猪胰高血糖素样肽-2/PLGA微球的制备及其对小鼠、断奶仔猪肠道损伤修复效果的研究

发布时间：2021-05-20 14:49

　　猪胰高血糖素样肽-2（pGLP-2）能够特异性地促进肠黏膜生长,加速损伤修复,为治疗“仔猪断奶综合症”提供了新的途径,但pGLP-2易被二肽酰肽酶Ⅳ（DPP-IV）快速降解,严重制约了其应用,亟需研发延长其半衰期的技术。本文采用聚乳酸羟基乙酸聚合物（PLGA）包被pGLP-2制成PLGA/pGLP-2微球载药系统,延长了pGLP-2在体内的释放时间,并在小鼠及仔猪试验中取得了较好的肠道修复效果。试验一：pGLP-2/PLGA微球的制备本试验探究了复乳法（W/O/W）及水包油包固体法（S/O/W）制备出微球的区别；优化了S/O/W法制备微球的工艺；研究了在外水相加入NaCl及油相添加聚乙二醇（PEG）对微球内药物释放的影响。结果表明：（1）S/O/W法较W/O/W法制备的微球载药量相近,但粒径较均一,突释低,且表面圆整光滑,无较大微孔。（2）使用S/O/W法制备微球,优选出了理论载药量为1%、转速为2000rpm、PVA浓度为2%, PLGA浓度为100mg/mL、DCM/DMSO体积比为40作为制备工艺,制备出包封率为72%、突释率为16.62%、粒径为37.5μm的微球。（3）在油相... 

【文章来源】：浙江师范大学浙江省

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
符号说明
第一部分 文献综述
    1 GLP-2的合成及代谢
    2 GLP-2在不同动物中的研究
        2.1 GLP-2在啮齿类动物中的研究进展
        2.2 GLP-2在仔猪上的研究进展
        2.3 GLP-2在人体内的研究进展
        2.4 其他
    3 GLP-2的长效化应用
        3.1 DPP-Ⅳ抑制剂
        3.2 GLP-2的改性及给药系统
    4 存在问题及本研究的目的意义
        4.1 存在问题
        4.2 本研究的目的
        4.3 本研究意义
第二部分 pGLP-2微球的制备
    1. 材料与方法
        1.1 主要仪器
        1.2 主要试剂及药品
        1.3 试验设计
    2. 结果
        2.1 W/O/W法与S/O/W法制备的GLP-2微球比较
        2.2 S/O/W法制备GLP-2微球的工艺优化
        2.3 NaCl与PEG对微球粒径包封率及释放特征的影响
    3. 讨论
    4. 小结
第三部分 pGLP-2对DSS诱导结肠炎小鼠损伤修复的研究
    1 材料与方法
        1.1 主要试剂
        1.2 试验动物
        1.3 微球制备
        1.4 试验设计
        1.5 样品采集
        1.6 肠道组织学观察及炎性评分
        1.7 血液DAO及结肠MPO的测定
        1.8 结肠RNA提取及RT-PCR分析
        1.9 数据统计分析
    2 结果
        2.1 小鼠行为及精神状态
        2.2 表观生长指标
        2.3 十二指肠、结肠肠道形态学及结肠炎性评分
        2.4 血液DAO水平及结肠MPO活性
        2.5 结肠紧密连接蛋白及炎性因子相关基因表达量分析
    3 讨论
    4 小结
第四部分 pGLP-2微球对LPS诱导断奶仔猪肠道损伤的保护作用
    1 材料与方法
        1.1 主要试剂
        1.2 微球的制备
        1.3 试验设计
        1.4 样品采集
        1.5 血液指标的测定
        1.6 肠道形态的观测
        1.7 十二指肠、空肠粘膜RNA提取及RT-PCR分析
        1.8 数据统计与分析
    2 结果
        2.1 仔猪行为观察
        2.2 pGLP-2微球对断奶仔猪肠道形态的影响
        2.3 pGLP-2微球对注射LPS前后血液生化指标的影响
        2.4 十二指肠、空肠紧密连接蛋白及炎性因子相关基因表达量分析
    3 讨论
    4 小结
全文总结
    1 全文结论
    2 展望
创新点
参考文献
致谢
攻读学位期间发表论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]胰高血糖素样肽-2受体在新生仔猪部分内脏器官中的分布[J]. 齐珂珂,徐子伟,门小明.  中国畜牧杂志. 2013(07)
[2]小鼠溃疡性结肠炎模型的建立及病理组织学比较[J]. 张忠,程富胜,贾宁,车清明,尹凤琴,祝艳华.  中国实验动物学报. 2012(06)
[3]胰高血糖素样肽-2/聚乳酸-羟基乙酸微球的制备及其体外释药性质研究[J]. 刘琳娜,李欣,张琰,刘新友,杨鹏.  中国药房. 2010(29)
[4]胰高血糖素样肽-2对梗阻性黄疸时肠道屏障功能的影响[J]. 葛鹏磊,李宁,贾乾斌.  四川大学学报(医学版). 2010(03)
[5]脂多糖刺激对断奶仔猪小肠结构的影响及机理[J]. 范伟,刘玉兰,孟国权,车政权,朱惠玲,侯永清,丁斌鹰.  黑龙江畜牧兽医. 2010(05)
[6]胰高血糖素样肽-2对幼鼠肠缺血-再灌注损伤的保护作用[J]. 张敏,胡毓华,张伟.  江苏医药. 2009(12)
[7]胰高血糖素样肽-2对体外培养的断奶仔猪小肠黏膜上皮细胞形态、增殖及其酶活力的影响[J]. 蒋荣川,贾刚,王康宁.  动物营养学报. 2008(06)
[8]急性结肠炎慢性化小鼠模型的建立[J]. 王显飞,陈烨,陈村龙,陈楚弟,李静,王霞.  胃肠病学. 2008(03)
[9]胰高血糖素样肽-1长效注射微球的研究[J]. 尹东锋,吴诚,鲁莹,朱艳,钟延强.  药学学报. 2006(07)
[10]LPS所介导的信号转导通路研究进展[J]. 杨一新,李桂源.  中南大学学报(医学版). 2006(01)

硕士论文
[1]LPS休克脑损伤TRPV6及CLC-2蛋白变化及PDS的影响[D]. 马晋彤.吉林大学 2009
[2]胰高血糖素样肽-2受体在小鼠中枢神经系统的表达[D]. 马晓健.大连医科大学 2009



本文编号：3197942