羊传染性脓疱敦化株基因序列的分析及PCR的检测

发布时间：2021-05-14 19:24

　　羊传染性脓疱（CE）是由羊传染性脓疱病毒引发山羊、绵羊等中小型反刍动物的一种急性和接触性传染病。CEV感染动物后与绵羊痘病毒、山羊痘病毒、口蹄疫病毒的发病症状非常相似。目前,CEV采用的检测方法灵敏度和准确率低,为了能够快速高效、准确无误的诊断该病,本研究建立了特异性强、灵敏度高的SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法。试验一,借助体外培养的MDBK细胞从敦化的患病羊痂皮中分离得到CEV敦化株,对分离株进行了培养特性研究、电镜观察、乙醚敏感性试验、氯仿敏感性试验、耐酸性试验、耐碱性试验、耐热性试验、紫外照射试验、动物回归试验,经鉴定该分离毒株为羊传染性脓疱病毒。试验二,将分离出的CEV敦化株的F1L基因序列与国内外发表的不同毒株相应的氨基酸序列进行同源性比较。结果显示:分离毒株与已发表的毒株的同源性在97%⁹9%之间,分离毒株与Jilin株的亲缘关系最近,与OV/Torino株的亲缘关系最远,这表明了F1L基因在遗传上高度保守的同时仍然存在一些变异。试验三,根据Genbank已经发表的CEV参考毒株IL-10-LIKE PROTEIN基因序列设计合成一... 

【文章来源】：吉林农业大学吉林省

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文献综述
    1.1 羊传染性脓疱病的概述
    1.2 病原学
    1.3 流行病学
    1.4 临床症状
    1.5 羊传染性脓疱病诊断方法的研究进展
    1.6 羊传染性脓疱病的免疫与防治
第二篇 研究内容
    第一章 羊传染性脓疱病毒敦化株的分离与鉴定
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 结果
        1.4 讨论
        1.5 小结
    第二章 CEV敦化株基因序列分析
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 结果
        2.4 讨论
        2.5 小结
    第三章 SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR方法的建立
        3.1 材料
        3.2 方法
        3.3 结果
        3.4 讨论
        3.5 小结
结论
参考文献
作者简介
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]羊传染性脓疱病毒吉林分离株F1L基因的克隆与同源性分析[J]. 邵洪泽,程荣华,石春军,呼延含蓉,黄海楠,许尧,毛文智,胡桂学.  吉林大学学报(理学版). 2013(03)
[2]羊口疮病毒SYBR GreenⅠ染料法实时荧光定量PCR的建立及运用[J]. 姚俊,彭海生,鲁富有,张乔明,李富祥,李华春.  黑龙江畜牧兽医. 2013(09)
[3]羊传染性脓疱诊断技术研究进展[J]. 刘永杰,张克山,孔汉金,尚佑军,逯忠新,刘湘涛.  动物医学进展. 2013(02)
[4]羊口疮病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用[J]. 姚俊,李富祥,彭海生,鲁富有,张乔明,李华春.  动物医学进展. 2012(11)
[5]羊传染性脓疱诊断方法的建立[J]. 王光华,陆艳,王戈平,蔡其刚,李秀萍,叶成玉,马利青.  青海畜牧兽医杂志. 2012(05)
[6]羊传染性脓疱研究进展[J]. 史宗勇,史新涛,古少鹏,郑明学.  养殖与饲料. 2010(11)
[7]羊传染性脓疱病毒B2L基因片段重组腺病毒载体的构建[J]. 邵洪泽,毛文智,宋阳,李琳,程荣华.  安徽农业科学. 2010(13)
[8]羊传染性脓疱病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 李超,赵魁,赵权,贺文琦,宋德光,李晶,解胜男,陈克研,高丰.  中国兽医科学. 2010(03)
[9]羊传染性脓疱病的流行及诊治[J]. 迟源,王好,钱爱东.  吉林畜牧兽医. 2009(04)
[10]羊传染性脓疱皮炎病毒研究进展[J]. 赵魁,贺文琦,高丰.  中国畜牧兽医. 2008(11)

硕士论文
[1]羊传染性脓疱实时荧光定量PCR方法的建立[D]. 李旭东.内蒙古农业大学 2015



本文编号：3186194