贵州从江香猪PHKG1、PHKG2基因的克隆表达及功能研究
发布时间：2021-06-06 21:46
磷酸化酶激酶（phosphorylase kinase,PHK）是糖原分解代谢过程中的一种关键调节酶,包括α、β、γ、δ四个亚基,其中γ为催化亚基,γ亚基同时受到磷酸化酶激酶γ1（Phosphorylase kinaseγ1,PHKG1）和磷酸化酶激酶γ2（Phosphorylase kinaseγ2,PHKG2）基因编码,具有为机体肌肉收缩提供能量以及维持机体血糖平衡的作用。本试验以贵州从江香猪为研究对象,利用分子克隆技术、RNAi技术、细胞培养等技术,从分子水平和细胞水平分别研究PHKG1和PHKG2基因的功能。主要研究结果如下:（1）运用qRT-PCR技术检测从江香猪和大白猪不同组织间PHKG1和PHKG2基因的表达情况,发现PHKG1基因在大白猪和从江香猪背最长肌中表达量最高,在心脏、肝脏、脾脏、肾脏等内脏组织中表达量均较低,且该基因在大白猪和从江香猪肺组织中的表达量差异极显著（P<0.01）;PHKG2基因在组织中表达量为脾>肺>大肠>小肠>脂肪>肝>肾>胃>心>背最长肌,在大白猪和从江香猪所有组织中的表达量差异不显...
【文章来源】：贵州大学贵州省 211工程院校
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PHK家族基因组成（Maicheleetal,1996）
图 1-2 参与糖原代谢的肝磷酸化酶系统Fig.1-2 Hepatic phosphorylase system involved in glycogen metabolism1.2 PHKG1 基因概述PHKG1 基因编码的γ1 亚基是催化亚基，PHKG1 基因定位在人的 7 号染色体上(Jones et al.,1990)。Winchester 等人(2007)发现 PHKG1 基因存在一个弱多聚腺苷酸化与第 6 内含子的裂解位点，通过内含子的不同剪切方式形成不同的剪切体，进而在体内行使着不同的生物学功能。Elliott 等(2006)通过荧光素酶报告显示人的 PHKG1 基因启动子(2.4Kb)在肝细胞(HepG2)和小鼠成肌细胞(C2C12)中均能检测到其活性存在。1.2.1 PHKG1 基因国内外研究进展Wehner 等（1995）克隆了人的 PHKG1 基因序列，并且预测 PHKG1 基因突变可能是导致由磷酸化酶激酶（PHK）缺陷引起的肌糖原病候选基因之一，可能导致机体运动不耐，肌无力和肌肉萎缩疾病。Burwinkel 等（2003）根据小鼠和
图 1-3 RNAi 作用机制Fig.1-3 RNAi mechanism of action意义 和 PHKG2 基因在糖原代谢疾病相关的研究较丰相关研究少有涉猎，因此，本研究选取在糖原代基因 PHKG1 和 PHKG2，来探讨其与猪肉质性状测 PHKG1、PHKG2 基因在从江香猪和大白猪不同猪 PHKG1、PHKG2 基因结构功能以及组织表达生物学角度研究 PHKG1 和 PHKG2 基因对糖代的影响，从而挖掘与从江香猪肉质性状相关候选过程中的作用机理和调控机制，从分子机制上阐用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]5例糖原贮积症Ⅸc型患儿临床和PHKG2基因突变分析[J]. 周迪禹,房迪,邱文娟,叶军,韩连书,张惠文,余永国,梁黎黎,顾学范. 临床儿科杂志. 2017(08)
[2]不同猪肉品质的研究[J]. 孟丹,黄翠敏. 现代食品. 2017(11)
[3]肌肉糖原代谢调控对猪肉品质的影响[J]. 马现永,胡友军,王丽,杨雪芬,高开国,田志梅,崔艺燕,邓盾. 广东畜牧兽医科技. 2017(02)
[4]几种泰山中草药浸提物的抗疲劳作用研究[J]. 张静,杨阳,赵新娟. 湖北体育科技. 2015(07)
[5]从蛋白质组学研究壮骨止痛方治疗骨质疏松症作用机理[J]. 杨军,张小莉,莫新民. 辽宁中医药大学学报. 2013(11)
