山羊IL-15的克

发布时间：2021-05-26 13:07

　　白细胞介素15（Interleukin-15, IL-15）是一种多功能细胞因子,在免疫系统和非免疫系统中具有重要的作用。在免疫系统中,参与免疫应答和免疫调节,包括刺激NK细胞、B细胞和T细胞的产生、激活；在非免疫系统中,可引起肌肉萎缩性刺激和肌肉收缩性反应,因其在骨骼肌中表达尤为丰富,而且在运动的肌肉中表达量有上升的趋势,被认为是一种重要的肌肉内分泌因子,或称为肌因子（myokine）。又因其毒性小,易吸收等特点,亦可作为一种新型的免疫佐剂而备受关注。在生产养殖过程中,高产仔的遗传机制一直是繁殖研究过程当中的热点。胎盘作为胎儿成长的临时器官,对其生长有重要的影响。在通过表型选择来提高产仔数未获得很大进展的情况下,胎盘效率（placental efficiency, PE）作为产仔数育种的一种重要指标越来越受到重视。本研究首先以山羊为研究对象,根据山羊IL-15基因预测的mRNA序列（XM₀05691220）设计并合成特异性引物。运用RT-PCR方法对山羊IL-15开放阅读框（ORF）进行克隆,扩增,鉴定及生物信息学分析；获得的成熟肽段与pET-32a（+）连接,... 

【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 文献综述
    1.1 白介素-15的研究进展
    1.2 IL-15的生物学功能
    1.3. 胎盘效率与繁殖性状的相关性
    1.4 SNP的定义
第2章 引言
    2.1 研究的背景及意义
    2.2 研究技术路线
第3章 材料与方法
    3.1 实验材料
    3.2 实验方法
        3.2.1 引物设计
        3.2.2 总RNA的提取及cDNA的制备
        3.2.3 山羊IL-15生物信息学分析
    3.3 PET32A-IL-15表达菌株的构建
        3.3.1 大足黑山羊IL?15成热肽基因的扩增与鉴定
        3.3.2 质粒的抽提、瘸切与回收
        3.3.3 IL15成熟肽段与pET32a (+)构建原核表达载体pET32a-IL-15
        3.3.4 重组质粒pET32a-IL-15转化表达菌株大肠杆菌BL21(DE3)
        3.3.5 重组菌的诱导表达
            3.3.5.1 重组菌的培养及表达
            3.3.5.2 SDS-PAGE电泳鉴定
        3.3.6 融合蛋白的Western blot分析
        3.3.7 融合蛋白的可溶性分析
    3.4 IL-15基因组织表达谱的构建
    3.5 荣昌猪胎盘繁殖记录及性状分析
    3.6 荣昌猪IL-15基因多态性及其与胎盘性状、繁殖性能的关联分析
第4章 结果与分析
    4.1 山羊IL-15基因克隆、序列分析与表达
    4.2 组织表达谱分析
        4.2.1 制作荧光定量标准曲线
        4.2.2 猪和山羊IL-15组织表达谱分析
        4.2.3 基因多态性与胎盘性状、繁殖性能的相关分析
        4.2.4 猪IL-15基因多态性位点分析
        4.2.5 不同位点的群体遗传学分析
        4.2.6 IL-15基因不同基因型与猪胎盘性状、繁殖性能的关联分析
第5章 讨论
    5.1 山羊IL-15基因的克隆及分析
    5.2 山羊IL-15的诱导表达
    5.3 IL-15组织表达荧光定量分析
    5.4 猪IL-15基因多态性与胎盘性状、繁殖性能的相关性
参考文献
缩写词表
致谢
发表的论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]猪IL-15 cDNA真核表达载体的构建、表达及其免疫佐剂效应[J]. 何谦,陈钜豪,房红莹,卢俊鹏,张欣,崔敏,曾小娜,刘健,罗满林.  中国兽医学报. 2011(08)
[2]荣昌猪白细胞介素15成熟肽基因的克隆、表达及其表达产物活性检测[J]. 骆爱芳,郭万柱,韩国全,宋振辉.  畜牧兽医学报. 2007(12)
[3]猪白细胞介素15基因的克隆及在大肠杆菌中的表达[J]. 江云波,方六荣,肖少波,张辉,潘永飞,罗锐,李彬,陈焕春.  畜牧兽医学报. 2007(08)
[4]长大母猪胎盘效率与繁殖性能关系的研究[J]. 曾书琴,薛立群,田允波.  中国畜牧杂志. 2006(11)
[5]长白、大白母猪胎盘效率与产仔数关系的研究[J]. 张守全,陈文广,冯定远,吴同山,陈运棣,曹镜溪.  养猪. 2002(02)



本文编号：3206425