伪狂犬病毒IE180基因互补缺失系统的构建
发布时间：2021-06-06 05:44
伪狂犬病（Pseudorabies,PR或Aujeszky’s disease,AD）是由伪狂犬病毒（pseudorabies virus,PRV）感染引起的一种急性传染病。猪是伪狂犬病毒的唯一贮存宿主,该病毒的潜伏特性导致该病的难以根除和净化。PRV跟其他的甲型疱疹病毒基因组一样,按照严格的级联方式调节基因组的表达,即在复制转录的生命周期中被分为立即早期基因、早期基因和晚期基因。值得我们关注的是PRV不同于其他甲型疱疹病毒,它仅有一个立即早期基因即IE180,且同单纯疱疹病毒（HSV-1）的ICP4基因同源。IE180是PRV基因组中第一个被转录表达的蛋白,其作为强有力转录激活因子,对病毒基因组起始复制和早期转录是必需的。PRV基因组中存在着两个IE180基因拷贝,早期研究证实将IE180基因两个拷贝同时缺失而构建的重组克隆,这种重组克隆不感染宿主也不感染细胞而彻底丧失感染能力,不能拯救出活病毒。此外,PRV有着较为广泛的宿主谱,并逐渐被病毒学家们用做一个研究疱疹病毒分子生物学的模式生物并在动物模型中被广泛应用于神经追踪。目前,PRV IE180的生物学功能尚不完全明确,为进一步深入...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PRV基因组模式图(引自KLUPP等,2004)
PRV基因组进入细胞核后发生环化并根据DNA转录的先后顺序按照严格的转录级联调控进行转录（如图1-4），其PRV基因转录的先后顺序分为三类：起始转录的α基因即立即早期基因（Immediate-early,IE）、β基因即早期基因（Early）和γ基因即晚期基因（Late）。立即早期基因转录后合成大量的立即早期蛋白，依次激活早晚期基因的转录，PRV基因组完成转录复制后装配到衣壳从而形成核壳，核衣壳被转运到高尔基体，在不同被膜蛋白和包膜蛋白的作用下进行二次包膜化，从而形成成熟的病毒粒子，而后与细胞膜发生融合而被运送到细胞表面。图1-3PRV的复制周期(引自POMERANZ等,2005)13Fig.1-3ReplicationcycleofPRV(FromPOMERANZ,etal.,2005)13
中国农业科学院硕士学位论文第一章绪论5图1-4疱疹病毒基因组的表达调控Fig.1-4Expressionregulationofherpesvirusgenome大多数疱疹病毒基因组有多个立即早期基因，例如，单纯疱疹病毒Ⅰ型（Herpessimplexvirustype1,HSV-1）含有至少五个立即早期基因：US1（ICP22）、US12（ICP47）、UL54（ICP27）、RL2（ICP0）和RS1（ICP4）。而PRV只有唯一的一个立即早期基因IE180，是HSV-1ICP4的同源基因，其基因的大部分序列与潜伏感染期间大量表达的LAT的剪接物即长潜伏感染转录物基因LLT（Largelatencytranscript）重叠，IE180对病毒DNA复制和早期基因转录是一个必需元件基因(YEDOWITZetal.,2005)。IE180的表达不仅要启动基因组的转录级联调控，还要为细胞中病毒的复制和宿主的抗病毒防御系统提供一种最优的调控机制。与HSV-1的ICP4相似，IE180在内部重复区和末端重复区存在着两个拷贝，而在内部重复区的一个拷贝与LLT部分序列存在着互补重叠的关系。IE180基因作为潜在的转录激活因子，其仅有的两个结构域是IE180发挥功能的重要组成结构元件，即独立的DNA结合结构域和反式激活结构域。IE180作为PRV基因组中首个被转录的基因，其启动子即使没有其他病毒蛋白的辅助也可以直接在细胞质中引导IE180多肽成分的转录和表达，在细胞质中IE180蛋白大量合成后转运到细胞核并富集，调控早期基因的转录(CAMPBELLandPRESTON,1987;IHARA,etal.,1983;KOZMIK,etal.,1991)。由早期基因所编码的蛋白质主要在病毒基因组核苷酸代谢和DNA的复制中发挥重要作用。早期基因蛋白分为两类，第一类包括15种蛋白质，其中有七种（UL52、UL42、UL5、UL8、UL9、Ul29和UL30）是病毒DNA复制所必需的。第二类包括三种蛋白（EP0、US1和UL54）在病毒转录中以反式激活因子的角色而发挥作用(POMERANZ,
