山羊睾丸中lncRNA WNT3-IT通过调节WNT3表达影响支持细胞增殖
发布时间：2021-06-09 23:12
睾丸支持细胞的增殖分化能力直接影响精子发生过程、雄性生殖发育。WNTs蛋白可以参与调控支持细胞增殖分化与精子发生。随着生物信息学的发展,关于细胞中lncRNA调控靶基因表达已经成为当前的热点研究。因此关于在支持细胞增殖分化过程中是否存在调控WNTs蛋白表达的lncRNA是一个值得研究的课题。本研究以大足黑山羊为实验对象,通过采集大足黑山羊初生、青春期前期、成熟三个年龄段的睾丸组织,进行高通量测序,预测在睾丸生长发育过程中与WNTs相关的lncRNA,最终筛选出lncRNA WNT3-IT可能靶向调控WNT3的表达。为了验证其对WNT3的表达调控,在体外培养睾丸支持细胞基础上,采用石蜡切片、荧光原位杂交、干扰、过表达、细胞毒性实验、Western blot、qPCR等技术,对lncRNA WNT3-IT与WNT3表达关系进行定位分析、干扰和过表达分析以及对lncRNA WNT3-IT对支持细胞增殖活性与增殖周期进行分析,得到以下结果:1.睾丸组织石蜡切片结果显示,初生的大足黑山羊睾丸中只含有支持细胞与精原干细胞;2月龄的睾丸中已经有支持细胞与精原干细胞的增殖分化但没有精子细胞的存在;9月...
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
lncRNA与基因的相对位置
图 1-2 lncRNA 的两种调控机制Figure 1-2 Two regulatory mechanisms of lncRNAa: lncRNA 调控组蛋白标记的激活和抑制; b: lncRNA 充当 miRNA 海绵调控 mRNA 翻译: lncRNA regulates the activation and inhibition of histone markers; b: lncRNA acts as a miRponge to regulate mRNAtranslation)还有许多 lncRNA 能与染色质重塑复合物共同调控基因的表达。尽管这一调制还不是十分清楚，但有一些研究已经表明 lncRNA 可以通过补充转录抑制复来达到沉默目的基因片段的目的。例如在Ｘ染色体失活（XCI）过程中，为了性哺乳动物其中一条 X 染色体失活，从而使雌性体内 X 染色体的基因表达趋衡，这时需要一些 lncRNA 参与到这个过程中，包括 Xist、Tsix 和 Xite[36,37]，XCI修饰的Xist[38]补充染色体复合物用来沉默X（i被沉默的X染色体）。LncRN这一调控机制也发生在癌症中，如 lncRNASChLAP1（second chromosome lossociated with prostate-1）与人类前列腺癌细胞中染色质重塑复合体 SWI/SNF 的[39]。lncRNASChLAP1 的下调导致细胞侵袭和增殖受损，而敲除下调 SMARCSWI/SNF 的组成部分）后导致癌症的恶化，从而表明 lncRNA SChLAP1 WI/SNF 在人类前列腺癌细胞系中的具有相反功能。
第 1 章 文献综述物过程中起着都扮演着至关重要的角色，典型的作用有：支架分子、诱饵分子、信号分子、或核糖体抑制物、核糖体活化剂、海绵体和 small-ncRNA 前体等。其中 lncRNA 的支架作用主要是在基因表达调控参与了表观遗传和转录控制的过程研究表明，lncRNA 支架与许多核小体重塑复合物有关联[44, 45]，其介导的这些复合物的组装重塑了染色质结构域的组织，从而允许包括转录、重组、DNA 修复以及RNA 加工在内的所有基于 DNA 的生物学过程的调节[46, 47]。
【参考文献】：
期刊论文
[1]牛体外受精胚胎抗氧化相关的长链非编码RNA表达谱[J]. 郭芹芹,李凤,孙尉峻,郝海生,刘岩,赵学明,庞云渭,朱化彬,杜卫华. 畜牧兽医学报. 2017(07)
[2]Wnt/β-catenin信号通路在成人睾丸支持细胞增殖中的作用及其机制[J]. 李毅,张帅,殷钢,史琨,邴鲁军,郝晶. 山东大学学报(医学版). 2012(03)
[3]大足黑山羊种质特性[J]. 赵中权,张家骅,李周权,王贤海,陈长庚,徐恢仲. 中国畜牧杂志. 2008(15)
本文编号：3221512
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
lncRNA与基因的相对位置
图 1-2 lncRNA 的两种调控机制Figure 1-2 Two regulatory mechanisms of lncRNAa: lncRNA 调控组蛋白标记的激活和抑制; b: lncRNA 充当 miRNA 海绵调控 mRNA 翻译: lncRNA regulates the activation and inhibition of histone markers; b: lncRNA acts as a miRponge to regulate mRNAtranslation)还有许多 lncRNA 能与染色质重塑复合物共同调控基因的表达。尽管这一调制还不是十分清楚，但有一些研究已经表明 lncRNA 可以通过补充转录抑制复来达到沉默目的基因片段的目的。例如在Ｘ染色体失活（XCI）过程中，为了性哺乳动物其中一条 X 染色体失活，从而使雌性体内 X 染色体的基因表达趋衡，这时需要一些 lncRNA 参与到这个过程中，包括 Xist、Tsix 和 Xite[36,37]，XCI修饰的Xist[38]补充染色体复合物用来沉默X（i被沉默的X染色体）。LncRN这一调控机制也发生在癌症中，如 lncRNASChLAP1（second chromosome lossociated with prostate-1）与人类前列腺癌细胞中染色质重塑复合体 SWI/SNF 的[39]。lncRNASChLAP1 的下调导致细胞侵袭和增殖受损，而敲除下调 SMARCSWI/SNF 的组成部分）后导致癌症的恶化，从而表明 lncRNA SChLAP1 WI/SNF 在人类前列腺癌细胞系中的具有相反功能。
第 1 章 文献综述物过程中起着都扮演着至关重要的角色，典型的作用有：支架分子、诱饵分子、信号分子、或核糖体抑制物、核糖体活化剂、海绵体和 small-ncRNA 前体等。其中 lncRNA 的支架作用主要是在基因表达调控参与了表观遗传和转录控制的过程研究表明，lncRNA 支架与许多核小体重塑复合物有关联[44, 45]，其介导的这些复合物的组装重塑了染色质结构域的组织，从而允许包括转录、重组、DNA 修复以及RNA 加工在内的所有基于 DNA 的生物学过程的调节[46, 47]。
【参考文献】：
期刊论文
[1]牛体外受精胚胎抗氧化相关的长链非编码RNA表达谱[J]. 郭芹芹,李凤,孙尉峻,郝海生,刘岩,赵学明,庞云渭,朱化彬,杜卫华. 畜牧兽医学报. 2017(07)
[2]Wnt/β-catenin信号通路在成人睾丸支持细胞增殖中的作用及其机制[J]. 李毅,张帅,殷钢,史琨,邴鲁军,郝晶. 山东大学学报(医学版). 2012(03)
[3]大足黑山羊种质特性[J]. 赵中权,张家骅,李周权,王贤海,陈长庚,徐恢仲. 中国畜牧杂志. 2008(15)
本文编号：3221512
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