1株跨属感染猪霍乱沙门菌和大肠杆菌烈性噬菌体的分离及其生物学特性

发布时间：2021-05-18 17:29

　　从健康猪肠道内容物分离鉴定猪霍乱沙门菌（Salmonella choleraesuis,S.choleraesuis）的烈性噬菌体,并对其进行生物学特性分析。以S.choleraesuis 13122为宿主菌,用双层平板法从猪肠道黏膜和食糜样品中分离噬菌体,用电镜形态观察和基因组测序确定其分类,用点滴法和双层平板法测定其在大肠杆菌上的宿主谱,用浊度法测定其裂菌效力。分离到1株猪霍乱沙门菌噬菌体,命名为沙门菌噬菌体L6jm （Salmonella phage L6jm）。L6jm头部呈正多面体直径约75 nm,具有非收缩性的尾部,长约190 nm,其基因组无整合酶基因和细菌基因组,故判定为烈性噬菌体;L6jm可感染S.choleraesuis 13122并跨属感染1株大肠杆菌（Escherichia coli,E.coli）244,同时,可裂解9株大肠杆菌,包括1株产肠毒素大肠杆菌（ETEC）;L6jm在S.choleraesuis 13122和E.coli 244上的最佳感染复数分别为0.01和0.001;潜伏期均为15 min,暴发期分别为145和125 min;L6jm在≤50℃,... 

【文章来源】：畜牧兽医学报. 2020,51(08)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 菌株及噬菌体来源
    1.2 噬菌体分离纯化
    1.3 噬菌体基因组的提取和酶切鉴定
    1.4 噬菌体全基因组测序
    1.5 噬菌体在大肠杆菌上的宿主谱测定
    1.6 噬菌体浓缩与透射电镜观察
    1.7 噬菌体生物学特性分析
        1.7.1 热稳定性、pH稳定性测定
        1.7.2 最佳感染复数(MOI)测定
        1.7.3 成斑率(efficiency of plating, EOP)测定
        1.7.4 噬菌体的一步生长曲线测定
        1.7.5 噬菌体裂解S.choleraesuis 13312和ETEC 104效力测定
        1.7.6 数据统计分析
2 结 果
    2.1 噬菌体的分离鉴定
        2.1.1 噬菌体的分离纯化及鉴定
        2.1.2 噬菌体分类鉴定
        2.1.3 噬菌体在大肠杆菌上的宿主谱
    2.2 噬菌体的生物学特性
        2.2.1 噬菌体的热稳定性及pH稳定性
        2.2.2 噬菌体的最佳感染复数
        2.2.3 噬菌体成斑率
        2.2.4 噬菌体的一步生长曲线
        2.2.5 噬菌体裂菌效力
3 讨 论
4 结 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]曲靖地区仔猪腹泻细菌性病原的分离鉴定与耐药性分析[J]. 朱玲云,郑龙龙,毕峻龙,冯朝相,杨贵树,白卫兵.  中国畜牧兽医. 2015(03)
[2]噬菌体最新分类与命名[J]. 冯烨,刘军,孙洋,冯书章.  中国兽医学报. 2013(12)



本文编号：3194200