土鳖虫粉对高脂血症家兔血脂及其相关基因表达的影响

发布时间：2021-06-09 04:11

　　土鳖虫是一味传统的活血化瘀类中药材,含有丰富的活性成分且医药应用广泛。随着医学和分子生物学技术的不断发展,国内外学者对土鳖虫的研究越来越深入,更多的药用价值被发现,其应用前景广阔。高脂血症对人类健康的危害日益严重,引起了国内外学者的高度重视,研发低毒高效的治疗高脂血症的药物成为研究热点。本试验采用高脂饮食法制备家兔外源性高脂血症模型,通过土鳖虫粉高、中、低剂量治疗家兔高脂血症,旨在研究土鳖虫粉对高脂血症的治疗、作用机制及最适宜剂量。试验选用2.5月龄左右健康的雌性伊拉肉兔150只,体重（1.8±0.2）kg。随机分为空白对照组（30只）和模型制备组（120只）。模型制备期50天,模型制备结束后将模型组随机分为高、中、低土鳖虫粉治疗组和模型对照组,每组各30只。高、中、低剂量分别为0.45g/kg、0.3g/kg、0.15g/kg土鳖虫粉,治疗期30天。通过高脂血症家兔心脏采血,静置分离血清,对血脂指标的检测（胆固醇TC、甘油三脂TG、低密度脂蛋白LDL、高密度脂蛋白HDL）,以及RT-PCR对血脂代谢相关基因（ApoE、LDL-R）肝脏表达量的检测,研究土鳖虫粉对高脂血症的治疗效果及作... 

【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
1 前言
    1.1 高脂血症概况
        1.1.1 高脂血症的致病因
        1.1.2 高脂血症并发症
        1.1.3 高脂血症的治疗方法
        1.1.4 建造高脂血症模型
    1.2 土鳖虫的简介
        1.2.1 土鳖虫的药用成分
        1.2.2 土鳖虫的医学应用
    1.3 高脂血症相关基因
        1.3.1 载脂蛋白E基因(ApoE)
        1.3.2 低密度脂蛋白受体基因(LDL-R)
    1.4 实时荧光定量的原理与方法
        1.4.1 实时荧光定量的原理
        1.4.2 实时荧光定量的方法
    1.5 试验研究的目的与意义
        1.5.1 试验目的
        1.5.2 试验意义
2 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 试验动物与饲养管理
        2.1.2 试验设计
        2.1.3 基础日粮配方
        2.1.4 主要仪器设备与试剂
    2.2 试验方法
        2.2.1 高脂血症模型的制备
        2.2.2 组织样品的采集及处理
        2.2.3 检测指标与方法
        2.2.4 肝脏中总RNA的提取及反转录
        2.2.5 实时荧光定量PCR(Real time PCR)反应条件
        2.2.6 数据处理
3 结果与分析
    3.1 一般表征观察
    3.2 家兔肝脏指数的变化
    3.3. 血清中血脂水平的变化
        3.3.1 模型制备期血脂水平的变化
        3.3.2 土鳖虫粉对高脂血症家兔总胆固醇的影响
        3.3.3 土鳖虫粉对高脂血症家兔甘油三酯的影响
        3.3.4 土鳖虫粉对高脂血症家兔高密度脂蛋白的影响
        3.3.5 土鳖虫粉对高脂血症家兔低密度脂蛋白的影响
    3.4 土鳖虫粉对高脂血症家兔相关基因表达的影响
        3.4.1 肝脏总RNA的分离与检测
        3.4.2 内参基因、目的基因的扩增与检测
        3.4.3 内参基因(GAPDH)的表达
        3.4.4 ApoE基因的表达
        3.4.5 LDL-R基因的表达
4 讨论
    4.1 家兔高脂血症模型的制备
    4.2 土鳖虫粉对高脂血症家兔血脂水平的调节
    4.3 土鳖虫粉对高脂血症家兔相关基因表达的影响
        4.3.1 土鳖虫粉对高脂血症家兔ApoE基因的调节
        4.3.2 土鳖虫粉对高脂血症家兔LDL-R基因的调节
5 结论
致谢
参考文献
附录
攻读硕士学位期间发表的学术论文



本文编号：3219900