内蒙古地区绵羊梅迪维斯纳病鉴定及PCR检测方法的建立

发布时间：2021-06-01 07:18

　　绵羊梅迪维斯纳病（Maedi visna disease,MVD）是由梅迪维斯纳病毒（Maedi visna virus,MVV）引起的一种多器官损伤可传播的疾病。该病可引起脑、肺脏、乳腺、关节等发生病变,一旦感染,最终引起死亡。MVD严重影响养羊业发展,给养羊业严重的经济损失。为鉴定内蒙古地区是否存在MVD,本试验从呼和浩特市周边某屠宰场采集12份病肺组织进行病理组织学和PCR鉴定。病理组织学结果显示:3份肺脏组织均发生纤维化,并且肺泡腔内Ⅱ型肺泡上皮细胞增生以及间质增宽,支气管和细支气管周围可见较多的淋巴滤泡增生;PCR检测结果显示:有3份肺组织为PCR阳性,测序序列与GenBank已登录的MVV KJ641278美国株同源率为87.4%;为了进一步确定3份肺组织确实有MVV感染,依据MVV全序列（登录号KJ641278）的LTR区设计1对引物,结果3份肺组织均为MVV阳性。通过病理组织学和PCR鉴定,确定内蒙古地区存在MVD。本试验为建立MVV特异性的巢式PCR检测方法,根据GenBank上发表的MVV（登录号KJ641278）基因序列设计合成巢式PCR引物,对采集的肺脏组织进行... 

【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

肺脏组织病理切片

２．３．２肺组织ＰＣＲ鉴定??将病理组织切片观察显示有ＭＶＤ病变的３份肺组织进行ＰＣＲ检测，扩增产??物约８００?ｂｐ，产物大小与预期片段大小相一致（图２）。??Ｍ?Ｉ?２?＾?４??■■■■■??２?ＯＯＯ?ｂｐ?■…??１?ＯＯＯ?ｂｐ?Ｉ??７ＳＯ?ｂｐ??５００?ｂｐ??２?ＳＯ?ｂ?ｐ?气、集??ｌＯＯ?ｂｐ?■??图２肺组织ＰＣＲ扩增的结果??Ｆｉｇ．２?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｌｕｎｇ?ｔｉｓｓｕｅ??标准分了？量ＤＬ２０００；?１：阴性对照；２？４：病肺组织??Ｍ：ＤＬ２０００?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒｌ：?ｎｅｇａｔｉｖｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ；?２？４：?ｄｉｓｅａｓｅｄ?ｌｕｎｇ?ｔｉｓｓｕｅ??２．３．３同源性分析??选取经ＰＣＲ验证正确的ＰＣＲ产物送往生工生物工程有限公司测序，利用??

３?１５－３?Ｊ８．８４?３８６．０?１８．．１?］８５．９３３．９８３－３Ｊ?４．３＾８３－?；?３?］?４?＾１２?７＊１８５＾８０?８７?８?＇?Ｓ５?７?＾?＾０?Ｓ?＇?ＳＢ?４?＾?８８?９?＂?８４?１?＾?８８?７?＊?８Ｓ?３?４?＇?ＫＣ１５５７９６??６?＾１１．４?°１９．５?｛１５．０?Ｉｌ６．１?（１３．１?ＳＨＨ｜８７．４］８８．５?１８４．７?（８１．１?；８４．９?｜８４．４?Ｊ?６?；?ＫＪ６４１２９６??７?！?１０７?Ｊ８ｊ?［ｌ７ｉ３?［１０４?９０７?［８９．３?｜８３．１?＊９０＾〇＇［８５．２！?７?：ＨＱ１５８１３４??８以．１?１〇石１（（（（（｜５＇１４＾＾４?８?；?ＨＲ０１１７５７??９?１３．６?＾２０．３?ｊ?１８：６?｜１２．２?Ｍ３４?［ｌ７．５｜?ｌ１．８?ｊ?１２．０?９０７ｊ?８６．？］?９?｜?ＫＣ１５５７８５??１０?Ｗ．８?＊?１?ｓｉ?ｈ９．３?１１８＾２?１１９．３?Ｔ２２．３?（１９＾５?；?１７＊３?ｈ８．１?ＩＩＰ，?８４．２?＊?８４．５?［＇?１０?］?ＥＶ１－Ｓ５１３９２??１１?ｈ４．０?Ｊ９．１?Ｉｌ８ｉ?｜ｌ￡ｓ?Ｍ２ｉ?｛ｌ７ｉ?ｈｌｉ｜ｌ！５?ｊｉｏｉ?Ｊ８．０?ｌＢ＾８７．４?Ｉ?１１?Ｉ?ＫＪ６４１２７８??１２?Ｍ６．９?°２０．０?１１９．１?［ｌ６．１?（１７．０?１１Ｔ８?｜１７．０?Ｈａｉ?；?１４．９?°１７．９?１４，１?１２?｜?ＭＶＶ－ＮＭ２０１８???；一１?！＇?２?＂；?３工４＇．［＇５?：?６?］?７＂?｜?８?；…９?１０?＊?１２?：?ｊ??图３?ＭＶＶ测序的

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本文编号：3209928