水牛—猪异种体细胞核移植
发布时间：2021-05-12 06:47
水牛-猪异种体细胞核移植（iSCNT）是指将水牛体细胞注射到猪去核卵子中,通过激活、培养等步骤观察其后续发育情况。异种体细胞核移植对于研究核-质互作、细胞核重编程等机制提供很好的理论依据,利用异种体细胞核移植还可以保护濒临灭绝的珍稀物种,尤其对于卵母细胞不易获得的物种,近年来异种核移植还用来作为人类器官移植的供体,以猪卵子作为受体结合转基因技术生产与人类器官相似的组织,研究人类疾病发病机理及解决方法。本实验采用不同的融合液组分,研究钙离子浓度对本实验条件下猪同种核移植发育的影响；筛选最适合水牛-猪异种核移植胚胎发育的激活条件,此外,探究了培养滴体积与胚胎个数的比例对于其发育的效果,并坚定了水牛-猪异种核移植。本实验的结果如下：1.不同激活电压对水牛-猪异种核移植发育的影响：采用1.0mM的融合激活液,分别采用120v/mm,150v/mm,180v/mm的电场强度,30us、2DC的激活参数。结果发现电场强度对胚胎发育的作用没有统计学上的差异。2.不同融合激活方法对水牛-猪异种核移植发育的影响：采用电融合激活与电融合后化学激活（离子霉素+6--DMAP）的方法,这两种方法对水牛-猪异种...
【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一部分 文献综述
1.1 体细胞核移植简介
1.2. 体细胞核移植的意义及问题
1.2.1 体细胞核移植在科学研究上的价值
1.2.2 体细胞核移植在珍稀动物保护上的价值
1.2.3 体细胞核移植在医学研究上的意义
1.2.4 体细胞核移植存在的问题
1.3. 影响核移植效率的因素
1.3.1. 供体细胞
1.3.2. 卵母细胞
1.3.3 SCNT步骤
1.3.4 重构胚的培养
1.3.5 表观重编程
1.4 本研究的目的及意义
第二部分 实验部分
前言
2.1 材料和方法
2.1.1 主要仪器
2.1.2 主要试剂及配置方法
2.1.3 卵母细胞的成熟
2.1.4 供体细胞准备
2.1.5 实验设计
2.1.6 核移植程序
2.1.7 数据统计
2.2 实验结果
2.2.1 电场强度对水牛|猪异种核移植重构胚发育的影响
2.2.2 融合激活方法对水牛-猪异种体细胞核移植重构胚胎发育的影响
2.2.3 培养滴体积与重构胚个数的比例对水牛-猪异种核移植重构胚发育的影响
2.2.4 转基因异种体细胞核移植重构胚发育的鉴定
2.3 讨论
2.3.1 电场强度对水牛|猪异种核移植重构胚发育的影响
2.3.2 融合激活策略对重构胚发育的作用
2.3.3 培养滴体积与重构胚个数的比例对水牛|猪异种体细胞核移植重构胚发育的影响
2.3.4 水牛|猪异种核移植重构胚的发育鉴定
2.4 小结
总结论
参考文献
致谢
在校期间发表论文
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同月份猪卵母细胞体外成熟效果比较[J]. 许惠艳,胡林林,归婧,杨小淦,卢克焕. 南方农业学报. 2013(04)
[2]电激活参数与渗透压阶段培养法对孤雌胚胎发育能力的影响[J]. 黄雷,樊俊华,武海燕,李林,高青,李奎,敖红. 中国畜牧兽医. 2012(01)
[3]不同转染方法转染牛体细胞效率的比较[J]. 李松,丁方荣,戴蕴平,朱士恩. 农业生物技术学报. 2011(06)
[4]马-牛无透明带卵异种克隆的研究[J]. 朱化彬,沈彦军,杜卫华,鞠光伟,庞云渭,郝海生,赵学明,王栋,王宗礼. 中国农业科学. 2011(16)
[5]Scriptaid处理可提高近交系五指山猪克隆胚胎的发育能力和克隆效率[J]. 朱彦宾,龙川,冯冲,潘登科,罗玉柱. 基因组学与应用生物学. 2011(03)
[6]利用体细胞核移植技术生产表达红色荧光蛋白的猪转基因克隆胚胎(英文)[J]. 康锦丹,尹熙俊,赵明辉,梁爽,刘希,李文学,崔成哲. Agricultural Science & Technology. 2011(02)
[7]食蟹猴-猪异种体细胞核移植的初步研究[J]. 吕培茹,刘红波,左二伟,杨小淦,宁淑芳,韩晓慧,陆阳清,卢晟盛,卢克焕. 中国兽医学报. 2011(02)
[8]绿色荧光蛋白在转基因研究中的应用[J]. 张雨丽,张桂征,苏红梅,蒙艺英,闭立辉. 生物技术通报. 2010(09)
[9]线粒体损伤对山羊-绵羊异种核移植胚早期发育的影响[J]. 曹俊伟,马利兵,华松,张涌. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2010(04)
