猪脂肪分解通路中主要基因的网络构建

发布时间：2021-05-15 23:17

　　脂肪代谢性状属于多基因控制的复杂性状。目前有关脂肪分解的研究大多着眼于几个甚至单一基因，难以发现基因之间的互作，应用于育种实践时具有一定的局限性。HSL是一种重要的脂肪分解酶，已有研究证实CB1可以影响HSL基因的表达，但是调控机制并不清楚。本文采用文献挖掘方法，构建了与脂肪分解有关的基因网络，阐明脂解基因之间的作用机理；推测CB1通过CB1→PPARγ2→perilipinA→HSL通路对HSL起调控作用，并通过试验对CB1对HSL基因表达的调控进行验证，可为今后进一步开展脂肪分解通路的研究提供理论依据。本研究分析了脂肪动员、线粒体与过氧化物酶体内脂肪酸的β氧化和甘油代谢三个环节中相关酶及其编码基因的性质特征，并解释了调控通路的作用机制；运用生物信息学方法分析CB1→PPARγ2→perilipinA→HSL通路中4个基因编码的蛋白质的理化性质与结构；选取了4、5、6、7月龄15头美系大白猪屠宰采样，对CB1、PPARγ2和HSL基因表达进行相对定量。结果显示：兴奋性G蛋白偶联受体通路、抑制性G蛋白偶联受体通路和Gq/PLC/PKC通路属于G蛋白偶联通路，调控机制相似；酪氨酸激酶受体... 

【文章来源】：河北农业大学河北省

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 脂肪组织和脂肪细胞
        1.1.1 脂肪组织和脂肪细胞的构成
        1.1.2 脂肪组织和脂肪细胞的起源和发育
        1.1.3 脂肪因子
    1.2 脂肪的分解过程及相关脂肪酶
        1.2.1 脂肪的动员
        1.2.2 甘油的代谢
        1.2.3 脂肪酸的 β 氧化
        1.2.4 其他调节脂肪分解的基因
    1.3 脂肪分解的信号机制
        1.3.1 兴奋性 G 蛋白偶联受体通路
        1.3.2 抑制性 G 蛋白偶联受体通路
        1.3.3 酪氨酸激酶受体通路
        1.3.4 Gq/PLC/PKC 通路
        1.3.5 JAK‐STATs 通路
    1.4 脂肪分解代谢的研究方法
    1.5 有待解决的问题
    1.6 本研究的内容
    1.7 本研究的意义
2 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 生物信息学分析材料
        2.1.2 提取总 RNA 试验材料
        2.1.3 主要的试验试剂
        2.1.4 试剂的配制
    2.2 试验方法
        2.2.1 调控网络的构建
        2.2.2 生物信息学分析
        2.2.3 主要的试验仪器
        2.2.4 总 RNA 的提取
        2.2.5 RNA 纯度和质量的检测
        2.2.6 RNase free DNaseⅠ处理总 RNA
        2.2.7 引物设计
        2.2.8 PCR 鉴定 gDNA
        2.2.9 反转录成 cDNA
        2.2.10 Real‐time PCR
        2.2.11 数据处理
3 结果与分析
    3.1 脂肪降解通路中主要基因的网络构建
        3.1.1 猪脂肪分解调控网络
        3.1.2 G 蛋白偶联受体介导的调控通路
    3.2 CB1/ PPARΓ2/HSL 通路中蛋白质的生物信息学分析
        3.2.1 蛋白质的理化性质
        3.2.2 蛋白质的信号肽和亚细胞定位
        3.2.3 蛋白质的二级结构
    3.3 CB1 调控 HSL 表达研究
        3.3.1 RNA 纯度和质量的检测结果
        3.3.2 反应曲线
        3.3.3 CB1、PPARγ2 和 HSL 基因的组织表达谱
        3.3.4 猪不同体重阶段 CB1、PPARγ2 和 HSL 基因的表达趋势
4 讨论
    4.1 猪脂肪分解通路中的基因网络
    4.2 脂解通路之间的关系
    4.3 CB1/ PPARΓ2/HSL 通路的推测
        4.3.1 CB1/ PPARγ2/HSL 通路中蛋白质的生物信息学分析
        4.3.2 CB1 对 HSL 表达的调控
    4.4 有待进一步研究的问题
5 结论
参考文献
缩略词表
在读期间发表的论文
作者简历
致谢



本文编号：3188514