【参考文献】：
期刊论文
[1]伪狂犬病毒在潜伏感染猪体内的组织分布[J]. 龙晓婷,刘俊磊,郭洪,习杨,邱德新,陈焕春,周锐. 畜牧兽医学报. 2008(05)
[2]猪伪狂犬病流行新特点及综合防控策略[J]. 张建远,陈钦辉. 今日畜牧兽医. 2008(03)
[3]猪伪狂犬病及其防制[J]. 张家峥,牛桂玲,刘潇潇,王大民. 养猪. 2007(03)
[4]伪狂犬病流行现状及我国应采取的防制措施[J]. 童光志,陈焕春. 中国兽医学报. 1999(01)
本文编号：3213733
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PRV基因组模式图(引自KLUPP等,2004)
PRV基因组进入细胞核后发生环化并根据DNA转录的先后顺序按照严格的转录级联调控进行转录（如图1-4），其PRV基因转录的先后顺序分为三类：起始转录的α基因即立即早期基因（Immediate-early,IE）、β基因即早期基因（Early）和γ基因即晚期基因（Late）。立即早期基因转录后合成大量的立即早期蛋白，依次激活早晚期基因的转录，PRV基因组完成转录复制后装配到衣壳从而形成核壳，核衣壳被转运到高尔基体，在不同被膜蛋白和包膜蛋白的作用下进行二次包膜化，从而形成成熟的病毒粒子，而后与细胞膜发生融合而被运送到细胞表面。图1-3PRV的复制周期(引自POMERANZ等,2005)13Fig.1-3ReplicationcycleofPRV(FromPOMERANZ,etal.,2005)13
中国农业科学院硕士学位论文第一章绪论5图1-4疱疹病毒基因组的表达调控Fig.1-4Expressionregulationofherpesvirusgenome大多数疱疹病毒基因组有多个立即早期基因，例如，单纯疱疹病毒Ⅰ型（Herpessimplexvirustype1,HSV-1）含有至少五个立即早期基因：US1（ICP22）、US12（ICP47）、UL54（ICP27）、RL2（ICP0）和RS1（ICP4）。而PRV只有唯一的一个立即早期基因IE180，是HSV-1ICP4的同源基因，其基因的大部分序列与潜伏感染期间大量表达的LAT的剪接物即长潜伏感染转录物基因LLT（Largelatencytranscript）重叠，IE180对病毒DNA复制和早期基因转录是一个必需元件基因(YEDOWITZetal.,2005)。IE180的表达不仅要启动基因组的转录级联调控，还要为细胞中病毒的复制和宿主的抗病毒防御系统提供一种最优的调控机制。与HSV-1的ICP4相似，IE180在内部重复区和末端重复区存在着两个拷贝，而在内部重复区的一个拷贝与LLT部分序列存在着互补重叠的关系。IE180基因作为潜在的转录激活因子，其仅有的两个结构域是IE180发挥功能的重要组成结构元件，即独立的DNA结合结构域和反式激活结构域。IE180作为PRV基因组中首个被转录的基因，其启动子即使没有其他病毒蛋白的辅助也可以直接在细胞质中引导IE180多肽成分的转录和表达，在细胞质中IE180蛋白大量合成后转运到细胞核并富集，调控早期基因的转录(CAMPBELLandPRESTON,1987;IHARA,etal.,1983;KOZMIK,etal.,1991)。由早期基因所编码的蛋白质主要在病毒基因组核苷酸代谢和DNA的复制中发挥重要作用。早期基因蛋白分为两类，第一类包括15种蛋白质，其中有七种（UL52、UL42、UL5、UL8、UL9、Ul29和UL30）是病毒DNA复制所必需的。第二类包括三种蛋白（EP0、US1和UL54）在病毒转录中以反式激活因子的角色而发挥作用(POMERANZ,
【参考文献】：
期刊论文
[1]伪狂犬病毒在潜伏感染猪体内的组织分布[J]. 龙晓婷,刘俊磊,郭洪,习杨,邱德新,陈焕春,周锐. 畜牧兽医学报. 2008(05)
[2]猪伪狂犬病流行新特点及综合防控策略[J]. 张建远,陈钦辉. 今日畜牧兽医. 2008(03)
[3]猪伪狂犬病及其防制[J]. 张家峥,牛桂玲,刘潇潇,王大民. 养猪. 2007(03)
[4]伪狂犬病流行现状及我国应采取的防制措施[J]. 童光志,陈焕春. 中国兽医学报. 1999(01)
本文编号：3213733
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