[10]核重编程机制的影响因素[J]. 李海燕,杜卫华,郝海生,赵学明,洪志平,李敏. 生物学杂志. 2010(01)
博士论文
[1]盘羊—绵羊异种核移植技术程序的优化研究[D]. 潘晓燕.南京农业大学 2008
[2]人—山羊异质胚胎构建及胚胎干细胞的分离培养[D]. 张玉玲.西北农林科技大学 2008
[3]东北虎体细胞异种核移植[D]. 宋继梅.西北农林科技大学 2007
硕士论文
[1]食蟹猴—猪异种体细胞核移植初步研究[D]. 梁明明.广西大学 2012
本文编号：3182945
【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一部分 文献综述
1.1 体细胞核移植简介
1.2. 体细胞核移植的意义及问题
1.2.1 体细胞核移植在科学研究上的价值
1.2.2 体细胞核移植在珍稀动物保护上的价值
1.2.3 体细胞核移植在医学研究上的意义
1.2.4 体细胞核移植存在的问题
1.3. 影响核移植效率的因素
1.3.1. 供体细胞
1.3.2. 卵母细胞
1.3.3 SCNT步骤
1.3.4 重构胚的培养
1.3.5 表观重编程
1.4 本研究的目的及意义
第二部分 实验部分
前言
2.1 材料和方法
2.1.1 主要仪器
2.1.2 主要试剂及配置方法
2.1.3 卵母细胞的成熟
2.1.4 供体细胞准备
2.1.5 实验设计
2.1.6 核移植程序
2.1.7 数据统计
2.2 实验结果
2.2.1 电场强度对水牛|猪异种核移植重构胚发育的影响
2.2.2 融合激活方法对水牛-猪异种体细胞核移植重构胚胎发育的影响
2.2.3 培养滴体积与重构胚个数的比例对水牛-猪异种核移植重构胚发育的影响
2.2.4 转基因异种体细胞核移植重构胚发育的鉴定
2.3 讨论
2.3.1 电场强度对水牛|猪异种核移植重构胚发育的影响
2.3.2 融合激活策略对重构胚发育的作用
2.3.3 培养滴体积与重构胚个数的比例对水牛|猪异种体细胞核移植重构胚发育的影响
2.3.4 水牛|猪异种核移植重构胚的发育鉴定
2.4 小结
总结论
参考文献
致谢
在校期间发表论文
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同月份猪卵母细胞体外成熟效果比较[J]. 许惠艳,胡林林,归婧,杨小淦,卢克焕. 南方农业学报. 2013(04)
[2]电激活参数与渗透压阶段培养法对孤雌胚胎发育能力的影响[J]. 黄雷,樊俊华,武海燕,李林,高青,李奎,敖红. 中国畜牧兽医. 2012(01)
[3]不同转染方法转染牛体细胞效率的比较[J]. 李松,丁方荣,戴蕴平,朱士恩. 农业生物技术学报. 2011(06)
[4]马-牛无透明带卵异种克隆的研究[J]. 朱化彬,沈彦军,杜卫华,鞠光伟,庞云渭,郝海生,赵学明,王栋,王宗礼. 中国农业科学. 2011(16)
[5]Scriptaid处理可提高近交系五指山猪克隆胚胎的发育能力和克隆效率[J]. 朱彦宾,龙川,冯冲,潘登科,罗玉柱. 基因组学与应用生物学. 2011(03)
[6]利用体细胞核移植技术生产表达红色荧光蛋白的猪转基因克隆胚胎(英文)[J]. 康锦丹,尹熙俊,赵明辉,梁爽,刘希,李文学,崔成哲. Agricultural Science & Technology. 2011(02)
[7]食蟹猴-猪异种体细胞核移植的初步研究[J]. 吕培茹,刘红波,左二伟,杨小淦,宁淑芳,韩晓慧,陆阳清,卢晟盛,卢克焕. 中国兽医学报. 2011(02)
[8]绿色荧光蛋白在转基因研究中的应用[J]. 张雨丽,张桂征,苏红梅,蒙艺英,闭立辉. 生物技术通报. 2010(09)
[9]线粒体损伤对山羊-绵羊异种核移植胚早期发育的影响[J]. 曹俊伟,马利兵,华松,张涌. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2010(04)
[10]核重编程机制的影响因素[J]. 李海燕,杜卫华,郝海生,赵学明,洪志平,李敏. 生物学杂志. 2010(01)
博士论文
[1]盘羊—绵羊异种核移植技术程序的优化研究[D]. 潘晓燕.南京农业大学 2008
[2]人—山羊异质胚胎构建及胚胎干细胞的分离培养[D]. 张玉玲.西北农林科技大学 2008
[3]东北虎体细胞异种核移植[D]. 宋继梅.西北农林科技大学 2007
硕士论文
[1]食蟹猴—猪异种体细胞核移植初步研究[D]. 梁明明.广西大学 2012
本文编号：3182945
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