对猪繁殖与呼吸综合征病毒易感的Marc-145细胞克隆株的筛选
发布时间:2021-05-16 18:14
为了提高猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)在Marc-145细胞中的增殖效价,本研究旨在筛选出一株对该病毒易感度高的Marc-145细胞株。采用有限稀释法从母代细胞中分离单细胞克隆株,通过RT-PCR的方法测定毒株在克隆细胞上的核酸量,通过TCID50检测毒株对克隆细胞株的易感性,同时进行细胞生长曲线绘制。结果表明,获得2-D4、2-E6、 2-C8、2-G9、2-H11株共5株Marc-145克隆细胞。接毒72 h后,2-D4、2-E6、2-C8和2-H11株细胞出现明显细胞病变,2-G9株和母代细胞培养上清液核酸检测呈阳性,但未出现细胞病变。同时,2-D4株对PRRSV毒株高度易感,该克隆细胞的分裂增殖能力要强于其他克隆株。综合上述试验结果,2-D4株更适宜于PRRSV培养,因此采用有限稀释法筛选对PRRSV易感的Marc-145细胞是一种可行的科学研究方法。
【文章来源】:畜牧与兽医. 2020,52(11)北大核心
【文章页数】:5 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 单细胞克隆
1.3 RT-PCR的检测
1.4 病毒核酸的定量 PCR 比较
1.5 测定PRRSV在各克隆株上的增殖情况
1.6 Marc-145细胞各克隆株生长曲线绘制
2 结果
2.1 细胞克隆
2.2 PRRSV在各克隆株上的增殖情况
2.3 单克隆细胞病毒滴度检测
2.4 Marc-145细胞可用克隆株及原始株生长情况
3 讨论
【参考文献】:
期刊论文
[1]适用于生产H5N1流感疫苗的MDCK亚克隆细胞的筛选及检定[J]. 黄晓媛,张家友,刘洋,赵巍,施金荣,乐欣如,喻刚,韩锡鑫,杨晓明. 中华微生物学和免疫学杂志. 2019 (02)
[2]猪瘟兔化弱毒株(C株)ST敏感细胞的克隆和鉴别[J]. 商晓桂,韩志玲,毕力格,高永伟,闫聪,郝鹏,张贵刚,刘国英. 现代畜牧兽医. 2019(01)
[3]牛病毒性腹泻/黏膜病毒敏感MDBK细胞克隆与鉴定[J]. 刘国英,范秀丽,韩志玲,闫聪,杨波,郝鹏,张贵刚,陈九连,商晓桂. 畜牧兽医科学(电子版). 2019(01)
[4]益于猪圆环病毒2型增殖的PK-15细胞系的克隆筛选与应用[J]. 白满元,柳海云,张韵,孙世琪,郭慧琛. 中国兽医科学. 2018(12)
[5]猪细小病毒H株ST细胞系高敏感性细胞的克隆[J]. 任德强,张立恒,宋新刚. 畜牧兽医科技信息. 2018(03)
[6]BHK-21单细胞克隆敏感株筛选及日本脑炎病毒分离[J]. 向卫军,杨涛涛,李润成,余兴龙. 动物医学进展. 2017(05)
[7]现代商品仔猪传代肾细胞株的培育与应用研究[J]. 胡鸿惠,吴静波,黄健强,南文金,于文涛. 中国畜牧兽医. 2017(02)
[8]PCV2-PRV-PRRSV-CSFV多重PCR检测方法的建立[J]. 左奕,王建永,袁万哲,孙继国. 中国兽医科学. 2015(08)
[9]适合猪圆环病毒2生长的PK15均质细胞株的构建[J]. 罗维,赵墩,蒋大良,余兴龙. 湖南农业大学学报(自然科学版). 2013(04)
[10]病毒感染对细胞周期调控影响的研究进展[J]. 周雪红,李凯. 微生物学免疫学进展. 2012(06)
硕士论文
[1]猪瘟病毒高感染性PK-15细胞单克隆细胞株的筛选[D]. 孔令芸.河南科技学院 2015
[2]Marc-145细胞周期同步化及PRRSV细胞受体表达与病毒感染的关系[D]. 孔宁.山东农业大学 2013
本文编号:3190164
【文章来源】:畜牧与兽医. 2020,52(11)北大核心
【文章页数】:5 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 单细胞克隆
1.3 RT-PCR的检测
1.4 病毒核酸的定量 PCR 比较
1.5 测定PRRSV在各克隆株上的增殖情况
1.6 Marc-145细胞各克隆株生长曲线绘制
2 结果
2.1 细胞克隆
2.2 PRRSV在各克隆株上的增殖情况
2.3 单克隆细胞病毒滴度检测
2.4 Marc-145细胞可用克隆株及原始株生长情况
3 讨论
【参考文献】:
期刊论文
[1]适用于生产H5N1流感疫苗的MDCK亚克隆细胞的筛选及检定[J]. 黄晓媛,张家友,刘洋,赵巍,施金荣,乐欣如,喻刚,韩锡鑫,杨晓明. 中华微生物学和免疫学杂志. 2019 (02)
[2]猪瘟兔化弱毒株(C株)ST敏感细胞的克隆和鉴别[J]. 商晓桂,韩志玲,毕力格,高永伟,闫聪,郝鹏,张贵刚,刘国英. 现代畜牧兽医. 2019(01)
[3]牛病毒性腹泻/黏膜病毒敏感MDBK细胞克隆与鉴定[J]. 刘国英,范秀丽,韩志玲,闫聪,杨波,郝鹏,张贵刚,陈九连,商晓桂. 畜牧兽医科学(电子版). 2019(01)
[4]益于猪圆环病毒2型增殖的PK-15细胞系的克隆筛选与应用[J]. 白满元,柳海云,张韵,孙世琪,郭慧琛. 中国兽医科学. 2018(12)
[5]猪细小病毒H株ST细胞系高敏感性细胞的克隆[J]. 任德强,张立恒,宋新刚. 畜牧兽医科技信息. 2018(03)
[6]BHK-21单细胞克隆敏感株筛选及日本脑炎病毒分离[J]. 向卫军,杨涛涛,李润成,余兴龙. 动物医学进展. 2017(05)
[7]现代商品仔猪传代肾细胞株的培育与应用研究[J]. 胡鸿惠,吴静波,黄健强,南文金,于文涛. 中国畜牧兽医. 2017(02)
[8]PCV2-PRV-PRRSV-CSFV多重PCR检测方法的建立[J]. 左奕,王建永,袁万哲,孙继国. 中国兽医科学. 2015(08)
[9]适合猪圆环病毒2生长的PK15均质细胞株的构建[J]. 罗维,赵墩,蒋大良,余兴龙. 湖南农业大学学报(自然科学版). 2013(04)
[10]病毒感染对细胞周期调控影响的研究进展[J]. 周雪红,李凯. 微生物学免疫学进展. 2012(06)
硕士论文
[1]猪瘟病毒高感染性PK-15细胞单克隆细胞株的筛选[D]. 孔令芸.河南科技学院 2015
[2]Marc-145细胞周期同步化及PRRSV细胞受体表达与病毒感染的关系[D]. 孔宁.山东农业大学 2013
本文编号:3190164
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