GPx5在骆驼附睾上的时空表达研究

发布时间：2021-05-25 15:03

　　哺乳动物精子通过附睾的运输、保护和储存过程中,获得受精能力,是精子成熟和储存的主要场所。精子也和其他任何一种细胞一样面对氧化损伤。精子对脂质过氧化、DNA损伤的进攻极为敏感,从而影响活力及受精能力。附睾为精子提供免受外界压力的环境并促进其成熟。附睾含有一系列抗氧化剂,包括谷胱甘肽过氧化物酶5（GPx5）,GPx5可以保护精子免受氧化应激,维持公畜生殖道内自由基正常水平,促进精子发育成熟,其在提高雄性动物繁殖力上发挥着重要作用。国内现没有关于GPx5基因在骆驼附睾中的研究,因此,本研究以骆驼为研究对象,检测了不同年龄段（三岁、五岁、六岁）骆驼附睾不同部位GPx5的表达规律。研究结果如下:1.采用荧光定量PCR技术检测GPx5基因在不同年龄骆驼附睾不同部位上的mRNA水平表达情况。结果表明:各年龄阶段（三岁、五岁、六岁）骆驼附睾表达量存在差异。在三岁骆驼、五岁骆驼及六岁骆驼附睾头部为GPx5 mRNA的主要表达部位,表达量极显著高于附睾体部和附睾尾部（P<0.01）。五岁骆驼附睾头部表达量极显著高于三岁骆驼和六岁骆驼（P<0.01）,三岁骆附睾头部表达量与六岁头部表达量无显著差... 

【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略语表
1 引言
    1.1 附睾的概述
    1.2 附睾的功能
    1.3 附睾蛋白分泌特点
    1.4 附睾氧化应激
        1.4.1 精子与活性氧
        1.4.2 附睾中的主要抗氧化剂
    1.5 附睾特异谷胱甘肽过氧化物酶-5(GPx5)
        1.5.1 附睾特异谷胱甘肽氧化物酶的结构
        1.5.2 谷胱甘肽过氧化物酶-5(GPx5)的作用
        1.5.3 GPx5表达特性
        1.5.4 GPx5表达调控
        1.5.5 GPx5基因的功能研究
        1.5.6 GPx5和顶体反应的关系
    1.6 研究目的和意义
2 技术路线
3 实验材料与方法
    3.1 实验材料
    3.2 主要实验试剂
    3.3 主要仪器
    3.4 实验方法
        3.4.1 总RNA的提取
        3.4.2 总RNA反转录
        3.4.3 目的基因荧光定量PCR
        3.4.4 总蛋白的提取
        3.4.5 Western Blot
        3.4.6 石蜡切片
        3.4.7 免疫组化
4 结果与分析
    4.1 组织总RNA电泳检测
    4.2 RT-qPCR产物检测
    4.3 GPx5与GAPDH基因RT-qPCR结果
    4.4 GPx5基因的时空表达特异性
    4.5 蛋白浓度测定
    4.6 GPx5蛋白在不同年龄骆驼附睾上的表达
    4.7 GPx5蛋白在不同年龄骆驼附睾上的定位
5 讨论
6 结论
7 展望
致谢
参考文献
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]牦牛GPX5基因CDS区的克隆和表达研究[J]. 朱江江,袁梦,李鹏程,赵旺生.  中国畜牧杂志. 2019(10)
[2]哺乳动物附睾特异GPx5功能及其调节机制的研究进展[J]. 栾兆进,张家新.  中国畜牧兽医. 2018(09)
[3]GPx5在内蒙古绒山羊附睾中的表达[J]. 范晓梅,栗瑞兰,张通,边小娜,张家新.  中国农业大学学报. 2017(10)
[4]GPx5基因在绵羊附睾上的时空表达特性[J]. 乌亚罕,史振丹,乌丽雅苏,爱伦高娃,扎木嘎,乌云斯钦,恩和玛日特,哈斯高娃,娜仁花.  西北农林科技大学学报(自然科学版). 2017(04)
[5]人谷胱甘肽过氧化物酶的生物信息学分析[J]. 郭笑,陈冬雪,韩笑,魏景艳,孙晶波,徐广宇,盛瑜,安丽萍.  北华大学学报(自然科学版). 2016(06)
[6]GPX5在成年绵羊附睾中的表达与蛋白定位[J]. 栗瑞兰,张通,范晓梅,欧阳效晴,张春强,曹俊伟,张家新.  中国农业科学. 2015(24)
[7]绵羊GPx5基因克隆、生物信息学分析及表达特性的研究[J]. 张春香,郭云雁,白元生,杨子森,张国林,焦光月,任有蛇.  畜牧兽医学报. 2014(07)
[8]谷胱甘肽过氧化物酶及其合成机制[J]. 于扬,魏景艳.  生物物理学报. 2013(10)
[9]附睾特异谷胱甘肽过氧化物酶基因调控的研究进展[J]. 张国林,李振,高晋生,曹宁贤,张春香.  中国畜牧兽医. 2013(09)
[10]哺乳动物Gpx基因家族进化选择和功能分歧研究[J]. 杨红文,金丹.  重庆师范大学学报(自然科学版). 2012(02)

博士论文
[1]谷胱甘肽过氧化物酶5在内蒙古绒山羊附睾的表达与调控[D]. 范晓梅.内蒙古农业大学 2017
[2]绵羊附睾GPx5基因表达调控的分子机制[D]. 乌亚罕.内蒙古农业大学 2016

硕士论文
[1]永生化绵羊附睾上皮细胞系的建立及其生物学特性分析[D]. 宋慧子.内蒙古农业大学 2019
[2]绵羊附睾特异谷胱甘肽过氧化物酶（GPx5）基因的克隆与表达[D]. 程彩虹.山西农业大学 2013



本文编号：3205548