[6]秦川牛PYGM基因的表达及其遗传变异对胴体和体尺性状的影响[J]. 牛富彪,王丽君,杨菁,陈玲,王洪亮,贺花,刘小林. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2013(09)
[7]生猪宰前不同静养时间和屠宰方式对背长肌肌肉pH值和滴水损失的影响[J]. 邹华锋,文美英,魏星华,黄强力,凡强胜,闵成军. 肉类工业. 2013(05)
[8]蒙古马突触融合蛋白17（STX17）基因多态性及在不同毛色皮肤组织中的表达分析[J]. 李蓓,何小龙,芒来. 畜牧兽医学报. 2011(11)
[9]猪肌肉糖原酵解潜能及其组分与肉质、脂肪沉积和血液性状的相关性[J]. 段艳宇,周利华,袁飞,李琳,麻骏武. 江西农业大学学报. 2010(06)
[10]猪胴体GP与生产性能、胴体品质及肉质性状的关系[J]. 李梦云,陈代文,张克英. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2009(07)
博士论文
[1]siRNA设计中若干关键问题的研究[D]. 常亚萍.吉林大学 2013
[2]利用SOLiD测序技术鉴定和分析家蚕的非编码小RNA[D]. 蔡亦梅.中国科学院北京基因组研究所 2011
[3]猪糖原合成酶（GS）与糖原合成酶激酶（GSK3）基因的分离克隆、表达分析及其功能研究[D]. 王林杰.华中农业大学 2010
[4]大白猪与梅山猪肝脏组织差异表达基因的分离以及基因功能的研究[D]. 王艳.华中农业大学 2009
硕士论文
[1]糖原累积病Ⅸc型PHKG2基因新突变的鉴定和功能研究[D]. 李陶琳.广州医科大学 2017
[2]RNA干扰Bloom解旋酶基因表达对人前列腺癌PC3细胞生物学特性的影响[D]. 罗霂榃.贵州大学 2016
[3]运动后补糖对大鼠心肌AKT/mTOR通路激活的影响[D]. 李丁丁.首都体育学院 2016
[4]东北地区致犊牛腹泻大肠杆菌的分离鉴定与HPI毒力岛相关序列分析[D]. 王姣姣.吉林农业大学 2016
[5]山羊GSK-3β基因不同转录本的分离鉴定及表达模式研究[D]. 侯郁果.四川农业大学 2015
[6]猪肌肉糖酵解潜力及几个重要代谢调控基因的表达与肉质性状关联性分析[D]. 朱康平.四川农业大学 2012
[7]部分中外猪种ESR、PRLR、RYR1、RN、基因多态性检测及其与经济性状的关联分析[D]. 熊统安.华中农业大学 2005
本文编号：3215199
【文章来源】：贵州大学贵州省 211工程院校
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PHK家族基因组成（Maicheleetal,1996）
图 1-2 参与糖原代谢的肝磷酸化酶系统Fig.1-2 Hepatic phosphorylase system involved in glycogen metabolism1.2 PHKG1 基因概述PHKG1 基因编码的γ1 亚基是催化亚基，PHKG1 基因定位在人的 7 号染色体上(Jones et al.,1990)。Winchester 等人(2007)发现 PHKG1 基因存在一个弱多聚腺苷酸化与第 6 内含子的裂解位点，通过内含子的不同剪切方式形成不同的剪切体，进而在体内行使着不同的生物学功能。Elliott 等(2006)通过荧光素酶报告显示人的 PHKG1 基因启动子(2.4Kb)在肝细胞(HepG2)和小鼠成肌细胞(C2C12)中均能检测到其活性存在。1.2.1 PHKG1 基因国内外研究进展Wehner 等（1995）克隆了人的 PHKG1 基因序列，并且预测 PHKG1 基因突变可能是导致由磷酸化酶激酶（PHK）缺陷引起的肌糖原病候选基因之一，可能导致机体运动不耐，肌无力和肌肉萎缩疾病。Burwinkel 等（2003）根据小鼠和
