鸡IL-4真核表达载体pcDNA3.1（+）-ChIL-4的构建及对鸡免疫功能的影响

发布时间：2021-06-10 17:46

　　我国家禽养殖具有很大规模,家禽养殖生产过程中疫病的防制尤其重要。目前,主要通过给予疫苗预防疫病。为了提高疫苗的免疫效果,免疫佐剂的研究成为研究的热点之一。细胞因子佐剂由于其功能专一、生物活性强及副作用小等特点成为广大研究人员研究的重点。本研究探索了IL-4的免疫佐剂作用,开展了以下试验：根据NCBI中鸡IL-4的基因序列（登录号AJ621249）,进行引物设计,并克隆出鸡IL-4基因;经酶切以及PCR鉴定及序列测定,证实ChIL-4基因克隆成功；与NCBI发表的鸡IL-4基因序列比对,证实同源性为100%。最终成功构建重组真核表达载体pcDNA3.1（+）-ChIL-4。动物试验共分6个组,分别为生理盐水对照组,疫苗对照组,pcDNA3.1（+）空载体对照组,以及50μg、100μg、200μg3个不同剂量的pcDNA3.1（+）-ChIL-4实验组,研究其对雏鸡血液活性T/B淋巴细胞百分率、ND与IB疫苗所诱导的抗体水平、免疫器官（脾脏）指数的影响。试验结果表明,pcDNA3.1（+）-ChIL-4可提高雏鸡血液中活性T/B淋巴细胞的百分率,提高ND、IB疫苗所诱导的抗体水平,在14... 

【文章来源】：山西农业大学山西省

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

鸡脾脏细胞总RNA电泳图谱

ig.l Electrophoretogram of chicken splenocyte total RNA18S和28S 3条rRNA条带，可看出所提取的总RN度、OD260与OD280并计算比值，结果分别为695n4的电泳图谱

M: DNA Marker DLIOOO 1、2: Purification of PCR amplification of ChIL-4由图3可知，纯化回收的PCR产物片段与预期长度一致，且纯度很高，没有杂质污染。测定纯化回收的PCR产物浓度、OD260与OD280并计算比值，结果分别为50ng尔L和 L95。3.1.4重组克隆载体pMD19-T-C;7/Z-4的鉴定(1) Oz/Z-Z的转化-19 -I

【参考文献】：
期刊论文
[1]CD40-IgG1Fc融合蛋白真核表达载体的构建及表达[J]. 张家永,李和军,李频,周小玲,郑祥雄.  福建医科大学学报. 2007(02)
[2]CD80-IgG1Fc段融合蛋白真核表达载体的构建及表达[J]. 李和军,李频,周小玲,郑祥雄.  细胞与分子免疫学杂志. 2006(01)
[3]Cytokines,STATs and Liver Disease[J]. Bin Gao~(1,2) ~1Section on Liver Biology,Laboratory of Physiologic Studies,National Institute on Alcohol Abuse and Alcoholism,National Institutes of Health,Bethesda,MD 20892,USA;.  Cellular & Molecular Immunology. 2005(02)



本文编号：3222841