章 携带mcr-1基因的大肠杆菌分离株的耐药特性研究
        1 材料与方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 结果
            2.1 携带mcr-1的大肠杆菌PCR鉴定
            2.2 携带mcr-1的大肠杆菌对粘菌素的耐药性
            2.3 携带mcr-1的大肠杆菌的药物敏感性测定
            2.4 携带mcr-1的食源性动物大肠杆菌与非食源性动物大肠杆菌的耐药性比较
            2.5 携带mcr-1的大肠杆菌耐药谱及多重耐药分析
        3 讨论
        参考文献
    第七章 大肠杆菌mcr-1传播机制的研究
        1 材料与方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 结果
            2.1 携带mcr-1的大肠杆菌的MLST分析
            2.2 携带mcr-1的大肠杆菌的PFGE分型
            2.3 携带mcr-1的大肠杆菌质粒的接合转移
            2.4 携带mcr-1的大肠杆菌质粒图谱
            2.5 质粒接合转移成功菌株的药物敏感性实验
        3 讨论
        参考文献
全文总结
致谢
攻读博士学位期间取得的科研成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]细菌耐药性——全球瞩目的焦点[J]. 陈代杰.  药学进展. 2018(06)
[2]mcr-1基因介导黏菌素耐药性研究进展[J]. 周洋,刘秋云,李玉宁,张丹艳.  动物医学进展. 2018(03)
[3]mcr-1介导多黏菌素耐药性的研究进展[J]. 赵菲菲,吕晓菊.  中国抗生素杂志. 2017(12)
[4]革兰阴性菌异质性耐药的研究进展[J]. 孙坤玲,徐绣宇,贾晓炯,张莉萍.  基因组学与应用生物学. 2017(09)
[5]多黏菌素异质性耐药鲍曼不动杆菌的研究[J]. 钱鎏佳,陈代杰,林惠敏.  中国抗生素杂志. 2017(03)
[6]质粒介导的黏菌素耐药基因mcr-1研究进展[J]. 易灵娴,刘艺云,吴仁杰,梁梓森,刘健华.  遗传. 2017(02)
[7]多粘菌素耐药性的研究进展[J]. 王影,李艳然,韩镌竹,高铎,李欣南.  微生物学通报. 2017(01)
[8]肺炎克雷伯菌脉冲场凝胶电泳分型能力评价[J]. 杜小莉,周海健.  疾病监测. 2015(11)

博士论文
[1]mcr-1基因在肠道病原菌中的分布特征与传播规律研究[D]. 梁蓓蓓.军事科学院 2018

硕士论文
[1]质粒介导的黏菌素耐药基因mcr-1的发现[D]. 刘艺云.华南农业大学 2016
[2]禽致病性大肠杆菌脂多糖突变株的构建及其生物学特性研究[D]. 韩月.中国农业科学院 2014



本文编号：3175834