图 1-3 RNAi 作用机制Fig.1-3 RNAi mechanism of action意义 和 PHKG2 基因在糖原代谢疾病相关的研究较丰相关研究少有涉猎，因此，本研究选取在糖原代基因 PHKG1 和 PHKG2，来探讨其与猪肉质性状测 PHKG1、PHKG2 基因在从江香猪和大白猪不同猪 PHKG1、PHKG2 基因结构功能以及组织表达生物学角度研究 PHKG1 和 PHKG2 基因对糖代的影响，从而挖掘与从江香猪肉质性状相关候选过程中的作用机理和调控机制，从分子机制上阐用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]5例糖原贮积症Ⅸc型患儿临床和PHKG2基因突变分析[J]. 周迪禹,房迪,邱文娟,叶军,韩连书,张惠文,余永国,梁黎黎,顾学范. 临床儿科杂志. 2017(08)
[2]不同猪肉品质的研究[J]. 孟丹,黄翠敏. 现代食品. 2017(11)
[3]肌肉糖原代谢调控对猪肉品质的影响[J]. 马现永,胡友军,王丽,杨雪芬,高开国,田志梅,崔艺燕,邓盾. 广东畜牧兽医科技. 2017(02)
[4]几种泰山中草药浸提物的抗疲劳作用研究[J]. 张静,杨阳,赵新娟. 湖北体育科技. 2015(07)
[5]从蛋白质组学研究壮骨止痛方治疗骨质疏松症作用机理[J]. 杨军,张小莉,莫新民. 辽宁中医药大学学报. 2013(11)
[6]秦川牛PYGM基因的表达及其遗传变异对胴体和体尺性状的影响[J]. 牛富彪,王丽君,杨菁,陈玲,王洪亮,贺花,刘小林. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2013(09)
[7]生猪宰前不同静养时间和屠宰方式对背长肌肌肉pH值和滴水损失的影响[J]. 邹华锋,文美英,魏星华,黄强力,凡强胜,闵成军. 肉类工业. 2013(05)
[8]蒙古马突触融合蛋白17（STX17）基因多态性及在不同毛色皮肤组织中的表达分析[J]. 李蓓,何小龙,芒来. 畜牧兽医学报. 2011(11)
[9]猪肌肉糖原酵解潜能及其组分与肉质、脂肪沉积和血液性状的相关性[J]. 段艳宇,周利华,袁飞,李琳,麻骏武. 江西农业大学学报. 2010(06)
[10]猪胴体GP与生产性能、胴体品质及肉质性状的关系[J]. 李梦云,陈代文,张克英. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2009(07)
博士论文
[1]siRNA设计中若干关键问题的研究[D]. 常亚萍.吉林大学 2013
[2]利用SOLiD测序技术鉴定和分析家蚕的非编码小RNA[D]. 蔡亦梅.中国科学院北京基因组研究所 2011
[3]猪糖原合成酶（GS）与糖原合成酶激酶（GSK3）基因的分离克隆、表达分析及其功能研究[D]. 王林杰.华中农业大学 2010
[4]大白猪与梅山猪肝脏组织差异表达基因的分离以及基因功能的研究[D]. 王艳.华中农业大学 2009
硕士论文
[1]糖原累积病Ⅸc型PHKG2基因新突变的鉴定和功能研究[D]. 李陶琳.广州医科大学 2017
[2]RNA干扰Bloom解旋酶基因表达对人前列腺癌PC3细胞生物学特性的影响[D]. 罗霂榃.贵州大学 2016
[3]运动后补糖对大鼠心肌AKT/mTOR通路激活的影响[D]. 李丁丁.首都体育学院 2016
[4]东北地区致犊牛腹泻大肠杆菌的分离鉴定与HPI毒力岛相关序列分析[D]. 王姣姣.吉林农业大学 2016
[5]山羊GSK-3β基因不同转录本的分离鉴定及表达模式研究[D]. 侯郁果.四川农业大学 2015
[6]猪肌肉糖酵解潜力及几个重要代谢调控基因的表达与肉质性状关联性分析[D]. 朱康平.四川农业大学 2012
[7]部分中外猪种ESR、PRLR、RYR1、RN、基因多态性检测及其与经济性状的关联分析[D]. 熊统安.华中农业大学 2005
本文编号：3215199
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