MATP在不同毛色羊驼皮肤中的表达和定位

发布时间：2021-05-09 17:00

　　MATP20（membrane-associated20transporter20protein）是眼皮肤白化病Ⅳ型（OCA4）的致病基因,其所编码的蛋白为膜转运相关蛋白,在黑素小体中发挥重要作用,可能参与黑色素合成和运输黑素小体正常运作所需要的物质。本实验选取MATP基因作为调控羊驼被毛颜色的候选基因,运用多重生物学方法探寻MATP与毛色之间的相互间的联系,从而深入了解羊驼毛色的成因,从分子生物学角度诠释毛色遗传的奥秘。（1）运用PCR技术,从羊驼皮肤中扩增出MATP基因的部分序列,共218bp,经NCBI比对,与其它物种的MATP基因序列具有较高的同源性,确定为羊驼的MATP基因序列。（2）运用荧光定量PCR技术分析MATP基因在不同毛色羊驼皮肤的相对表达量,结果显示：棕色羊驼中MATP的mRNA相对表达量是白色羊驼表达量的3.047倍（P<0.05）,提示MATP的表达量与毛色具有一定的相关性。（3）运用Western20blot技术,以棕色和白色羊驼为研究对象,测量MATP在其皮肤组织中蛋白表达量的差异,结果表明：从羊驼皮肤组织中分离提取总蛋白,证实含有分子量约为53KD... 

【文章来源】：山西农业大学山西省

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
目录
摘要
前言
第一部分 文献综述
    1 Wnt信号通路
    2 MATP与毛色形成
        2.1 哺乳动物毛色的形成机制
        2.2 MATP与黑色素的合成和转运
        2.3 MATP与Wnt通路中各基因的相关性
    3 羊驼毛色形成机制的研究进展
第二部分 实验部分
    实验一 MATP基因部分CNDA序列的克隆及序列分析
        1 材料与方法
            1.1 实验动物与材料
            1.2 主要仪器与试剂
            1.3 实验方法
        2 结果与分析
            2.1 羊驼皮肤组织总RNA提取结果
            2.2 PCR扩增产物电泳结果
            2.3 PCR产物测序结果
        3 讨论
        4 小结
    实验二 MATP在不同毛色羊驼皮肤中基因的表达差异
        1 材料与方法
            1.1 实验动物与材料
            1.2 主要仪器与试剂
            1.3 实验方法
            1.4 数据分析
        2 结果与分析
        3 讨论
        4 小结
    实验三 MATP蛋白在不同毛色羊驼皮肤中的定量分析
        1 材料与方法
            1.1 实验动物与材料
            1.2 主要仪器与试剂
            1.3 实验方法
            1.4 免疫印迹图像分析
        2 结果与分析
        3 讨论
        4 小结
    实验四 MATP蛋白在羊驼皮肤组织中的定位
        1 材料与方法
            1.1 实验动物与材料
            1.2 主要仪器与试剂
            1.3 实验方法
            1.4 免疫组化图像分析
        2 结果与分析
        3 讨论
        4 小结
第三部分 全文结论及创新点
参考文献
Abstract
附录：在读期间课题相关科研论著
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]内皮素-3对羊驼黑色素细胞特征及细胞内毛色基因表达的影响[J]. 耿建军,白俊明,范瑞文,杨姗姗,庞亚妙,董常生.  畜牧兽医学报. 2013(07)
[2]Wnt3a在不同毛色羊驼皮肤中的表达和定位[J]. 宋云飞,田雪,卢绪秀,郭青云,张丹丽,解晓晶,于秀菊,贺俊平,王海东,董常生.  畜牧兽医学报. 2012(05)
[3]Mitf-M在羊驼皮肤组织的表达与序列分析及免疫组织化学定位[J]. 朱芷葳,贺俊平,于秀菊,程志学,董常生.  中国农业科学. 2012(04)
[4]CDK5对羊驼皮肤黑色素细胞TYR和MITF20mRNA表达的调节[J]. 张瑞娜,范瑞文,程志学,田雪,刘佳,高磊,马峥,董常生.  畜牧兽医学报. 2011(12)
[5]Lef-1基因在棕色和白色羊驼皮肤差异表达[J]. 杨磊,王海东,王祎,于秀菊,董彦君,董常生.  中国生物化学与分子生物学报. 2011(11)
[6]内皮素受体B在不同毛色羊驼皮肤中的表达与定位[J]. 耿建军,穆晓丽,孙乐天,姜俊兵,张杰,李宏全,张映,董常生.  畜牧兽医学报. 2010(11)



本文编号：3177682