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对猪繁殖与呼吸综合征病毒易感的Marc-145细胞克隆株的筛选

发布时间:2021-05-16 18:14
  为了提高猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)在Marc-145细胞中的增殖效价,本研究旨在筛选出一株对该病毒易感度高的Marc-145细胞株。采用有限稀释法从母代细胞中分离单细胞克隆株,通过RT-PCR的方法测定毒株在克隆细胞上的核酸量,通过TCID50检测毒株对克隆细胞株的易感性,同时进行细胞生长曲线绘制。结果表明,获得2-D4、2-E6、 2-C8、2-G9、2-H11株共5株Marc-145克隆细胞。接毒72 h后,2-D4、2-E6、2-C8和2-H11株细胞出现明显细胞病变,2-G9株和母代细胞培养上清液核酸检测呈阳性,但未出现细胞病变。同时,2-D4株对PRRSV毒株高度易感,该克隆细胞的分裂增殖能力要强于其他克隆株。综合上述试验结果,2-D4株更适宜于PRRSV培养,因此采用有限稀释法筛选对PRRSV易感的Marc-145细胞是一种可行的科学研究方法。 

【文章来源】:畜牧与兽医. 2020,52(11)北大核心

【文章页数】:5 页

【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 单细胞克隆
    1.3 RT-PCR的检测
    1.4 病毒核酸的定量 PCR 比较
    1.5 测定PRRSV在各克隆株上的增殖情况
    1.6 Marc-145细胞各克隆株生长曲线绘制
2 结果
    2.1 细胞克隆
    2.2 PRRSV在各克隆株上的增殖情况
    2.3 单克隆细胞病毒滴度检测
    2.4 Marc-145细胞可用克隆株及原始株生长情况
3 讨论


【参考文献】:
期刊论文
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[2]猪瘟兔化弱毒株(C株)ST敏感细胞的克隆和鉴别[J]. 商晓桂,韩志玲,毕力格,高永伟,闫聪,郝鹏,张贵刚,刘国英.  现代畜牧兽医. 2019(01)
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[10]病毒感染对细胞周期调控影响的研究进展[J]. 周雪红,李凯.  微生物学免疫学进展. 2012(06)

硕士论文
[1]猪瘟病毒高感染性PK-15细胞单克隆细胞株的筛选[D]. 孔令芸.河南科技学院 2015
[2]Marc-145细胞周期同步化及PRRSV细胞受体表达与病毒感染的关系[D]. 孔宁.山东农业大学 2013



本文编号:3190164

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